| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-25页 |
| 1.1 小麦条锈病及研究现状 | 第12-15页 |
| 1.1.1 小麦条锈病的危害及研究概况 | 第12页 |
| 1.1.2 小麦条锈菌生物学特性 | 第12-13页 |
| 1.1.3 小麦与条锈菌互作的分子机制研究 | 第13-15页 |
| 1.2 植物病原真菌中蛋白激酶研究进展 | 第15-21页 |
| 1.2.1 MAPK级联途径在致病过程中的作用 | 第15页 |
| 1.2.2 cAMP-PKA信号途径 | 第15-16页 |
| 1.2.3 TOR激酶在真菌中研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.4 组氨酸蛋白激酶研究 | 第17-18页 |
| 1.2.5 SNF1蛋白激酶研究 | 第18页 |
| 1.2.6 细胞周期调节激酶（Cell Cycle-Regulating Kinases）研究 | 第18-19页 |
| 1.2.7 细胞极性蛋白激酶（Cell Polarity Kinases）研究 | 第19-21页 |
| 1.2.8 激酶组功能分析 | 第21页 |
| 1.3 基因沉默技术 | 第21-23页 |
| 1.3.1 转录水平基因沉默 | 第21页 |
| 1.3.2 病毒诱导的基因沉默 | 第21-22页 |
| 1.3.3 寄主介导的基因沉默 | 第22-23页 |
| 1.4 实验目的及意义和研究方法 | 第23-25页 |
| 1.4.1 实验目的及意义 | 第23-24页 |
| 1.4.2 研究方法 | 第24-25页 |
| 第二章 小麦条锈菌候选关键蛋白激酶基因的功能分析 | 第25-64页 |
| 2.1 实验材料、试剂及仪器 | 第25页 |
| 2.1.1 材料 | 第25页 |
| 2.1.2 试剂 | 第25页 |
| 2.1.3 仪器 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-42页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第25-26页 |
| 2.2.2 小麦条锈菌CYR31菌种扩繁与qRT-PCR RNA样品采集 | 第26页 |
| 2.2.3 总RNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.4 反转录cDNA第一链的合成 | 第27-28页 |
| 2.2.5 实时荧光定量PCR分析 | 第28-30页 |
| 2.2.6 设计VIGS靶标基因沉默片段及PCR扩增片段所需引物 | 第30-32页 |
| 2.2.7 PCR扩增VIGS靶标基因片段 | 第32-33页 |
| 2.2.8 PCR扩增产物电泳检测及DNA片段回收 | 第33-34页 |
| 2.2.9 连接pMD18-T中间载体 | 第34页 |
| 2.2.10制备大肠杆菌热转感受态 | 第34-35页 |
| 2.2.11大肠杆菌转化 | 第35页 |
| 2.2.12阳性克隆的菌落PCR检测 | 第35-36页 |
| 2.2.13大肠杆菌质粒小量提取及测序 | 第36-37页 |
| 2.2.14 VIGS重组载体构建 | 第37-38页 |
| 2.2.15病毒载体的线性化 | 第38页 |
| 2.2.16病毒载体的体外转录 | 第38-39页 |
| 2.2.17病毒接种 | 第39-40页 |
| 2.2.18条锈菌接种、取样及表型统计分析 | 第40页 |
| 2.2.19 VIGS靶标基因沉默效率检测 | 第40页 |
| 2.2.20组织学样品WGA染色处理 | 第40-41页 |
| 2.2.21 RNAi转基因载体构建 | 第41-42页 |
| 2.2.22基因枪法介导小麦转基因 | 第42页 |
| 2.3 结果分析 | 第42-59页 |
| 2.3.1 候选关键蛋白激酶基因序列分析 | 第42-47页 |
| 2.3.2 候选关键蛋白激酶基因的表达特征分析 | 第47页 |
| 2.3.3 候选关键蛋白激酶基因VIGS载体的构建 | 第47-48页 |
| 2.3.4 载体线性化及体外转录 | 第48-49页 |
| 2.3.5 BSMV病毒接种及病毒症状观察 | 第49-50页 |
| 2.3.6 小麦条锈菌接种、表型观察与统计分析 | 第50-55页 |
| 2.3.7 组织学观察结果 | 第55-57页 |
| 2.3.8 qRT-PCR分析条锈菌候选关键蛋白激酶基因的沉默效率 | 第57-59页 |
| 2.3.9 基因枪介导的条锈菌候选关键激酶基因RNAi转基因 | 第59页 |
| 2.4 结论与讨论 | 第59-64页 |
| 2.4.1 生物信息学分析 | 第59-61页 |
| 2.4.2 候选关键蛋白激酶基因表达特征分析 | 第61页 |
| 2.4.3 病毒介导的候选蛋白激酶基因沉默 | 第61-63页 |
| 2.4.4 寄主介导的候选关键蛋白激酶基因沉默 | 第63-64页 |
| 第三章 全文结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 作者简介 | 第76页 |
