摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
前言 | 第13-16页 |
1 实验材料、仪器及试剂配制 | 第16-21页 |
1.1 实验材料来源(细胞和试剂) | 第16-17页 |
1.2 主要仪器设备 | 第17-18页 |
1.3 主要试剂的配制 | 第18-21页 |
2 实验步骤 | 第21-32页 |
2.1 细胞培养 | 第21-22页 |
2.1.1 细胞计数 | 第21页 |
2.1.2 细胞复苏 | 第21页 |
2.1.3 细胞传代 | 第21-22页 |
2.1.4 细胞冻存 | 第22页 |
2.2 MTT法检测叶黄素对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响 | 第22-23页 |
2.3 叶黄素对人乳腺癌MCF-7细胞ROS水平的影响 | 第23-24页 |
2.4 RT-qPCR检测叶黄素对人乳腺癌MCF-7细胞中Nrf2和HO-1的mRNA表达的影响 | 第24-26页 |
2.4.1 提取细胞中总RNA | 第24-25页 |
2.4.2 反转录合成cDNA第一链 | 第25页 |
2.4.3 RT-qPCR | 第25-26页 |
2.5 Western Blot检测Nrf2和HO-1蛋白的表达 | 第26-29页 |
2.5.1 提取细胞中蛋白质 | 第26-27页 |
2.5.1.1 细胞总蛋白的提取 | 第26页 |
2.5.1.2 细胞中胞浆蛋白和胞核蛋白的提取 | 第26-27页 |
2.5.2 蛋白含量的测定 | 第27页 |
2.5.3 SDS-PAGE电泳 | 第27-29页 |
2.6 流式细胞术检测3-MA预处理后叶黄素对MCF-7细胞周期及凋亡的影响 | 第29-30页 |
2.7 RT-qPCR检测各组细胞中PI3K、AP-1、CyclinD1和Cox-2的mRNA的表达影响 | 第30页 |
2.8 Western blot检测各组细胞中PI3K、AP-1、Cox-2和CyclinD1的蛋白表达水平 | 第30-31页 |
2.9 统计学分析 | 第31-32页 |
3 结果 | 第32-39页 |
3.1 不同浓度叶黄素对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用 | 第32页 |
3.2 叶黄素对人乳腺癌MCF-7细胞中ROS水平的影响 | 第32-33页 |
3.3 叶黄素对人乳腺癌MCF-7细胞中Nrf2和HO-1的mRNA表达的影响 | 第33-34页 |
3.4 叶黄素对人乳腺癌MCF-7细胞中Nrf2和HO-1的蛋白表达的影响 | 第34页 |
3.5 3-MA预处理后叶黄素对人乳腺癌MCF-7细胞周期及凋亡的影响 | 第34-37页 |
3.6 3-MA预处理后叶黄素对人乳腺癌MCF-7细胞中PI3K、AP-1、Cox-2和CyclinD1的mRNA表达水平的影响 | 第37-38页 |
3.7 3-MA预处理后叶黄素对人乳腺癌MCF-7细胞中PI3K、AP-1、Cox-2和CyclinD1的蛋白表达水平的影响 | 第38-39页 |
4 讨论 | 第39-43页 |
5 结论 | 第43-44页 |
6 参考文献 | 第44-49页 |
综述 | 第49-71页 |
参考文献 | 第62-71页 |
中英文缩略词表 | 第71-72页 |
个人简历 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |