| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-41页 |
| ·无脊椎动物免疫的研究进展 | 第12-26页 |
| ·无脊椎动物信号识别 | 第13-14页 |
| ·病原相关分子模式 | 第14-15页 |
| ·模式识别受体 | 第15-23页 |
| ·免疫信号的调整和放大 | 第23-25页 |
| ·无脊椎动物特异性免疫的研究 | 第25-26页 |
| ·皱纹盘鲍免疫机制及影响因素研究 | 第26-33页 |
| ·皱纹盘鲍的细胞免疫 | 第27-30页 |
| ·体液免疫 | 第30-33页 |
| ·鲍大规模死亡事件的相关研究 | 第33-38页 |
| ·鲍的病原 | 第34-37页 |
| ·影响鲍免疫能力相关因子的研究 | 第37-38页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第38-41页 |
| ·本研究的目的 | 第38-39页 |
| ·本研究的意义 | 第39-41页 |
| 第二章 材料与方法 | 第41-56页 |
| ·材料 | 第41-43页 |
| ·实验动物及组织收集 | 第41页 |
| ·温度影响实验样品及处理 | 第41页 |
| ·主要化学试剂 | 第41-42页 |
| ·主要试剂的配制 | 第42-43页 |
| ·实验设备 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-56页 |
| ·鲍总RNA 的提取 | 第43-45页 |
| ·鲍DNA 的提取 | 第45页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第45-46页 |
| ·琼脂糖凝胶纯化 PCR 产物 | 第46-47页 |
| ·PCR 产物连接和转化 | 第47-49页 |
| ·目的基因的生物信息学分析 | 第49-50页 |
| ·实时定量 PCR 法检测目的基因的表达 | 第50-53页 |
| ·染色体步移技术 | 第53-56页 |
| 第三章 皱纹盘鲍溶菌酶的克隆表达及其重组产物的活性研究 | 第56-82页 |
| ·研究背景 | 第56-60页 |
| ·材料与方法 | 第60-67页 |
| ·皱纹盘鲍C 型溶菌酶cDNA 全长克隆 | 第60-61页 |
| ·皱纹盘鲍C 型溶菌酶基因全长克隆 | 第61页 |
| ·溶菌酶表达的实时定量PCR 检测 | 第61-62页 |
| ·目的基因生物信息学分析 | 第62-63页 |
| ·原核表达重组质粒构建 | 第63-64页 |
| ·重组蛋白的表达与检测 | 第64-65页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第65页 |
| ·重组蛋白的复性 | 第65-66页 |
| ·重组蛋白的浓度测定 | 第66页 |
| ·溶菌酶酶活测定 | 第66-67页 |
| ·结果 | 第67-76页 |
| ·皱纹盘鲍HdLysC 基因的cDNA 序列和推导氨基酸序列分析 | 第67-69页 |
| ·HdLysC 的基因组结构和启动子序列分析 | 第69-73页 |
| ·皱纹盘鲍HdLysC 基因的分子进化研究 | 第73-74页 |
| ·HdLysC 基因的mRNA 在皱纹盘鲍体内的组织特异性表达 | 第74页 |
| ·HdLysC 基因在鳗弧菌刺激后的表达规律分析 | 第74-75页 |
| ·HdLysC 基因表达蛋白的表达与纯化 | 第75页 |
| ·重组HdLysC 蛋白的活性测定 | 第75-76页 |
| ·讨论 | 第76-82页 |
| 第四章 皱纹盘鲍一种半胱氨酸蛋白酶抑制因子的克隆与表达研究 | 第82-98页 |
| ·研究背景 | 第82-89页 |
| ·抗原呈递作用 | 第84-86页 |
| ·cystatin 与细胞因子分泌 | 第86-87页 |
| ·cystatin 与一氧化氮合成 | 第87页 |
| ·cystatin 的免疫调节作用 | 第87-89页 |
| ·材料与方法 | 第89-90页 |
| ·皱纹盘鲍半胱氨酸蛋白酶抑制因子基因全长克隆 | 第89页 |
| ·皱纹盘鲍半胱氨酸蛋白酶抑制因子基因全长克隆 | 第89页 |
