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栉孔扇贝(Chlamys farreri)儿茶酚胺能神经内分泌免疫调节系统的初步研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第一章 研究背景第10-34页
 第一节 神经内分泌免疫调节系统简介第10-11页
 第二节 神经内分泌免疫调节轴的构成第11-16页
  一、系统性神经内分泌免疫调节轴第11-12页
  二、区域性神经内分泌免疫调节轴第12-13页
  三、局部性神经内分泌免疫调节轴第13-15页
  四、免疫细胞自身神经内分泌免疫调节轴第15-16页
 第三节 免疫应答对神经内分泌系统的激活第16-18页
  一、中枢神经系统的免疫激活第16-17页
  二、外周神经系统的免疫激活第17-18页
 第四节 神经内分泌系统对免疫应答的调节第18-28页
  一、免疫应答的糖皮质激素调节第18-21页
  二、免疫应答的儿茶酚胺调节第21-25页
  三、免疫应答的乙酰胆碱调节第25-27页
  四、免疫应答的神经肽Y 调节第27-28页
 第五节 神经内分泌免疫调节系统的生理学意义第28-30页
  一、增强免疫应答能力,迅速清除入侵病原第28-29页
  二、抑制免疫应答能力,恢复机体内稳态第29页
  三、调节机体免疫应答过程中的能量分配第29-30页
 第六节 无脊椎动物儿茶酚胺能神经内分泌系统的研究进展第30-31页
  一、无脊椎动物的儿茶酚胺能神经内分泌系统第30-31页
  二、无脊椎动物中儿茶酚胺的免疫调节功能第31页
 第七节 本研究的主要目的及意义第31-34页
第二章 材料和方法第34-69页
 第一节 实验材料第34-44页
  一、实验动物及菌株第34-36页
  二、主要试剂耗材第36-43页
  三、主要仪器设备第43-44页
 第二节 实验方法第44-69页
  一、栉孔扇贝组织总RNA 制备第44-45页
  二、栉孔扇贝cDNA 文库的构建及序列分析第45页
  三、RACE 技术获得基因cDNA 全长序列第45-48页
  四、PCR 扩增基因片段第48-49页
  五、琼脂糖凝胶电泳回收PCR 产物第49页
  六、感受态细胞的制备、连接及转化第49-51页
  七、荧光实时定量PCR第51页
  八、蛋白的原核重组表达、纯化及复性第51-56页
  九、重组蛋白活性测定第56-57页
  十、多克隆抗体(免疫血清)的制备及鉴定第57-58页
  十一、Western blotting 分析第58页
  十二、包囊化作用及ROS 水平测定第58-60页
  十三、栉孔扇贝的鳗弧菌刺激实验第60页
  十四、血淋巴上清液中儿茶酚胺浓度的测定第60-63页
  十五、血淋巴上清液中SOD、CAT 和LYZ 的活性测定第63-64页
  十六、血淋巴的LPS 孵育和TNF-α测定第64-65页
  十七、TNF-α处理栉孔扇贝实验第65-66页
  十八、dsRNA 干扰第66-67页
  十九、栉孔扇贝的儿茶酚胺处理实验第67-69页
第三章 实验结果第69-108页
 第一节 儿茶酚胺代谢相关酶和肾上腺素能受体基因的研究第69-89页
  一、栉孔扇贝儿茶酚胺代谢相关酶和肾上腺素能受体基因第69页
  二、栉孔扇贝儿茶酚胺代谢相关酶和肾上腺素能受体基因的分子特征第69-82页
  三、栉孔扇贝儿茶酚胺代谢相关酶和肾上腺素能受体基因mRNA 的组织分布第82-84页
  四、栉孔扇贝儿茶酚胺代谢相关酶的重组蛋白及其活性第84-89页
 第二节 鳗弧菌刺激后栉孔扇贝血淋巴中免疫相关酶活性的时序变化第89页
 第三节 鳗弧菌刺激后扇贝血淋巴中儿茶酚胺浓度的时序变化第89-92页
 第四节 菌刺激后扇贝儿茶酚胺代谢相关酶和肾上腺素能受体基因的表达变化第92-93页
 第五节 TNF-α诱导对扇贝血淋巴细胞中免疫相关基因表达量的影响第93-95页
  一、LPS 孵育促进了血淋巴 TNF-α 类分子浓度的上升第93页
  二、TNF-α诱导影响了扇贝血淋巴细胞中免疫相关基因的表达量第93-95页
 第六节 TNF-α诱导对扇贝血淋巴细胞中儿茶酚胺代谢基因表达量的影响第95-97页
 第七节 CfDDC 和CfMAO 基因被干扰后血淋巴细胞中免疫相关酶基因的时序表达第97-102页
  一、CfDDC 和CfMAO 基因的干扰第97-98页
  二、CfDDC 和CfMAO 被干扰后血淋巴细胞中免疫相关酶基因的时序表达第98-102页
 第八节 儿茶酚胺处理后扇贝血淋巴中免疫相关酶活性的变化第102-108页
  一、去甲肾上腺素和肾上腺素处理对免疫相关酶活性的影响第102-105页
  二、α和β型肾上腺素能受体拮抗剂处理对免疫相关酶活性的影响第105-108页
第四章 分析与讨论第108-123页
 第一节 栉孔扇贝儿茶酚胺能神经内分泌系统的分子特征第109-112页
  一、栉孔扇贝儿茶酚胺代谢相关酶和肾上腺素能受体基因的确定第109-111页
  二、栉孔扇贝儿茶酚胺神经内分泌系统的组织分布第111页
  三、栉孔扇贝儿茶酚胺代谢相关酶的功能分析第111-112页
 第二节 儿茶酚胺能神经内分泌系统参与扇贝的免疫应答反应第112-116页
  一、栉孔扇贝应对鳗弧菌刺激的免疫应答反应第113-114页
  二、免疫应答反应中儿茶酚胺能神经内分泌系统的激活第114-115页
  三、免疫应答反应中血淋巴细胞源儿茶酚胺系统的激活第115-116页
 第三节 细胞因子对扇贝儿茶酚胺能神经内分泌系统的激活第116-120页
  一、LPS 处理对扇贝血淋巴中 TNF-α 类分子浓度的诱导第117-118页
  二、TNF-α对栉孔扇贝固有免疫应答反应的促进第118-119页
  三、TNF-α对栉孔扇贝儿茶酚胺能神经内分泌系统的激活第119-120页
 第四节 儿茶酚胺对扇贝免疫应答的调节作用第120-123页
  一、CfDDC 和CfMAO 干扰后扇贝的免疫应答能力受到了抑制第120-121页
  二、高浓度去甲肾上腺素和肾上腺素降低了扇贝的免疫应答能力第121-122页
  三、肾上腺素能受体拮抗剂影响了扇贝免疫应答的激活第122-123页
第五章 结论第123-126页
第六章 在读期间完成的其他工作第126-132页
参考文献第132-157页
已完成和发表的论文第157-159页
致谢第159页

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