| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第17-33页 |
| 1.1 转化生长因子-β 超家族研究进展 | 第17-21页 |
| 1.1.1 TGF-β 超家族 | 第17-18页 |
| 1.1.2 TGF-β 超家族信号传导 | 第18-20页 |
| 1.1.3 TGF-β 与肿瘤 | 第20-21页 |
| 1.2 激活素 | 第21-25页 |
| 1.2.1 激活素 | 第21-22页 |
| 1.2.2 激活素信号传导 | 第22-24页 |
| 1.2.3 激活素的生物学作用 | 第24-25页 |
| 1.3 甲基化转移酶 | 第25-31页 |
| 1.3.1 表观遗传学与DNA甲基化 | 第25-27页 |
| 1.3.2 甲基化转移酶家族 | 第27-30页 |
| 1.3.3 甲基化转移酶1与肿瘤的关系 | 第30-31页 |
| 1.4 本课题研究目标、内容与特色 | 第31-33页 |
| 1.4.1 研究目标 | 第31页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第31-32页 |
| 1.4.3 研究特色与意义 | 第32-33页 |
| 第2章 材料和方法 | 第33-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第33-37页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第33页 |
| 2.1.2 质粒和菌株 | 第33页 |
| 2.1.3 实验动物 | 第33页 |
| 2.1.4 主要试剂与耗材 | 第33-34页 |
| 2.1.5 主要试剂的配制 | 第34-36页 |
| 2.1.6 主要实验仪器 | 第36-37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-47页 |
| 2.2.1 细胞形态学分析 | 第37页 |
| 2.2.2 细胞活力分析 | 第37-38页 |
| 2.2.3 细胞因子表达分析 | 第38页 |
| 2.2.4 RT-PCR | 第38-39页 |
| 2.2.5 Western blotting | 第39-40页 |
| 2.2.6 流式细胞术检测细胞增殖 | 第40-41页 |
| 2.2.7 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第41页 |
| 2.2.8 质粒构建与鉴定 | 第41-42页 |
| 2.2.9 细胞株基因干涉 | 第42页 |
| 2.2.10 小鼠骨髓瘤株荷瘤鼠模型的建立 | 第42页 |
| 2.2.11 敲低DNMT1基因NS-1 细胞成瘤实验 | 第42-43页 |
| 2.2.12 体内实验分析激活素A处理NS-1 细胞成瘤实验 | 第43页 |
| 2.2.13 组织包埋及切片制作 | 第43页 |
| 2.2.14 H&E染色 | 第43-44页 |
| 2.2.15 免疫组织化学染色 | 第44-45页 |
| 2.2.16 TUNEL染色 | 第45页 |
| 2.2.17 统计学分析 | 第45-47页 |
| 第3章 结果 | 第47-69页 |
| 3.1 激活素A对人及小鼠多种肿瘤细胞活性的影响 | 第47-49页 |
| 3.1.1 激活素A对肿瘤细胞形态学变化的影响 | 第47-48页 |
| 3.1.2 激活素A对SW480、Hela、A549及NS-1 细胞增殖的影响 | 第48页 |
| 3.1.3 激活素A对SW480、Hela及NS-1 细胞DNMT1蛋白表达的影响 | 第48-49页 |
| 3.2 激活素A诱导小鼠NS-1 细胞凋亡作用及其机制 | 第49-55页 |
| 3.2.1 激活素受体在NS-1 细胞上的表达 | 第49-50页 |
| 3.2.2 激活素A对NS-1 细胞增殖能力的影响 | 第50-51页 |
| 3.2.3 激活素A对NS-1 细胞形态学变化的影响 | 第51-52页 |
| 3.2.4 激活素A对NS-1 细胞凋亡的影响 | 第52-53页 |
| 3.2.5 激活素A对NS-1 细胞分泌TNF-α 的影响 | 第53页 |
| 3.2.6 激活素A对NS-1 细胞甲基化转移酶家族蛋白表达的影响 | 第53-54页 |
| 3.2.7 激活素A对NS-1 细胞DNMT1 mRNA表达的影响 | 第54页 |
| 3.2.8 激活素A对NS-1 细胞凋亡相关蛋白表达的影响 | 第54-55页 |
| 3.3 DNMT1 Knock-down对激活素A诱导NS-1 细胞凋亡的影响 | 第55-60页 |
| 3.3.1 pLVX-U6/puro-DNMT1 shRNA表达质粒构建 | 第55-56页 |
| 3.3.2 DNMT1 Knock-down对NS-1 细胞DNMT1 mRNA表达的影响 | 第56-57页 |
| 3.3.3 DNMT1 Knock-down对NS-1 细胞DNMT1蛋白表达的影响 | 第57页 |
| 3.3.4 DNMT1 Knock-down对NS-1 细胞活力的影响 | 第57-58页 |
| 3.3.5 DNMT1 Knock-down对NS-1 细胞形态学变化的影响 | 第58页 |
| 3.3.6 DNMT1 Knock-down对NS-1 细胞凋亡的影响 | 第58-59页 |
| 3.3.7 DNMT1 Knock-down对NS-1 细胞凋亡相关蛋白表达的影响 | 第59-60页 |
| 3.4 激活素A-Smad3对NS-1 细胞DNMT1表达的影响 | 第60-62页 |
| 3.4.1 激活素A刺激NS-1 细胞Smad3蛋白表达 | 第60页 |
| 3.4.2 Smad3 Knock-down对NS-1 细胞DNMTI mRNA表达的影响 | 第60-61页 |
| 3.4.3 Smad3 over-expression对NS-1 细胞DNMTI mRNA表达的影响 | 第61页 |
| 3.4.4 DNMT1 Knock-down对NS-1 细胞Smad3表达的影响 | 第61-62页 |
| 3.5 DNMT1 Knock-down对小鼠NS-1 细胞成瘤的影响 | 第62-69页 |
| 3.5.1 NS-1 细胞荷瘤小鼠模型的建立 | 第62页 |
| 3.5.2 DNMT1 Knock-down对NS-1 细胞体内成瘤能力的影响 | 第62-63页 |
| 3.5.3 激活素A对NS-1 细胞体内成瘤能力的影响 | 第63-64页 |
| 3.5.4 DNMT1 Knock-down与激活素A联合对NS-1 细胞成瘤的影响 | 第64-65页 |
| 3.5.5 激活素A对NS-1 细胞实体瘤组织DNMT1表达的影响 | 第65-66页 |
| 3.5.6 DNMT1 Knock-down对NS-1 实体瘤组织DNMT1表达的影响 | 第66-67页 |
| 3.5.7 DNMT1 Knock-down与激活素A对NS-1 细胞瘤组织学的影响 | 第67页 |
| 3.5.8 激活素A对NS-1 细胞实体瘤细胞凋亡的影响 | 第67-68页 |
| 3.5.9 DNMT1 Knock-down对激活素A诱导NS-1 细胞实体瘤细胞凋亡的影响 | 第68-69页 |
| 第4章 讨论 | 第69-75页 |
| 4.1 激活素A抑制肿瘤细胞增殖及其机制 | 第69-71页 |
| 4.2 DNMT1 Knock-down促进激活素A诱导NS-1 细胞凋亡及机制 | 第71-73页 |
| 4.3 Smad3与DNMT1表达的关系 | 第73-75页 |
| 第5章 结论 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-89页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第89-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
