| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 主要符号表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-32页 |
| 1.1 引言 | 第12-13页 |
| 1.2 细胞的死亡衰老 | 第13-14页 |
| 1.3 细胞凋亡 | 第14-15页 |
| 1.4 细胞凋亡的特征 | 第15-16页 |
| 1.4.1 凋亡的起始 | 第15页 |
| 1.4.2 凋亡小体的形成 | 第15-16页 |
| 1.4.3 吞噬 | 第16页 |
| 1.5 细胞凋亡的检测方法 | 第16-18页 |
| 1.5.1 形态学观察 | 第16-17页 |
| 1.5.2 DNA电泳 | 第17页 |
| 1.5.3 DNA断裂的原位末端标记法 | 第17-18页 |
| 1.5.4 彗星电泳法 | 第18页 |
| 1.5.5 流式细胞分析 | 第18页 |
| 1.5.6 检测细胞膜成分变化 | 第18页 |
| 1.6 细胞凋亡的生理学和医学意义 | 第18-20页 |
| 1.7 细胞凋亡的分子机制 | 第20-31页 |
| 1.7.1 Caspases | 第20-23页 |
| 1.7.2 caspases依赖性细胞凋亡途径 | 第23-27页 |
| 1.7.3 caspases非依赖性的细胞凋亡 | 第27页 |
| 1.7.4 穿孔蛋白-颗粒酶介导的细胞凋亡 | 第27-28页 |
| 1.7.5 生死抉择：细胞凋亡的调控 | 第28-31页 |
| 1.8 本文研究思路 | 第31-32页 |
| 第二章 日本血吸虫凋亡相关因子编码基因的克隆表达及生物学特性分析 | 第32-51页 |
| 2.1 引言 | 第32-33页 |
| 2.2 实验材料 | 第33-34页 |
| 2.2.1 菌种、血清和实验动物 | 第33页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第33页 |
| 2.2.3 主要实验仪器 | 第33-34页 |
| 2.3 主要试剂配制 | 第34-37页 |
| 2.3.1 核酸电泳相关试剂配制 | 第34页 |
| 2.3.2 培养基的配制 | 第34-35页 |
| 2.3.3 重组蛋白表达试剂 | 第35页 |
| 2.3.4 Western-blot相关试剂配制 | 第35页 |
| 2.3.5 蛋白SDS-PAGE电泳相关试剂配制 | 第35-37页 |
| 2.4 实验方法 | 第37-44页 |
| 2.4.1 SjTNFR生物信息学分析 | 第37页 |
| 2.4.2 日本血吸虫虫体的收集 | 第37页 |
| 2.4.3 各期别日本血吸虫c DNA模板的制备 | 第37-39页 |
| 2.4.4 重组质粒p MD19-T-SjTNFR构建 | 第39-41页 |
| 2.4.5 重组质粒pET28a(+)-SjTNFR的构建 | 第41-43页 |
| 2.4.6 重组质粒pET-28a(+)-SjTNFR的鉴定 | 第43页 |
| 2.4.7 重组质粒pET-28a(+)-SjTNFR在大肠杆菌中的表达及时相图 | 第43-44页 |
| 2.5 实验结果 | 第44-49页 |
| 2.5.1 SjTNFR生物信息学分析 | 第44-46页 |
| 2.5.2 SjTNFR基因克隆及重组质粒pET-28a(+)-SjTNFR的构建及鉴定 | 第46-47页 |
| 2.5.3 SjTNFR的原核表达 | 第47-48页 |
| 2.5.4 大小鼠来源血吸虫虫体SjTNFR表达的实时定量分析 | 第48-49页 |
| 2.6 讨论 | 第49-51页 |
| 第三章 SjTNFR真核重组表达质粒的构建及功能的初步分析 | 第51-64页 |
| 3.1 引言 | 第51页 |
| 3.2 材料与方法 | 第51-52页 |
| 3.2.1 主要试剂与细胞 | 第51-52页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第52页 |
| 3.3 实验方法 | 第52-57页 |
| 3.3.1 重组质粒pMD19-T-SjTNFR构建 | 第52-54页 |
| 3.3.2 重组质粒pxj40SjTNFR的鉴定 | 第54页 |
| 3.3.3 重组质粒pxj40SjTNFR的转染 | 第54-55页 |
| 3.3.4 Western blot鉴定pxj40SjTNFR的表达情况 | 第55页 |
| 3.3.5 流式细胞术分析SjTNFR的促凋亡作用 | 第55-56页 |
| 3.3.6 间接免疫荧光技术检测SjTNFR蛋白的表达 | 第56-57页 |
| 3.3.7 荧光定量检测转染pxj40TNFR质粒后细胞TNFR表达量 | 第57页 |
| 3.4 实验结果 | 第57-61页 |
| 3.4.1 重组质粒pxj40SjTNFR的构建及鉴定 | 第57-58页 |
| 3.4.2 Western-blot鉴定pxj40SjTNFR的表达 | 第58页 |
| 3.4.3 流式细胞术分析SjTNFR的促凋亡功能 | 第58-60页 |
| 3.4.4 间接免疫荧光检测重组质粒pxj40SjTNFR的蛋白表达 | 第60-61页 |
| 3.4.5 荧光定量检测转染重组质粒后细胞中TNFR的表达量 | 第61页 |
| 3.5 讨论 | 第61-64页 |
| 第四章 全文总结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 附录 | 第69-70页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
