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BdGSTe8介导桔小实蝇对马拉硫磷抗性的分子机理研究

摘要第8-10页
Abstract第10-12页
第一章 文献综述第13-19页
    1 桔小实蝇的危害与杀虫剂抗性第13-14页
        1.1 桔小实蝇复合种及其危害特点第13页
        1.2 桔小实蝇抗药性现状第13-14页
    2 桔小实蝇对有机磷类杀虫剂抗性机理研究进展第14-16页
        2.1 桔小实蝇对有机磷类杀虫剂靶标抗性机理第14-15页
        2.2 桔小实蝇对马拉硫磷代谢抗性机理第15-16页
    3 谷胱甘肽硫转移酶第16-19页
引言第19-21页
    1 论文的研究背景以及意义第19页
    2 论文的研究思路与总体框架第19-21页
第二章 桔小实蝇BdGSTe8的筛选和鉴定第21-35页
    1 材料与方法第21-27页
        1.1 供试虫源第21页
        1.2 桔小实蝇总RNA的提取第21-22页
        1.3 反转录合成cDNA第22-23页
        1.4 BdGSTe8开放阅读框的验证第23-24页
        1.5 BdGSTe8基因组序列鉴定第24-25页
        1.6 BdGSTe8氨基酸序列比对第25页
        1.7 系统发育树的构建第25页
        1.8 BdGSTe8的时空表达分析第25-27页
        1.9 桔小实蝇马拉硫磷抗性和敏感品系BdGSTe8表达量差异分析第27页
        1.10 数据分析第27页
    2 结果与分析第27-32页
        2.1 BdGSTe8系统发育分析第27-29页
        2.2 BdGSTe8蛋白基本生物信息分析第29页
        2.3 BdGSTe8多态性分析第29-30页
        2.4 BdGSTe8时空表达模式分析第30-31页
        2.5 BdGSTe8在抗性和敏感品系的表达量差异分析第31-32页
    3 讨论第32-33页
    4 小结第33-35页
第三章 基于RNAi技术的BdGSTe8功能分析第35-43页
    1 材料和方法第35-40页
        1.1 试虫收集第35页
        1.2 桔小实蝇BdGSTe8的RNAi第35-39页
        1.3 干扰BdGSTe8后桔小实蝇对马拉硫磷的敏感性测定第39页
        1.4 数据分析第39-40页
    2 结果与分析第40-41页
        2.1 沉默效率检测第40-41页
        2.2 干扰BdGSTe8后桔小实蝇对马拉硫磷的敏感性测定第41页
    3 讨论第41-42页
    4 小结第42-43页
第四章 基于原核表达技术的离体BdGSTe8代谢能力解析第43-57页
    1 材料和方法第43-47页
        1.1 BdGSTe8的原核表达第43-44页
        1.2 桔小实蝇BdGSTe8表达产物鉴定第44-45页
        1.3 BdGSTe8原核表达后细胞生物测定第45页
        1.4 药剂代谢作用测定第45-46页
        1.5 定点突变第46-47页
    2 结果与分析第47-54页
        2.1 PCR检测结果第47-48页
        2.2 菌液检测结果第48页
        2.3 双酶切电泳结果第48-49页
        2.4 BdGSTe8连接pET28α 后菌液检测第49-50页
        2.5 BdGSTe8原核表达及蛋白酶活性测定第50页
        2.6 细胞生物测定第50-51页
        2.7 代谢测定第51-52页
        2.8 新物质鉴定第52-53页
        2.9 鉴定参与马拉硫磷抗性的关键氨基酸残基位点第53-54页
    3 讨论第54-55页
    4 小结第55-57页
第五章 主要结论、创新点及研究展望第57-59页
    1 主要结论第57-58页
        1.1 BdGSTe8具有基因多态性第57页
        1.2 BdGSTe8具有发育阶段和组织特异性第57页
        1.3 桔小实蝇BdGSTe8参与对马拉硫磷的解毒代谢和抗性形成过程第57页
        1.4 桔小实蝇BdGSTe8在离体条件下能直接代谢马拉硫磷第57-58页
    2 创新点第58页
    3 展望第58-59页
参考文献第59-68页
在读期间发表论文及参研课题情况第68-70页
    发表论文目录第68页
    参研课题情况第68-70页
致谢第70页

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