| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1.引言 | 第9-15页 |
| 1.1 苹果褪绿叶斑病毒的概述 | 第9-10页 |
| 1.1.1 苹果褪绿叶斑病毒的生物学特性 | 第9-10页 |
| 1.1.2 苹果褪绿叶斑病毒病原性质 | 第10页 |
| 1.2 植物病毒蛋白与寄主植物蛋白间的互作研究 | 第10-12页 |
| 1.2.1 病毒外壳蛋白与寄主蛋白之间的互作 | 第11-12页 |
| 1.2.2 病毒运动蛋白与寄主蛋白之间的互作 | 第12页 |
| 1.3 蛋白质亚细胞定位研究 | 第12-13页 |
| 1.3.1 以GFP为报告基因研究蛋白质亚细胞定位 | 第12-13页 |
| 1.3.2 农杆菌介导瞬时表达 | 第13页 |
| 1.4 目的及意义 | 第13-15页 |
| 2. 材料与方法 | 第15-23页 |
| 2.1 试验材料 | 第15-17页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第15页 |
| 2.1.2 载体和菌株 | 第15页 |
| 2.1.3 主要实验试剂及仪器 | 第15页 |
| 2.1.4 基因与引物 | 第15-17页 |
| 2.2 方法 | 第17-23页 |
| 2.2.1 酵母双杂交技术验证关键寄主基因与ACLSV CP、MP的互作 | 第17-19页 |
| 2.2.2 Pull-down技术验证关键寄主基因与ACLSV CP、MP的互作 | 第19-21页 |
| 2.2.3 ACLSV CP、MP在本氏烟中的亚细胞定位 | 第21-23页 |
| 3. 结果与分析 | 第23-36页 |
| 3.1 酵母双杂交技术验证关键寄主基因与ACLSV CP、MP的互作 | 第23-24页 |
| 3.1.1 酵母双杂交捕获和诱饵载体的构建 | 第23-24页 |
| 3.1.2 酵母双杂交验证关键寄主基因与病毒功能基因的互作 | 第24页 |
| 3.2 Pull-down技术验证关键寄主基因与ACLSV CP、MP的互作 | 第24-31页 |
| 3.2.1 病毒功能基因与寄主基因的PCR扩增 | 第24-25页 |
| 3.2.2 病毒功能基因与寄主基因克隆载体的构建 | 第25-26页 |
| 3.2.3 病毒功能基因及寄主基因原核表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 3.2.4 ACLSV MP、CP诱饵蛋白的表达及纯化 | 第27页 |
| 3.2.5 ACLSV CP、MP与His标签融合表达的测定 | 第27-28页 |
| 3.2.6 Pull-down验证ACLSV功能基因与寄主基因之间的互作 | 第28-31页 |
| 3.3 ACLSV CP、MP在本氏烟细胞中的定位 | 第31-36页 |
| 3.3.1 CP、MP和Malus15-1 基因的PCR扩增 | 第31页 |
| 3.3.2 ACLSV CP、MP和Malus15-1 基因克隆载体的构建 | 第31-32页 |
| 3.3.3 ACLSV CP、MP和Malus15-1 基因植物瞬时表达载体的构建 | 第32页 |
| 3.3.4 植物瞬时表达载体转化农杆菌 | 第32-33页 |
| 3.3.5 ACLSV CP在本氏烟细胞中的定位 | 第33页 |
| 3.3.6 ACLSV MP在本氏烟细胞中的定位 | 第33-34页 |
| 3.3.7 寄主基因Malus15-1 在本氏烟细胞中的定位 | 第34-36页 |
| 4.讨论 | 第36-39页 |
| 4.1 利用酵母双杂交和Pull-down技术验证蛋白的互作 | 第36页 |
| 4.2 蛋白质的亚细胞定位 | 第36-37页 |
| 4.3 本研究存在的问题 | 第37-39页 |
| 5. 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-44页 |
| 附录 | 第44-48页 |
| 作者简介 | 第48-49页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
