| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略词（Abbreviation） | 第11-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-22页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 1.1 病原学研究 | 第14页 |
| 1.2 流行病学 | 第14-15页 |
| 1.3 猪链球菌致病性与毒力因子研究 | 第15-20页 |
| 1.4 猪链球菌诱导宿主产生败血性休克研究进展 | 第20-21页 |
| 1.5 分支酸合成酶研究进展 | 第21-22页 |
| 2 研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 3 材料与方法 | 第23-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 3.1.1 菌种和质粒 | 第23页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 3.1.3 培养基和抗生素 | 第23-24页 |
| 3.1.4 蛋白表达和纯化相关试剂 | 第24页 |
| 3.1.5 SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western Blotting相关试剂 | 第24-25页 |
| 3.1.6 主要仪器 | 第25页 |
| 3.1.7 试验动物 | 第25页 |
| 3.2 实验方法 | 第25-42页 |
| 3.2.1 菌株培养以及细胞株的传代 | 第25-26页 |
| 3.2.2 基因克隆以及质粒构建 | 第26-32页 |
| 3.2.3 蛋白表达与纯化 | 第32-35页 |
| 3.2.4 实时荧光定量PCR检测重组蛋白的致炎性 | 第35-38页 |
| 3.2.5 信号通路抑制剂试验 | 第38页 |
| 3.2.6 Western Blot技术验证 | 第38-39页 |
| 3.2.7 生长曲线的测定 | 第39页 |
| 3.2.8 人工感染小鼠 | 第39页 |
| 3.2.9 突变体与野生菌在体外与RAW264.7 细胞作用促炎性比较 | 第39页 |
| 3.2.10 实时荧光定量PCR检测aroC在小鼠体内和体外时的表达 | 第39-41页 |
| 3.2.11 数据分析 | 第41-42页 |
| 4 试验结果与分析 | 第42-53页 |
| 4.1 AroC重组表达质粒的构建及鉴定 | 第42-43页 |
| 4.2 AroC的表达条件探索 | 第43-44页 |
| 4.3 纯化后的AroC蛋白的SDS-PAGE鉴定及western blot验证 | 第44-45页 |
| 4.4 重组蛋白中内毒素的测定 | 第45-46页 |
| 4.5 重组蛋白浓度测定 | 第46-47页 |
| 4.6 重组蛋白AroC在RAW264.7 细胞上的促炎效果的实时荧光定量PCR检测 | 第47页 |
| 4.7 重组蛋白 Aro C 在原代细胞上的促炎效果的 RT-PCR 检测 | 第47-48页 |
| 4.8 ERK1/2、JNK、NK-kB和P38 在AroC诱导炎症反应的过程中发挥的作用 | 第48-49页 |
| 4.9 TLR2 和 TLR4 在 Aro C 诱导炎症反应的过程中发挥的作用 | 第49页 |
| 4.10 突变株与野生株生长曲线的测定 | 第49-50页 |
| 4.11 突变株与野生菌株在RAW264.7 上的促炎性比较 | 第50-51页 |
| 4.12 突变株与野生菌株的小鼠致病实验 | 第51-52页 |
| 4.13 实时荧光定量PCR检测aroC在小鼠体内和体外时的表达情况 | 第52-53页 |
| 5 讨论 | 第53-55页 |
| 6 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
