摘要 | 第5-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第13-24页 |
1.1 哮喘与免疫失衡 | 第14-16页 |
1.1.1 哮喘的发生 | 第14-15页 |
1.1.2 IL-33参与哮喘的发生 | 第15-16页 |
1.2 ILC2细胞 | 第16-18页 |
1.2.1 ILC2细胞的特点与功能 | 第16-17页 |
1.2.2 ILC2细胞与哮喘 | 第17-18页 |
1.3 Rac1 | 第18-21页 |
1.3.1 Rac1的特点与功能 | 第18-19页 |
1.3.2 Rac1与哮喘 | 第19-20页 |
1.3.3 Rac1的抑制剂EHT1864 | 第20-21页 |
1.4 本实验的研究目的、方法、实验设计方案及意义 | 第21-24页 |
1.4.1 研究目的 | 第21-22页 |
1.4.2 研究方法 | 第22页 |
1.4.3 实验设计 | 第22-23页 |
1.4.3.1 研究思路 | 第22页 |
1.4.3.2 技术路线 | 第22-23页 |
1.4.4 实验研究意义 | 第23-24页 |
第二章 OVA哮喘模型的建立与鉴定 | 第24-32页 |
2.1 实验仪器和材料 | 第24-26页 |
2.1.1 实验动物 | 第24页 |
2.1.2 主要试剂 | 第24-25页 |
2.1.3 主要溶液配制 | 第25页 |
2.1.4 主要仪器 | 第25-26页 |
2.2 试验方法 | 第26-29页 |
2.2.1 小鼠OVA哮喘模型的建立 | 第26页 |
2.2.2 炎症标本采集操作步骤 | 第26-28页 |
2.2.3 肺组织切片HE染色 | 第28页 |
2.2.4 酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血上清中OVA特异性IgE和总IgE水平 | 第28-29页 |
2.2.5 统计学分析 | 第29页 |
2.3 实验结果 | 第29-31页 |
2.3.1 哮喘小鼠的表现 | 第29页 |
2.3.2 小鼠肺组织切片病理改变 | 第29-30页 |
2.3.3 小鼠血清OVA-IgE和总IgE | 第30-31页 |
2.4 讨论 | 第31-32页 |
第三章 哮喘小鼠Rac1以及ILC2相关细胞因子的检测 | 第32-45页 |
3.1 实验仪器和材料 | 第33-34页 |
3.1.1 实验仪器 | 第33页 |
3.1.2 实验试剂和材料 | 第33-34页 |
3.1.3 实验溶液配制 | 第34页 |
3.2 实验方法 | 第34-38页 |
3.2.1 免疫荧光检测支气管Rac1表达 | 第34-35页 |
3.2.2 各标本总RNA的提取 | 第35页 |
3.2.3 将RNA逆转录合成CDNA | 第35-36页 |
3.2.4 引物的设计与合成 | 第36-37页 |
3.2.5 荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测mRNA水平 | 第37页 |
3.2.6 酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆和灌洗液上清IL-5、IL-13和IL-33蛋白水平 | 第37-38页 |
3.2.7 统计学分析 | 第38页 |
3.3 实验结果 | 第38-43页 |
3.3.1 支气管Rac1免疫荧光蛋白表达水平 | 第38-39页 |
3.3.2 肺组织、外周血、肺泡灌洗液中Rac1的mRNA表达 | 第39-40页 |
3.3.3 哮喘模型组ILC2相关细胞因子水平的改变 | 第40-41页 |
3.3.4 肺组织中Rac1与ILC2相关细胞因子的相关性分析 | 第41-43页 |
3.4 讨论 | 第43-45页 |
第四章 Rac1抑制剂EHT1864对ILC2s特征性细胞因子表达的影响 | 第45-54页 |
4.1 实验仪器和材料 | 第46-47页 |
4.1.1 实验仪器 | 第46-47页 |
4.1.2 实验试剂和材料 | 第47页 |
4.1.3 实验溶液配制 | 第47页 |
4.2 实验方法 | 第47-48页 |
4.2.1 抑制剂EHT1864在模型中的使用 | 第47页 |
4.2.2 免疫荧光检测支气管Rac1表达 | 第47页 |
4.2.3 肺泡灌洗液,小鼠眼球外周血的分离 | 第47-48页 |
4.2.4 各标本RNA的提取,逆转录,引物的设计与合成 | 第48页 |
4.2.5 提取外周血中单个核细胞 | 第48页 |
4.2.6 荧光定量PCR法检测各个标本各基因mRNA水平 | 第48页 |
4.2.7 酶联免疫吸附法(ELISA)检测灌洗液上清,血清中细胞因子蛋白水平 | 第48页 |
4.2.8 统计学分析 | 第48页 |
4.3 实验结果 | 第48-52页 |
4.3.1 小鼠支气管免疫荧光Rac1抗体染色 | 第48-50页 |
4.3.2 小鼠肺组织、外周血中Rac1 mRNA的改变 | 第50页 |
4.3.3 小鼠肺组织HE染色 | 第50-51页 |
4.3.4 小鼠肺组织中IL-33 mRNA水平以及血浆、肺泡灌洗液IL-33蛋白表达水平的改变 | 第51-52页 |
4.4 讨论 | 第52-54页 |
第五章 主要结论与展望 | 第54-56页 |
5.1 主要结论 | 第54页 |
5.2 展望 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
致谢 | 第63-65页 |
攻读硕士期间已发表与待发表的文章 | 第65-66页 |
英文缩写索引 | 第66-67页 |
图标清单 | 第67页 |