| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第9-17页 |
| 1.1 关于PIN基因 | 第9-13页 |
| 1.1.1 生长素的作用 | 第9页 |
| 1.1.2 PIN基因的来源、分类和结构特征 | 第9-11页 |
| 1.1.3 PIN基因的表达及与生长发育的关系 | 第11-13页 |
| 1.2 蕨类植物简介 | 第13-14页 |
| 1.3 蕨类植物无配子生殖研究进展 | 第14-15页 |
| 1.4 荷叶铁线蕨研究进展 | 第15页 |
| 1.5 本研究的内容和意义 | 第15-17页 |
| 2 荷叶铁线蕨PIN基因的克隆和序列分析 | 第17-40页 |
| 2.1 前言 | 第17-18页 |
| 2.2 研究所用生物材料、软件、仪器、试剂和药品 | 第18-20页 |
| 2.2.1 植物材料、菌株和载体 | 第18页 |
| 2.2.2 分析所用的相关软件 | 第18-19页 |
| 2.2.3 所用的仪器 | 第19页 |
| 2.2.4 试剂和药品 | 第19-20页 |
| 2.3 研究方法 | 第20-25页 |
| 2.3.1 荷叶铁线蕨配子体和孢子体总RNA的提取 | 第20-21页 |
| 2.3.2 荷叶铁线蕨配子体和孢子体RNA反转录 | 第21页 |
| 2.3.3 荷叶铁线蕨基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
| 2.3.4 荷叶铁线蕨PIN基因的克隆 | 第22-25页 |
| 2.4 研究结果与分析 | 第25-38页 |
| 2.4.1 荷叶铁线蕨总RNA的检测 | 第25-26页 |
| 2.4.2 荷叶铁线蕨基因组DNA的检测 | 第26页 |
| 2.4.3 荷叶铁线蕨PIN基因保守片段克隆 | 第26-27页 |
| 2.4.4 荷叶铁线蕨PIN基因侧翼 5’端和 3’端的扩增 | 第27-29页 |
| 2.4.5 荷叶铁线蕨PIN基因全长的获得与分析 | 第29-31页 |
| 2.4.6 ArsPIN1 和ArsPIN2 基因序列的开放阅读框分析 | 第31页 |
| 2.4.7 ArsPIN1 和ArsPIN2 基因编码氨基酸序列的同源性分析 | 第31-32页 |
| 2.4.8 ArsPIN1 和ArsPIN2 基因编码的蛋白质分析 | 第32-38页 |
| 2.5 讨论 | 第38-40页 |
| 2.5.1 荷叶铁线蕨PIN基因的克隆 | 第38页 |
| 2.5.2 荷叶铁线蕨PIN基因编码蛋白质的基本性质 | 第38-40页 |
| 3 荷叶铁线蕨PIN基因的表达分析 | 第40-52页 |
| 3.1 前言 | 第40页 |
| 3.2 研究材料、仪器、试剂 | 第40-41页 |
| 3.2.1 植物材料与载体 | 第40页 |
| 3.2.2 所用的仪器 | 第40页 |
| 3.2.3 试剂与药品 | 第40-41页 |
| 3.3 研究方法 | 第41-45页 |
| 3.3.1 荷叶铁线蕨PIN基因的实时荧光定量qRT-PCR表达 | 第41-42页 |
| 3.3.2 荷叶铁线蕨PIN基因双元表达载体的构建 | 第42-44页 |
| 3.3.3 目的基因热激法导入农杆菌 | 第44页 |
| 3.3.4 农杆菌介导转化拟南芥及阳性植株的筛选 | 第44-45页 |
| 3.3.5 转基因植株的PCR检测及表型观察 | 第45页 |
| 3.4 研究结果与分析 | 第45-49页 |
| 3.4.1 荷叶铁线蕨PIN基因的qRT-PCR表达 | 第45-47页 |
| 3.4.2 荷叶铁线蕨PIN基因植物双元表达载体的构建 | 第47-48页 |
| 3.4.3 转基因植株初步鉴定 | 第48-49页 |
| 3.5 讨论 | 第49-52页 |
| 3.5.1 荷叶铁线蕨PIN基因的实时荧光定量分析 | 第49-50页 |
| 3.5.2 荷叶铁线蕨PIN基因双元表达载体的构建 | 第50-51页 |
| 3.5.3 荷叶铁线蕨PIN基因相关的遗传转化 | 第51-52页 |
| 4 展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 附录 | 第59-64页 |
| 附录一 | 第59-62页 |
| 附录二 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
