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组蛋白去乙酰化酶参与ERF转录因子调控的香蕉果实成熟机制研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一章 综述第15-25页
    1.1 香蕉概述第15页
    1.2 香蕉果实成熟机制研究进展第15-18页
        1.2.1 乙烯与香蕉果实成熟第15-17页
        1.2.2 细胞壁多糖代谢与香蕉果实后熟软化第17-18页
    1.3 ERF(Ethylene response factor)转录因子的研究进展第18-20页
        1.3.1 ERF转录因子的分类和结构特征第18-19页
        1.3.2 ERF在植物信号转导中的作用第19页
        1.3.3 ERF在果实成熟衰老中的作用第19-20页
    1.4 组蛋白去乙酰化酶的研究进展第20-23页
        1.4.1 组蛋白去乙酰化酶的表观遗传学作用第20-21页
        1.4.2 组蛋白去乙酰化酶的分类第21页
        1.4.3 HDAC在植物生长发育中的作用第21-22页
        1.4.4 HDAC在植物胁迫反应中的作用第22-23页
    1.5 本研究的目标和意义第23-25页
第二章 MaERF11通过抑制MaACO1和MaEXP2/7/8 的表达来参与调控香蕉果实的后熟第25-49页
    2.1 引言第25-26页
    2.2 材料与方法第26-35页
        2.2.1 实验材料第26页
        2.2.2 香蕉果实的处理第26页
        2.2.3 香蕉成熟相关生理指标测定方法第26-27页
        2.2.4 总RNA提取第27-28页
        2.2.5 cDNA的合成第28页
        2.2.6 实时荧光定量PCR第28-29页
        2.2.7 香蕉基因组DNA提取第29页
        2.2.8 蛋白纯化第29-30页
        2.2.9 凝胶阻滞迁移实验第30-33页
        2.2.10 双荧光素酶报告基因系统实验第33页
        2.2.11 MaERF11抗体的制备第33页
        2.2.12 染色体免疫共沉淀实验步骤第33-35页
    2.3 结果与分析第35-47页
        2.3.1 GST蛋白和GST-MaERF11N融合蛋白的纯化第35-36页
        2.3.2 MaERF11特异结合GCC-box第36-37页
        2.3.3 MaERF11在体外绑定MaACO1和MaEXP2/7/8 的启动子第37-38页
        2.3.4 MaERF11在体内绑定MaACO1和MaEXP2/7/8 的启动子第38-39页
        2.3.5 MaERF11在烟草BY2细胞内具有转录抑制活性第39页
        2.3.6 MaERF11在烟草叶片中具有转录抑制活性第39-42页
        2.3.7 MaERF11抑制MaACO1和MaEXP2/7/8 的启动子活性第42页
        2.3.8 MaERF11对发生突变的MaACO1和MaEXP8启动子没有抑制作用第42-44页
        2.3.9 香蕉果实后熟过程中生理指标的变化第44-46页
        2.3.10 香蕉果实后熟过程中MaACO1和MaEXP2/7/8 的表达特性第46-47页
    2.4 讨论第47-48页
    2.5 小结第48-49页
第三章 MaERF11招募MaHDA1调控香蕉果实后熟过程中MaACO1和MaEXP2/7/8的表达第49-71页
    3.1 引言第49页
    3.2 材料与方法第49-53页
        3.2.1 实验材料第49-50页
        3.2.2 拟南芥总RNA提取第50页
        3.2.3 拟南芥基因组DNA提取第50页
        3.2.4 酵母双杂交实验第50-51页
        3.2.5 亚细胞共定位实验第51页
        3.2.6 双分子荧光互补实验第51-52页
        3.2.7 免疫共沉淀试验第52-53页
        3.2.8 氨基酸序列保守域分析和多重比对第53页
        3.2.9 组蛋白去乙酰化酶活性检测第53页
    3.3 结果与分析第53-67页
        3.3.1 MaERF11与MaHDA1的相互作用第53-57页
        3.3.2 MaHDA1具有组蛋白去乙酰化酶活性第57-58页
        3.3.3 MaHDA1可以增强MaERF11对下游靶基因的抑制能力第58页
        3.3.4 MaHDA1降低MaERF11下游靶基因启动子的组蛋白乙酰化水平第58-61页
        3.3.5 MaACO1和MaEXP2/7/8 成熟及未成熟香蕉果实中组蛋白乙酰化水平的变化第61-63页
        3.3.6 MaERF11与AtERF4的同源性分析第63页
        3.3.7 AtERF4抑制AtACO7和AtEXP1/3/10 的表达第63-65页
        3.3.8 野生型Col与突变体erf4-1 中AtACO7和AtEXP1/3/10 的组蛋白乙酰化水平比较第65-67页
    3.4 讨论第67-70页
    3.5 小结第70-71页
第四章 MaHDACs的转录表达分析以及MaHDA6对MaERF11/15 的调控作用第71-85页
    4.1 引言第71-72页
    4.2 材料与方法第72-73页
        4.2.1 实验材料第72页
        4.2.2 氨基酸序列分析第72页
        4.2.3 荧光定量PCR第72页
        4.2.4 亚细胞定位第72-73页
        4.2.5 染色质免疫共沉淀第73页
    4.3 结果与分析第73-82页
        4.3.1 MaHDACs的序列分析第73页
        4.3.2 MaHDACs的进化关系和氨基酸序列保守域分析第73-76页
        4.3.3 香蕉果实采后成熟过程中MaHDACs基因的表达特性第76-78页
        4.3.4 MaHDA6蛋白的亚细胞定位分析第78-79页
        4.3.5 MaHDA6具有组蛋白去乙酰化酶活性第79-80页
        4.3.6 MaERF11和MaERF15是MaHDA6的靶基因第80-82页
    4.4 讨论第82-84页
        4.4.1 香蕉MaHDACs基因家族的分类第82页
        4.4.2 MaHDACs与香蕉果实后熟的关系第82-83页
        4.4.3 MaHDA6的亚细胞定位与组蛋白去乙酰化酶活性第83页
        4.4.4 MaHDA6对MaERF11/15 的调控作用第83-84页
    4.5 小结第84-85页
结论与推论第85-87页
致谢第87-88页
参考文献第88-99页
附录A 在读期间发表的论文第99-100页
附录B 引物列表第100-106页

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