| ·半胱氨酸蛋白酶抑制因子表达的实时定量PCR 检测 | 第89页 |
| ·温度对半胱氨酸蛋白酶抑制因子基因表达的影响 | 第89-90页 |
| ·目的基因生物信息学分析 | 第90页 |
| ·实验结果 | 第90-95页 |
| ·皱纹盘鲍半胱氨酸蛋白酶抑制因子cDNA 序列和推导氨基酸序列分析 | 第90-92页 |
| ·皱纹盘鲍HdCpi 启动子序列分析 | 第92-93页 |
| ·皱纹盘鲍HdCpi 基因的分子进化研究 | 第93-94页 |
| ·皱纹盘鲍HdCpi 基因体内组织特异性表达 | 第94-95页 |
| ·HdCpi 基因在鳗弧菌刺激后的表达规律分析 | 第95页 |
| ·讨论 | 第95-98页 |
| 第五章 皱纹盘鲍一种丝氨酸蛋白酶抑制因子的克隆与表达研究 | 第98-114页 |
| ·研究背景 | 第98-101页 |
| ·Kazal 型丝氨酸蛋白酶抑制剂家族 | 第98-99页 |
| ·Kunitz 型丝氨酸蛋白酶抑制剂 | 第99页 |
| ·Serpin 型丝氨酸蛋白酶抑制剂 | 第99-100页 |
| ·α2-巨球蛋白（α2-macroglobulin） | 第100页 |
| ·Pacifastin 型蛋白酶抑制剂 | 第100-101页 |
| ·丝氨酸蛋白酶抑制剂在无脊椎动物免疫体系中的作用 | 第101-105页 |
| ·对抗病原体蛋白酶 | 第102页 |
| ·调节内源性蛋白酶活性 | 第102-103页 |
| ·血淋巴凝结 | 第103页 |
| ·酚氧化酶原激活 | 第103-105页 |
| ·参与机体胚胎发育及抗菌蛋白的诱导表达过程 | 第105页 |
| ·材料与方法 | 第105-106页 |
| ·皱纹盘鲍HdSpi 基因全长克隆 | 第105页 |
| ·皱纹盘鲍HdSpi 基因启动子序列的克隆 | 第105-106页 |
| ·皱纹盘鲍HdSpi 基因表达的实时定量PCR 检测 | 第106页 |
| ·目的基因生物信息学分析 | 第106页 |
| ·结果 | 第106-111页 |
| ·皱纹盘鲍HdSpi 基因cDNA 序列和推导氨基酸序列分析 | 第106-108页 |
| ·皱纹盘鲍HdSpi 基因启动子序列分析 | 第108-109页 |
| ·皱纹盘鲍HdSpi 基因的分子进化研究 | 第109-110页 |
| ·皱纹盘鲍HdSpi 基因体内组织特异性表达 | 第110-111页 |
| ·鳗弧菌刺激后皱纹盘鲍HdSpi 基因的表达规律分析 | 第111页 |
| ·讨论 | 第111-114页 |
| 第六章 温度对皱纹盘鲍免疫能力的影响研究 | 第114-131页 |
| ·研究背景 | 第114-115页 |
| ·材料与方法 | 第115-120页 |
| ·样品处理 | 第115页 |
| ·鲍血淋巴细胞免疫学指标 | 第115-116页 |
| ·流式细胞仪指标测定 | 第116-119页 |
| ·免疫相关基因的表达研究 | 第119-120页 |
| ·实验数据的统计分析 | 第120页 |
| ·实验结果 | 第120-127页 |
| ·不同温度条件下皱纹盘鲍血细胞指标 | 第120-121页 |
| ·不同温度条件下皱纹盘鲍血细胞吞噬能力 | 第121页 |
| ·不同温度条件下皱纹盘鲍血细胞呼吸爆发能力 | 第121-122页 |
| ·不同温度条件下皱纹盘鲍鳃组织过氧化氢酶表达比较 | 第122页 |
| ·不同温度条件下皱纹盘鲍鳃组织溶菌酶表达比较 | 第122-123页 |
| ·不同温度条件下皱纹盘鲍鳃组织HdSpi 表达比较 | 第123页 |
| ·不同温度条件下皱纹盘鲍组织 HdCpi 表达比较 | 第123-124页 |
| ·不同温度条件下皱纹盘鲍细菌刺激后组织过氧化氢酶表达比较 | 第124-125页 |
| ·不同温度条件下弧菌刺激后皱纹盘鲍鳃组织 HdLys 表达比较 | 第125页 |
| ·不同温度条件下弧菌刺激后皱纹盘鲍鳃组织 HdCpi 表达比较 | 第125-126页 |
| ·不同温度条件下弧菌刺激后皱纹盘鲍鳃组织 HdSpi 表达比较 | 第126-127页 |
| ·讨论 | 第127-131页 |
| 结论 | 第131-133页 |
| 参考文献 | 第133-154页 |
| 博士期间发表的文章 | 第154-155页 |
| 致谢 | 第155页 |
