| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-17页 |
| 1.1 植物抗逆相关基因 | 第9页 |
| 1.2 植物响应逆境胁迫的信号转导途径 | 第9-12页 |
| 1.2.1 干旱胁迫信号转导途径 | 第9-10页 |
| 1.2.2 盐胁迫信号转导途径 | 第10-11页 |
| 1.2.3 低温胁迫信号转导途径 | 第11-12页 |
| 1.3 DREB转录因子与植物抗逆性 | 第12-16页 |
| 1.3.1 DREB类转录因子的结构特征 | 第13页 |
| 1.3.2 DREB基因的克隆与表达调控 | 第13-16页 |
| 1.3.3 DREB转录因子的抗逆功能研究 | 第16页 |
| 1.4 蒙古沙冬青抗逆性研究进展 | 第16页 |
| 1.5 本研究的目的意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-22页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第17页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第17页 |
| 2.1.3 酶与试剂 | 第17页 |
| 2.1.4 主要缓冲液和试剂的配制 | 第17-18页 |
| 2.1.5 引物序列 | 第18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-22页 |
| 2.2.1 蒙古沙冬青幼苗胁迫处理 | 第18-19页 |
| 2.2.2 总RNA的提取及cDNA合成 | 第19页 |
| 2.2.3 半定量RT-PCR分析 | 第19页 |
| 2.2.4 基因组DNA提取 | 第19页 |
| 2.2.5 基因克隆与测序 | 第19-20页 |
| 2.2.6 蛋白序列分析 | 第20页 |
| 2.2.7 植物表达载体构建 | 第20-21页 |
| 2.2.8 根癌农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第21页 |
| 2.2.9 拟南芥的培养及转化 | 第21页 |
| 2.2.10 转基因植株的培养与转化 | 第21页 |
| 2.2.11 转基因拟南芥基因组DNA提取及PCR检测 | 第21-22页 |
| 2.2.12 转基因拟南芥抗逆性鉴定 | 第22页 |
| 2.2.13 胁迫Marker基因表达分析 | 第22页 |
| 3 结果与分析 | 第22-41页 |
| 3.1 AmDREB2在抗逆性中的功能分析 | 第22-33页 |
| 3.1.1 AmDREB2在ABA处理下的表达变化 | 第22-23页 |
| 3.1.2 AmDREB2超表达载体构建 | 第23-24页 |
| 3.1.3 AmDREB2超表达载体转化农杆菌 | 第24页 |
| 3.1.4 AmDREB2超表达载体转基因拟南芥的获得与PCR检测 | 第24-25页 |
| 3.1.5 AmDREB2转基因株系的RT-PCR检测 | 第25-26页 |
| 3.1.6 AmDREB2转基因株系生长发育观察 | 第26页 |
| 3.1.7 AmDREB2转基因株系抗逆性鉴定 | 第26-32页 |
| 3.1.8 AmDREB2转基因株系中胁迫基因Marker的表达分析 | 第32-33页 |
| 3.2 AmDREB1基因的克隆与初步功能分析 | 第33-41页 |
| 3.2.1 蒙古沙冬青总RNA提取与检测 | 第33页 |
| 3.2.2 AmDREB1基因克隆与生物信息学分析 | 第33-37页 |
| 3.2.3 AmDREB1在不同胁迫处理下的表达变化 | 第37页 |
| 3.2.4 AmDREB1表达载体构建及其转化拟南芥 | 第37-40页 |
| 3.2.5 AmDREB1转基因拟南芥的抗逆性初步鉴定 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-42页 |
| 4.1 AmDREB1和AmDREB2可能参与ABA介导的抗逆应答反应 | 第41-42页 |
| 4.2 AmDREB2无生长抑制效应 | 第42页 |
| 4.3 AmDREB2提高耐盐性的机理分析 | 第42页 |
| 5 结论 | 第42-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |
