| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 中英文缩略词表 | 第10-13页 |
| 第一章 热处理精子对受精、胚胎发育及表观遗传学影响研究 | 第13-54页 |
| 1. 前言 | 第13-15页 |
| 2. 材料与方法 | 第15-25页 |
| 2.1 主要试剂 | 第15页 |
| 2.2 主要抗体 | 第15-16页 |
| 2.3 主要仪器 | 第16-17页 |
| 2.4 常用培养液和试剂的配制方法 | 第17-19页 |
| 2.5 试剂的配置 | 第19-20页 |
| 2.6 卵子的准备 | 第20-21页 |
| 2.7 小鼠精子附睾收集及热处理 | 第21页 |
| 2.8 显微注射针的制作 | 第21-22页 |
| 2.9 小鼠卵胞浆内单精子注射 | 第22-23页 |
| 2.10 卵子激活 | 第23页 |
| 2.11 受精观察和胚胎培养与收集 | 第23页 |
| 2.12 小鼠胚胎移植 | 第23页 |
| 2.13 核型分析 | 第23-24页 |
| 2.14 原核期DNA甲基化和H3K4三甲基化的免疫荧光检测 | 第24页 |
| 2.15 各个时期免疫荧光检测 | 第24-25页 |
| 2.16 统计学处理 | 第25页 |
| 3. 结果 | 第25-39页 |
| 3.1 热处理精子ICSI后的卵母细胞激活能力 | 第25-26页 |
| 3.2 热处理精子ICSI联合人工激活后的卵母细胞激活和胚胎发育能力 | 第26页 |
| 3.3 合子的DNA甲基化 | 第26-28页 |
| 3.4 合子的组蛋白H3赖氨酸4三甲基化 | 第28-29页 |
| 3.5 核型分析 | 第29-30页 |
| 3.6 胚胎移植 | 第30-32页 |
| 3.7 对照组和热处理组的H3K9-TriM分布模式 | 第32-34页 |
| 3.8 对照组和热处理组的ACH4K12分布模式 | 第34-36页 |
| 3.9 对照组和热处理组的DNA甲基化和H3K27-TriM分布模式 | 第36-38页 |
| 3.10 热处理组囊胚的H3K27-TriM缺失 | 第38-39页 |
| 4. 讨论 | 第39-46页 |
| 4.1 热处理精子与受精机制 | 第39-41页 |
| 4.2 热处理精子与早期胚胎表观遗传学 | 第41-44页 |
| 4.3 热处理精子与HIV | 第44-46页 |
| 5. 参考文献 | 第46-54页 |
| 第二章 零下20度保存小鼠精子的胚胎发育和表观遗传学 | 第54-72页 |
| 1. 前言 | 第54-55页 |
| 2. 材料与方法 | 第55-57页 |
| 2.1 小鼠卵母细胞的准备 | 第55-56页 |
| 2.2 精子准备、冷冻和解冻 | 第56页 |
| 2.3 小鼠ICSI | 第56页 |
| 2.4 核型分析 | 第56-57页 |
| 2.5 免疫荧光检测 | 第57页 |
| 2.6 免疫荧光定量分析和数据分析 | 第57页 |
| 3. 结果 | 第57-64页 |
| 3.1 不含冷冻保护剂-20℃冻存精子的受精和胚胎发育情况 | 第57-58页 |
| 3.2 新鲜和冷冻精子1-细胞期合子的染色体分析 | 第58-59页 |
| 3.3 种植前胚胎的甲基化模式的比较 | 第59-61页 |
| 3.4 两组种植前胚胎组蛋白H3K4位点修饰的分布模式 | 第61-62页 |
| 3.5 两组种植前胚胎组蛋白H4K12位点的乙酰化修饰 | 第62-64页 |
| 4. 讨论 | 第64-67页 |
| 5. 参考文献 | 第67-72页 |
| 全文总结 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 攻读学位期间的研究成果及所获荣誉 | 第75-76页 |
| 综述一 受精机制与受精失败及对策 | 第76-88页 |
| 参考文献 | 第82-88页 |
| 综述二 艾滋病与现代辅助生殖技术 | 第88-98页 |
| 参考文献 | 第94-98页 |
| 英文论文一：HEATED SPERMATOZOA：EFFECTS ON EMBRYONIC DEVELOPMENTAND EPIGENETICS | 第98-114页 |
| References | 第110-114页 |
| 英文论文二：DEFECTIVE HISTONE H3K27 TRIMETHYLATION MODIFICATIONIN EMBRYOS DERIVED FROM HEATED MOUSE SPERM | 第114-125页 |
| References | 第122-125页 |
