摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第13-19页 |
1 桔小实蝇的危害与杀虫剂抗性 | 第13-14页 |
1.1 桔小实蝇复合种及其危害特点 | 第13页 |
1.2 桔小实蝇抗药性现状 | 第13-14页 |
2 桔小实蝇对有机磷类杀虫剂抗性机理研究进展 | 第14-16页 |
2.1 桔小实蝇对有机磷类杀虫剂靶标抗性机理 | 第14-15页 |
2.2 桔小实蝇对马拉硫磷代谢抗性机理 | 第15-16页 |
3 谷胱甘肽硫转移酶 | 第16-19页 |
引言 | 第19-21页 |
1 论文的研究背景以及意义 | 第19页 |
2 论文的研究思路与总体框架 | 第19-21页 |
第二章 桔小实蝇BdGSTe8的筛选和鉴定 | 第21-35页 |
1 材料与方法 | 第21-27页 |
1.1 供试虫源 | 第21页 |
1.2 桔小实蝇总RNA的提取 | 第21-22页 |
1.3 反转录合成cDNA | 第22-23页 |
1.4 BdGSTe8开放阅读框的验证 | 第23-24页 |
1.5 BdGSTe8基因组序列鉴定 | 第24-25页 |
1.6 BdGSTe8氨基酸序列比对 | 第25页 |
1.7 系统发育树的构建 | 第25页 |
1.8 BdGSTe8的时空表达分析 | 第25-27页 |
1.9 桔小实蝇马拉硫磷抗性和敏感品系BdGSTe8表达量差异分析 | 第27页 |
1.10 数据分析 | 第27页 |
2 结果与分析 | 第27-32页 |
2.1 BdGSTe8系统发育分析 | 第27-29页 |
2.2 BdGSTe8蛋白基本生物信息分析 | 第29页 |
2.3 BdGSTe8多态性分析 | 第29-30页 |
2.4 BdGSTe8时空表达模式分析 | 第30-31页 |
2.5 BdGSTe8在抗性和敏感品系的表达量差异分析 | 第31-32页 |
3 讨论 | 第32-33页 |
4 小结 | 第33-35页 |
第三章 基于RNAi技术的BdGSTe8功能分析 | 第35-43页 |
1 材料和方法 | 第35-40页 |
1.1 试虫收集 | 第35页 |
1.2 桔小实蝇BdGSTe8的RNAi | 第35-39页 |
1.3 干扰BdGSTe8后桔小实蝇对马拉硫磷的敏感性测定 | 第39页 |
1.4 数据分析 | 第39-40页 |
2 结果与分析 | 第40-41页 |
2.1 沉默效率检测 | 第40-41页 |
2.2 干扰BdGSTe8后桔小实蝇对马拉硫磷的敏感性测定 | 第41页 |
3 讨论 | 第41-42页 |
4 小结 | 第42-43页 |
第四章 基于原核表达技术的离体BdGSTe8代谢能力解析 | 第43-57页 |
1 材料和方法 | 第43-47页 |
1.1 BdGSTe8的原核表达 | 第43-44页 |
1.2 桔小实蝇BdGSTe8表达产物鉴定 | 第44-45页 |
1.3 BdGSTe8原核表达后细胞生物测定 | 第45页 |
1.4 药剂代谢作用测定 | 第45-46页 |
1.5 定点突变 | 第46-47页 |
2 结果与分析 | 第47-54页 |
2.1 PCR检测结果 | 第47-48页 |
2.2 菌液检测结果 | 第48页 |
2.3 双酶切电泳结果 | 第48-49页 |
2.4 BdGSTe8连接pET28α 后菌液检测 | 第49-50页 |
2.5 BdGSTe8原核表达及蛋白酶活性测定 | 第50页 |
2.6 细胞生物测定 | 第50-51页 |
2.7 代谢测定 | 第51-52页 |
2.8 新物质鉴定 | 第52-53页 |
2.9 鉴定参与马拉硫磷抗性的关键氨基酸残基位点 | 第53-54页 |
3 讨论 | 第54-55页 |
4 小结 | 第55-57页 |
第五章 主要结论、创新点及研究展望 | 第57-59页 |
1 主要结论 | 第57-58页 |
1.1 BdGSTe8具有基因多态性 | 第57页 |
1.2 BdGSTe8具有发育阶段和组织特异性 | 第57页 |
1.3 桔小实蝇BdGSTe8参与对马拉硫磷的解毒代谢和抗性形成过程 | 第57页 |
1.4 桔小实蝇BdGSTe8在离体条件下能直接代谢马拉硫磷 | 第57-58页 |
2 创新点 | 第58页 |
3 展望 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-68页 |
在读期间发表论文及参研课题情况 | 第68-70页 |
发表论文目录 | 第68页 |
参研课题情况 | 第68-70页 |
致谢 | 第70页 |