| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第15-23页 |
| 1.1 肿瘤转移 | 第15-17页 |
| 1.1.1 肿瘤转移概述 | 第15页 |
| 1.1.2 肿瘤细胞迁移与肿瘤转移 | 第15-16页 |
| 1.1.3 原癌基因c-Src与肿瘤转移 | 第16-17页 |
| 1.2 肿瘤转移抑制基因NDRG1 | 第17-19页 |
| 1.2.1 NDRG1概述 | 第17页 |
| 1.2.2 NDRG1与肿瘤转移 | 第17-19页 |
| 1.3 铁离子螯合剂与生物靶向治疗 | 第19-21页 |
| 1.3.1 铁离子螯合剂概述 | 第19-20页 |
| 1.3.2 铁离子螯合剂在抗肿瘤治疗中的应用 | 第20-21页 |
| 1.3.3 铁离子螯合剂与NDRG1 | 第21页 |
| 1.4 本课题研究的内容 | 第21-23页 |
| 第二章 NDRG1对C-SRC激酶活性的调节 | 第23-33页 |
| 2.1 前言 | 第23-24页 |
| 2.2 材料与方法 | 第24-28页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第24页 |
| 2.2.2 细胞全蛋白抽提 | 第24-25页 |
| 2.2.3 蛋白免疫印迹 | 第25-28页 |
| 2.2.4 统计学分析 | 第28页 |
| 2.3 结果 | 第28-32页 |
| 2.3.1 NDRG1对c-Src表达的影响 | 第29-30页 |
| 2.3.2 NDRG1抑制c-Src氨基端残基Tyr416的磷酸化 | 第30-31页 |
| 2.3.3 NDRG1对c-Src氨基端残基Tyr527的磷酸化水平没有影响 | 第31-32页 |
| 2.4 小结 | 第32-33页 |
| 第三章 NDRG1影响C-SRC激酶活性的机制 | 第33-43页 |
| 3.1 前言 | 第33页 |
| 3.2 材料与方法 | 第33-35页 |
| 3.2.1 EGF的使用 | 第33-34页 |
| 3.2.2 免疫共沉淀 | 第34页 |
| 3.2.3 其他 | 第34-35页 |
| 3.3 结果 | 第35-42页 |
| 3.3.1 NDRG1抑制EGFR蛋白的表达 | 第35-36页 |
| 3.3.2 NDRG1抑制EGF对EGFR的激活作用 | 第36-39页 |
| 3.3.3 NDRG1抑制EGFR与c-Src的结合 | 第39-40页 |
| 3.3.4 NDRG1对PTP1B和PTP-PEST表达的影响 | 第40-42页 |
| 3.4 小结 | 第42-43页 |
| 第四章 NDRG1影响C-SRC下游信号通路P130CAS/CRKⅡ | 第43-54页 |
| 4.1 前言 | 第43页 |
| 4.2 材料与方法 | 第43-45页 |
| 4.2.1 si RNA基因沉默 | 第43-44页 |
| 4.2.2 c-Src激酶抑制剂的使用 | 第44页 |
| 4.2.3 其他 | 第44-45页 |
| 4.3 结果 | 第45-53页 |
| 4.3.1 NDRG1抑制p130Cas氨基端残基Tyr249/Tyr410的磷酸化 | 第45-46页 |
| 4.3.2 NDRG1不影响p130Cas总蛋白的表达 | 第46-48页 |
| 4.3.3 si RNA沉默c-Src表达实验显示NDRG1依赖其对c-Src的作用抑制p130Cas氨基端残基Tyr249/Tyr410的磷酸化 | 第48-50页 |
| 4.3.4 c-Src激酶特异抑制剂实验显示NDRG1依赖其对c-Src的作用抑制p130Cas氨基端残基Tyr249/Tyr410的磷酸化 | 第50-52页 |
| 4.3.5 NDRG1抑制p130Cas和CrkⅡ的结合 | 第52-53页 |
| 4.4 小结 | 第53-54页 |
| 第五章 NDRG1影响RAC1及其下游靶蛋白活性 | 第54-63页 |
| 5.1 前言 | 第54-55页 |
| 5.2 材料与方法 | 第55-56页 |
| 5.2.1 Rac1激活试验 | 第55页 |
| 5.2.2 | 第55-56页 |
| 5.3 结果 | 第56-61页 |
| 5.3.1 NDRG1抑制Rac1的激活 | 第56-57页 |
| 5.3.2 NDRG1抑制Rac1下游靶蛋白PAK1的激活 | 第57-59页 |
| 5.3.3 NDRG1依赖其对c-Src的作用抑制Rac1的激活 | 第59-61页 |
| 5.4 小结 | 第61-63页 |
| 第六章 NDRG1影响C-ABL/CRKⅡ信号通路激活 | 第63-69页 |
| 6.1 前言 | 第63页 |
| 6.2 材料与方法 | 第63-64页 |
| 6.3 结果 | 第64-68页 |
| 6.3.1 NDRG1抑制c-Abl氨基端残基Tyr245磷酸化 | 第64-65页 |
| 6.3.2 NDRG1抑制c-Abl下游信号蛋白CrkⅡ的激活 | 第65-66页 |
| 6.3.3 NDRG1抑制c-Abl/ CrkⅡ信号通路不依赖于c-Src | 第66-68页 |
| 6.4 小结 | 第68-69页 |
| 第七章 NDRG1影响肿瘤细胞迁移能力 | 第69-73页 |
| 7.1 前言 | 第69页 |
| 7.2 材料与方法 | 第69-70页 |
| 7.2.1 x Celligence细胞实时迁移实验 | 第69-70页 |
| 7.2.2 其他 | 第70页 |
| 7.3 结果 | 第70-72页 |
| 7.3.1 NDRG1抑制肿瘤细胞的迁移能力 | 第70-71页 |
| 7.3.2 NDRG1通过c-Src影响肿瘤细胞的迁移能力 | 第71-72页 |
| 7.4 小结 | 第72-73页 |
| 第八章 铁离子螯合剂靶向NDRG1影响C-SRC激酶活性 | 第73-78页 |
| 8.1 前言 | 第73-74页 |
| 8.2 材料与方法 | 第74-75页 |
| 8.2.1 铁离子螯合剂的使用 | 第74页 |
| 8.2.2 | 第74-75页 |
| 8.3 结果 | 第75-77页 |
| 8.3.1 铁离子螯合剂上调NDRG1蛋白表达 | 第75-77页 |
| 8.3.2 铁离子螯合剂Dp44m T和Dp C抑制c-Src氨基端残基Tyr416磷酸化但对c-Src总蛋白水平无影响 | 第77页 |
| 8.4 小结 | 第77-78页 |
| 第九章 讨论 | 第78-82页 |
| 9.1 NDRG1抑制C-SRC激酶活性 | 第78-79页 |
| 9.2 NDRG1抑制C-SRC下游信号通路P130CAS/CRKⅡ | 第79页 |
| 9.3 NDRG1抑制RAC1/PAK1激活 | 第79-80页 |
| 9.4 NDRG1抑制C-ABL//CRKⅡ信号通路 | 第80页 |
| 9.5 NDRG1抑制肿瘤细胞迁移能力 | 第80-81页 |
| 9.6 NDRG1作为铁离子螯合剂生物靶向治疗恶性肿瘤的靶标 | 第81-82页 |
| 第十章 结论 | 第82-84页 |
| 参考 文献 | 第84-93页 |
| 英文缩略语中文对照 | 第93-95页 |
| 博士论文后记及致谢 | 第95-105页 |
| 攻读博士学位期间已发表或录用的论文 | 第105页 |
