摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 综述 | 第15-25页 |
1.1 香蕉概述 | 第15页 |
1.2 香蕉果实成熟机制研究进展 | 第15-18页 |
1.2.1 乙烯与香蕉果实成熟 | 第15-17页 |
1.2.2 细胞壁多糖代谢与香蕉果实后熟软化 | 第17-18页 |
1.3 ERF(Ethylene response factor)转录因子的研究进展 | 第18-20页 |
1.3.1 ERF转录因子的分类和结构特征 | 第18-19页 |
1.3.2 ERF在植物信号转导中的作用 | 第19页 |
1.3.3 ERF在果实成熟衰老中的作用 | 第19-20页 |
1.4 组蛋白去乙酰化酶的研究进展 | 第20-23页 |
1.4.1 组蛋白去乙酰化酶的表观遗传学作用 | 第20-21页 |
1.4.2 组蛋白去乙酰化酶的分类 | 第21页 |
1.4.3 HDAC在植物生长发育中的作用 | 第21-22页 |
1.4.4 HDAC在植物胁迫反应中的作用 | 第22-23页 |
1.5 本研究的目标和意义 | 第23-25页 |
第二章 MaERF11通过抑制MaACO1和MaEXP2/7/8 的表达来参与调控香蕉果实的后熟 | 第25-49页 |
2.1 引言 | 第25-26页 |
2.2 材料与方法 | 第26-35页 |
2.2.1 实验材料 | 第26页 |
2.2.2 香蕉果实的处理 | 第26页 |
2.2.3 香蕉成熟相关生理指标测定方法 | 第26-27页 |
2.2.4 总RNA提取 | 第27-28页 |
2.2.5 cDNA的合成 | 第28页 |
2.2.6 实时荧光定量PCR | 第28-29页 |
2.2.7 香蕉基因组DNA提取 | 第29页 |
2.2.8 蛋白纯化 | 第29-30页 |
2.2.9 凝胶阻滞迁移实验 | 第30-33页 |
2.2.10 双荧光素酶报告基因系统实验 | 第33页 |
2.2.11 MaERF11抗体的制备 | 第33页 |
2.2.12 染色体免疫共沉淀实验步骤 | 第33-35页 |
2.3 结果与分析 | 第35-47页 |
2.3.1 GST蛋白和GST-MaERF11N融合蛋白的纯化 | 第35-36页 |
2.3.2 MaERF11特异结合GCC-box | 第36-37页 |
2.3.3 MaERF11在体外绑定MaACO1和MaEXP2/7/8 的启动子 | 第37-38页 |
2.3.4 MaERF11在体内绑定MaACO1和MaEXP2/7/8 的启动子 | 第38-39页 |
2.3.5 MaERF11在烟草BY2细胞内具有转录抑制活性 | 第39页 |
2.3.6 MaERF11在烟草叶片中具有转录抑制活性 | 第39-42页 |
2.3.7 MaERF11抑制MaACO1和MaEXP2/7/8 的启动子活性 | 第42页 |
2.3.8 MaERF11对发生突变的MaACO1和MaEXP8启动子没有抑制作用 | 第42-44页 |
2.3.9 香蕉果实后熟过程中生理指标的变化 | 第44-46页 |
2.3.10 香蕉果实后熟过程中MaACO1和MaEXP2/7/8 的表达特性 | 第46-47页 |
2.4 讨论 | 第47-48页 |
2.5 小结 | 第48-49页 |
第三章 MaERF11招募MaHDA1调控香蕉果实后熟过程中MaACO1和MaEXP2/7/8的表达 | 第49-71页 |
3.1 引言 | 第49页 |
3.2 材料与方法 | 第49-53页 |
3.2.1 实验材料 | 第49-50页 |
3.2.2 拟南芥总RNA提取 | 第50页 |
3.2.3 拟南芥基因组DNA提取 | 第50页 |
3.2.4 酵母双杂交实验 | 第50-51页 |
3.2.5 亚细胞共定位实验 | 第51页 |
3.2.6 双分子荧光互补实验 | 第51-52页 |
3.2.7 免疫共沉淀试验 | 第52-53页 |
3.2.8 氨基酸序列保守域分析和多重比对 | 第53页 |
3.2.9 组蛋白去乙酰化酶活性检测 | 第53页 |
3.3 结果与分析 | 第53-67页 |
3.3.1 MaERF11与MaHDA1的相互作用 | 第53-57页 |
3.3.2 MaHDA1具有组蛋白去乙酰化酶活性 | 第57-58页 |
3.3.3 MaHDA1可以增强MaERF11对下游靶基因的抑制能力 | 第58页 |
3.3.4 MaHDA1降低MaERF11下游靶基因启动子的组蛋白乙酰化水平 | 第58-61页 |
3.3.5 MaACO1和MaEXP2/7/8 成熟及未成熟香蕉果实中组蛋白乙酰化水平的变化 | 第61-63页 |
3.3.6 MaERF11与AtERF4的同源性分析 | 第63页 |
3.3.7 AtERF4抑制AtACO7和AtEXP1/3/10 的表达 | 第63-65页 |
3.3.8 野生型Col与突变体erf4-1 中AtACO7和AtEXP1/3/10 的组蛋白乙酰化水平比较 | 第65-67页 |
3.4 讨论 | 第67-70页 |
3.5 小结 | 第70-71页 |
第四章 MaHDACs的转录表达分析以及MaHDA6对MaERF11/15 的调控作用 | 第71-85页 |
4.1 引言 | 第71-72页 |
4.2 材料与方法 | 第72-73页 |
4.2.1 实验材料 | 第72页 |
4.2.2 氨基酸序列分析 | 第72页 |
4.2.3 荧光定量PCR | 第72页 |
4.2.4 亚细胞定位 | 第72-73页 |
4.2.5 染色质免疫共沉淀 | 第73页 |
4.3 结果与分析 | 第73-82页 |
4.3.1 MaHDACs的序列分析 | 第73页 |
4.3.2 MaHDACs的进化关系和氨基酸序列保守域分析 | 第73-76页 |
4.3.3 香蕉果实采后成熟过程中MaHDACs基因的表达特性 | 第76-78页 |
4.3.4 MaHDA6蛋白的亚细胞定位分析 | 第78-79页 |
4.3.5 MaHDA6具有组蛋白去乙酰化酶活性 | 第79-80页 |
4.3.6 MaERF11和MaERF15是MaHDA6的靶基因 | 第80-82页 |
4.4 讨论 | 第82-84页 |
4.4.1 香蕉MaHDACs基因家族的分类 | 第82页 |
4.4.2 MaHDACs与香蕉果实后熟的关系 | 第82-83页 |
4.4.3 MaHDA6的亚细胞定位与组蛋白去乙酰化酶活性 | 第83页 |
4.4.4 MaHDA6对MaERF11/15 的调控作用 | 第83-84页 |
4.5 小结 | 第84-85页 |
结论与推论 | 第85-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-99页 |
附录A 在读期间发表的论文 | 第99-100页 |
附录B 引物列表 | 第100-106页 |