摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
引言 | 第9-10页 |
1 文献综述 | 第10-23页 |
1.1 PES1概述 | 第10-14页 |
1.1.1 PES1的发现 | 第10页 |
1.1.2 PES1的结构 | 第10-11页 |
1.1.3 PES1蛋白活性的调控 | 第11-13页 |
1.1.4 PES1的生物学功能 | 第13-14页 |
1.2 SUMO简介 | 第14-21页 |
1.2.1 SUMO化修饰过程及其影响 | 第14-16页 |
1.2.2 SUMO化修饰与其他翻译后修饰的关系 | 第16-18页 |
1.2.3 SUMO化修饰的生物学功能 | 第18-19页 |
1.2.4 SUMO化修饰与疾病 | 第19-21页 |
1.3 本论文的选题依据和研究内容 | 第21-23页 |
1.3.1 选题依据 | 第21-22页 |
1.3.2 研究内容 | 第22-23页 |
2 PES1的SUMO化修饰 | 第23-33页 |
2.1 引言 | 第23页 |
2.2 仪器与试剂 | 第23-26页 |
2.2.1 仪器 | 第23-24页 |
2.2.2 试剂 | 第24-26页 |
2.3 实验方法 | 第26-30页 |
2.3.1 质粒提取 | 第26-27页 |
2.3.2 细胞培养 | 第27页 |
2.3.3 质粒的转染 | 第27-28页 |
2.3.4 WB实验样品的制备 | 第28页 |
2.3.5 免疫印迹 | 第28-29页 |
2.3.6 免疫共沉淀 | 第29-30页 |
2.4 结果与讨论 | 第30-32页 |
2.4.1 PES1的SUMO化位点分析 | 第30页 |
2.4.2 PES1与SUMO蛋白相互作用 | 第30-31页 |
2.4.3 PES1与SUMO1相互作用 | 第31-32页 |
2.5 小结 | 第32-33页 |
3 PES1主要的SUMO化位点分析 | 第33-41页 |
3.1 引言 | 第33页 |
3.2 仪器与试剂 | 第33-35页 |
3.2.1 仪器 | 第33页 |
3.2.2 试剂 | 第33-35页 |
3.3 实验方法 | 第35-37页 |
3.3.1 PES1定点突变体的构建 | 第35-36页 |
3.3.2 突变体的质粒转化 | 第36-37页 |
3.3.3 质粒提取 | 第37页 |
3.3.4 细胞培养 | 第37页 |
3.3.5 质粒的细胞转染 | 第37页 |
3.3.6 蛋白质定量 | 第37页 |
3.3.7 免疫印迹(Western Blotting) | 第37页 |
3.4 结果与讨论 | 第37-39页 |
3.4.1 PES1突变体的表达 | 第37-38页 |
3.4.2 PES1的SUMO化位点分析 | 第38-39页 |
3.5 小结 | 第39-41页 |
4 SUMO化修饰对PES1细胞定位及稳定性的影响 | 第41-47页 |
4.1 引言 | 第41页 |
4.2 仪器与试剂 | 第41页 |
4.2.1 仪器 | 第41页 |
4.2.2 试剂 | 第41页 |
4.3 实验方法 | 第41-43页 |
4.3.1 细胞培养 | 第41-42页 |
4.3.2 免疫共沉淀 | 第42页 |
4.3.3 免疫荧光 | 第42页 |
4.3.4 蛋白定量 | 第42-43页 |
4.4 结果与讨论 | 第43-45页 |
4.4.1 PES1的SUMO化修饰对其在细胞内的定位的影响 | 第43-44页 |
4.4.2 PES1 SUMO化修饰位点对其稳定性的影响 | 第44-45页 |
4.5 小结 | 第45-47页 |
5 SUMO化修饰对PES1功能的调控 | 第47-55页 |
5.1 引言 | 第47页 |
5.2 仪器与试剂 | 第47页 |
5.2.1 仪器 | 第47页 |
5.2.2 试剂 | 第47页 |
5.3 实验方法 | 第47-49页 |
5.3.1 细胞培养 | 第47-48页 |
5.3.2 质粒的细胞转染 | 第48页 |
5.3.3 荧光素酶报告基因实验 | 第48页 |
5.3.4 免疫共沉淀 | 第48页 |
5.3.5 MTT实验 | 第48-49页 |
5.4 结果与讨论 | 第49-54页 |
5.4.1 PES1 SUMO化修饰对ERα的激活功能的影响 | 第49-50页 |
5.4.2 PES1 SUMO化修饰对p53转录活性的影响 | 第50-53页 |
5.4.3 PES1的SUMO化修饰对细胞增殖的影响 | 第53-54页 |
5.5 小结 | 第54-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |