摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第13-32页 |
1 水稻稻曲病的研究概况 | 第13-20页 |
1.1 稻曲病的危害及分布 | 第13-15页 |
1.2 稻曲病菌生活史和病害循环 | 第15-17页 |
1.3 稻曲病菌的致病过程 | 第17-19页 |
1.4 稻曲病菌的遗传多样性 | 第19页 |
1.5 稻曲病菌分子生物学的研究 | 第19-20页 |
1.6 稻曲病的防治 | 第20页 |
2 真菌病毒研究概论 | 第20-31页 |
2.1 真菌病毒的起源与复制 | 第20-21页 |
2.2 真菌病毒的传播途径和方式 | 第21-22页 |
2.3 真菌病毒的脱毒 | 第22-23页 |
2.4 真菌病毒的主要类群 | 第23-29页 |
2.4.1 真菌DNA病毒 | 第23-24页 |
2.4.2 真菌dsRNA病毒 | 第24-26页 |
2.4.3 真菌ssRNA病毒 | 第26-28页 |
2.4.4 真菌逆转录RNA病毒 | 第28-29页 |
2.5 真菌病毒对寄主的影响 | 第29-30页 |
2.6 同种真菌中真菌病毒多样性 | 第30-31页 |
3 本文研究的目的和意义 | 第31-32页 |
第二章 稻曲病菌株中dsRNA的检测及分析 | 第32-47页 |
1 材料与方法 | 第32-37页 |
1.1 培养基 | 第32页 |
1.2 酶和试剂 | 第32-33页 |
1.3 仪器和设备 | 第33页 |
1.4 稻曲病菌菌株的分离和收集 | 第33-35页 |
1.5 稻曲病菌菌丝的培养和收集 | 第35页 |
1.6 dsRNA提取及检测 | 第35-36页 |
1.7 原生质体制备及再生 | 第36页 |
1.8 利巴韦林脱病毒处理 | 第36-37页 |
1.9 高温脱病毒处理 | 第37页 |
1.10 分生孢子携带病毒检测 | 第37页 |
2 结果与分析 | 第37-43页 |
2.1 198株稻曲病菌菌株所含dsRNA分析 | 第37-40页 |
2.2 分生孢子携带病毒的频率 | 第40-41页 |
2.3 原生质体再生菌株dsRNA检测 | 第41-42页 |
2.4 利巴韦林和高温脱病毒处理 | 第42-43页 |
3 小结与讨论 | 第43-47页 |
第三章 稻曲病菌株GX-1中真菌病毒的全长cDNA克隆与序列分析 | 第47-72页 |
1 材料与方法 | 第47-59页 |
1.1 菌株 | 第47页 |
1.2 培养基及试剂 | 第47-48页 |
1.3 酶和试剂盒 | 第48页 |
1.4 载体和引物 | 第48-49页 |
1.5 仪器和设备 | 第49-50页 |
1.6 总RNA的提取及DNA的去除 | 第50-51页 |
1.7 dsRNA提取 | 第51页 |
1.8 病毒全长序列的克隆 | 第51-56页 |
1.8.1 随机引物cDNA克隆 | 第51-52页 |
1.8.2 dsRNA 5’-和3’-端克隆 | 第52-54页 |
1.8.3 序列拼接和系统进化分析 | 第54-56页 |
1.9 Northern杂交 | 第56-58页 |
1.9.1 电泳、转膜及固定 | 第56-57页 |
1.9.2 探针标记 | 第57页 |
1.9.3 杂交 | 第57-58页 |
1.9.4 杂交信号的产生和检测 | 第58页 |
1.10 RT-PCR检测病毒的序列的多样性 | 第58-59页 |
2 结果与分析 | 第59-70页 |
2.1 稻曲病菌菌株GX-I中7条dsRNA的基因组序列分析 | 第59-65页 |
2.1.1 dsRNA-L的全基因组序列分析 | 第60-61页 |
2.1.2 dsRNA-M的全基因组序列分析 | 第61-65页 |
2.1.3 dsRNA-S的序列分析 | 第65页 |
2.2 UvRV-1 strain GX-1和UvRV4的系统发育树分析 | 第65-68页 |
2.3 UvRV1 strain GX-1和UvRV4在稻曲病菌中的分布 | 第68-70页 |
