| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语/符号说明 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-18页 |
| 研究现状、成果 | 第13-16页 |
| 研究目的、方法 | 第16-18页 |
| 对象和方法 | 第18-36页 |
| 1.1 实验材料 | 第18-21页 |
| 1.1.1 临床组织样品 | 第18页 |
| 1.1.2 细胞系 | 第18页 |
| 1.1.3 裸鼠 | 第18页 |
| 1.1.4 主要实验仪器 | 第18-19页 |
| 1.1.5 主要实验试剂 | 第19-21页 |
| 1.2 实验方法 | 第21-36页 |
| 1.2.1 蛋白质提取 | 第21页 |
| 1.2.2 Western blot检测蛋白表达水平 | 第21-23页 |
| 1.2.3 总RNA提取 | 第23-24页 |
| 1.2.4 miRNA及mRNA的qRT-PCR定量检测 | 第24-27页 |
| 1.2.5 细胞培养 | 第27-29页 |
| 1.2.6 miR-16 的过表达与下调 | 第29页 |
| 1.2.7 荧光素酶报告实验 | 第29-30页 |
| 1.2.8 除内毒素质粒的提取 | 第30-31页 |
| 1.2.9 KRAS的过表达和下调 | 第31页 |
| 1.2.10 CCK-8 增殖实验 | 第31-32页 |
| 1.2.11 侵袭实验 | 第32页 |
| 1.2.12 凋亡实验 | 第32-33页 |
| 1.2.13 小鼠皮下植瘤 | 第33-34页 |
| 1.2.14 HE染色 | 第34页 |
| 1.2.15 免疫组化 | 第34-35页 |
| 1.2.16 统计学分析 | 第35-36页 |
| 结果 | 第36-53页 |
| 2.1 结直肠癌组织中KRAS高表达，mi R-16 低表达 | 第36-38页 |
| 2.1.1 结直肠癌组织中KRAS表达分析 | 第36-37页 |
| 2.1.2 利用生物信息学软件预测靶点 | 第37页 |
| 2.1.3 结直肠癌组织中miR-16 表达水平 | 第37-38页 |
| 2.2 细胞实验证实miR-16 可靶向调控KRAS的表达 | 第38-41页 |
| 2.2.1 荧光素酶报告实验证实miR-16 可直接与KRAS的 3’-UTR区结合 | 第38-39页 |
| 2.2.2 miR-16 在转录后水平调控KRAS的表达 | 第39-41页 |
| 2.3 miR-16 对结直肠癌细胞生物学行为的影响 | 第41-43页 |
| 2.3.1 miR-16 抑制结直肠癌细胞的增殖 | 第41-42页 |
| 2.3.2 miR-16 抑制结直肠癌细胞的侵袭 | 第42-43页 |
| 2.3.3 miR-16 促进结直肠癌细胞的凋亡 | 第43页 |
| 2.4 KRAS蛋白对结直肠癌细胞生物学行为的影响 | 第43-46页 |
| 2.4.1 KRAS促进结直肠癌细胞的增殖 | 第44-45页 |
| 2.4.2 KRAS促进结直肠癌细胞的侵袭 | 第45页 |
| 2.4.3 KRAS抑制结直肠癌细胞的凋亡 | 第45-46页 |
| 2.5 过表达KRAS可部分削弱mi R-16 对SW480细胞生物学功能的影响 | 第46-48页 |
| 2.5.1 过表达KRAS可部分削弱mi R-16 对细胞增殖的抑制作用 | 第46-47页 |
| 2.5.2 过表达KRAS可部分削弱mi R-16 对细胞侵袭的抑制作用 | 第47-48页 |
| 2.5.3 过表达KRAS可部分削弱mi R-16 对细胞凋亡的促进作用 | 第48页 |
| 2.6 动物实验揭示miR16KRAS信号通路对肿瘤生成的影响 | 第48-53页 |
| 2.6.1 验证过表达miR-16 慢病毒的转染效率 | 第48-49页 |
| 2.6.2 miR16KRAS信号通路对小鼠体内成瘤的影响 | 第49-53页 |
| 讨论 | 第53-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第66-67页 |
| 综述 MiRNA-16 在肿瘤中的研究进展 | 第67-82页 |
| 综述参考文献 | 第76-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 个人简历 | 第83页 |