2.4 病毒UvRV1基因组序列多样性分析 | 第70页 |
3 小结与讨论 | 第70-72页 |
第四章 UvRV1 strain GX-1和UvRV4对寄主的影响 | 第72-88页 |
1 材料与方法 | 第72-77页 |
1.1 菌株 | 第72页 |
1.2 培养基及试剂 | 第72页 |
1.3 载体和引物 | 第72-74页 |
1.4 稻曲病菌菌株的潮霉素标记 | 第74页 |
1.5 稻曲病菌菌株GX-1中真菌病毒的水平传染 | 第74-75页 |
1.6 dsRNA提取 | 第75页 |
1.7 总RNA的提取及DNA的去除 | 第75页 |
1.8 RT-PCR检测病毒 | 第75-76页 |
1.9 生长速度的测定 | 第76页 |
1.10 产孢量的测定 | 第76页 |
1.11 致病力的测定 | 第76-77页 |
1.11.1 供试水稻的栽培和管理 | 第76-77页 |
1.11.2 接种体制备 | 第77页 |
1.11.3 接种时期和方法 | 第77页 |
1.11.4 病情调查与统计 | 第77页 |
2 结果与分析 | 第77-86页 |
2.1 标记菌株筛选 | 第77-78页 |
2.2 稻曲病菌菌株GX-1中真菌病毒的水平传染能力 | 第78-82页 |
2.2.1 对峙培养20天的水平传染情况 | 第79-80页 |
2.2.2 对峙培养50天的水平传染情况 | 第80-82页 |
2.3 UvRV1 strainGX-1和UvRV4对寄主的影响 | 第82-86页 |
2.3.1 UvRV1 strain GX-1和UvRV4对寄主菌落形态的影响 | 第82-83页 |
2.3.2 UvRV1 strain GX-1和UvRV4对寄主生长速度的影响 | 第83-84页 |
2.3.3 UvRV1 strain GX-1和UvRV4对寄主产孢量的影响 | 第84页 |
2.3.4 UvRV1 strain GX-1和UvRV4对寄主致病力的影响 | 第84-86页 |
3 小结与讨论 | 第86-88页 |
第五章 稻曲病菌菌株HP-30中病毒的研究 | 第88-102页 |
1 材料与方法 | 第88-93页 |
1.1 菌株 | 第88页 |
1.2 培养基及试剂 | 第88-89页 |
1.3 载体和引物 | 第89页 |
1.4 酶和试剂盒 | 第89-90页 |
1.5 仪器和设备 | 第90页 |
1.6 dsRNA的提取 | 第90页 |
1.7 病毒的全长克隆 | 第90页 |
1.8 序列拼接和系统进化分析 | 第90-92页 |
1.9 稻曲病菌菌株HP-30中真菌病毒的水平传染 | 第92页 |
1.10 生长速度的测定 | 第92-93页 |
1.11 产孢量的测定 | 第93页 |
1.12 致病力的测定 | 第93页 |
2 结果与分析 | 第93-101页 |
2.1 稻曲病菌菌株HP-30中dsRNA的基因组序列分析 | 第93-95页 |
2.2 UvPV2的系统发育树分析 | 第95-97页 |
2.3 稻曲病菌菌株HP-30中真菌病毒的水平传染 | 第97-98页 |
2.4 UvPV2对寄主菌落形态的影响 | 第98页 |
2.5 UvPV2对寄主生长速度的影响 | 第98-99页 |
2.6 UvPV2对寄主孢子产量的影响 | 第99-100页 |
2.7 UvPV2对寄主致病力的影响 | 第100-101页 |
3 小结与讨论 | 第101-102页 |
第六章 结论与展望 | 第102-104页 |
参考文献 | 第104-122页 |
附录1 DNA片段的凝胶回收与纯化 | 第122-123页 |
附录2 病毒基因组cDNA片段的克隆测序 | 第123-124页 |
附录3 UvRV1 strain GX-1的全基因组序列 | 第124-127页 |
附录4 UvRV4的全基因组序列 | 第127-129页 |
附录5 UvPV2的全基因组序列 | 第129-131页 |
附录6 博士期间已发表的论文 | 第131-132页 |
致谢 | 第132-133页 |