| 中英文缩略词对照表 | 第7-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-32页 |
| 2.1 材料 | 第15-19页 |
| 2.1.1 主要软件 | 第15页 |
| 2.1.2 菌株、质粒和细胞 | 第15页 |
| 2.1.3 实验动物 | 第15页 |
| 2.1.4 主要试剂及试剂盒 | 第15-16页 |
| 2.1.5 部分试剂的配置方法 | 第16-18页 |
| 2.1.6 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-32页 |
| 2.2.1 Sj Vasa3基因整虫原位杂交 | 第19-24页 |
| 2.2.1.1 Sj Vasa3基因特异性片段获取 | 第19-20页 |
| 2.2.1.2 psp T-19+Sj Vasa3重组质粒的构建与鉴定 | 第20页 |
| 2.2.1.3 体外转录制备DIG-m RNA探针 | 第20-21页 |
| 2.2.1.4 单酶切使模板线性化 | 第21-22页 |
| 2.2.1.5 合成探针 | 第22页 |
| 2.2.1.6 日本血吸虫整虫原位杂交 | 第22-24页 |
| 2.2.2 si RNA干扰筛选消减Sj Vasa3基因表达的有效片段 | 第24-26页 |
| 2.2.2.1 从三个si RNA中筛选最佳片段 | 第24页 |
| 2.2.2.2 si RNA干扰18天成虫 | 第24-25页 |
| 2.2.2.3 RT-PCR检测si RNA干扰效果 | 第25-26页 |
| 2.2.3 表达Sj Vasa sh RNA逆转录病毒的包装及滴度测定 | 第26-31页 |
| 2.2.3.1 构建Sj Vasa3 sh RNA表达质粒 | 第26-28页 |
| 2.2.3.2 GP2-293细胞培养 | 第28-29页 |
| 2.2.3.3 逆转录病毒的包装 | 第29-31页 |
| 2.2.3.4 病毒滴定 | 第31页 |
| 2.2.4 逆转录病毒感染日本血吸虫 | 第31页 |
| 2.2.4.1 逆转录病毒感染18天成虫 | 第31页 |
| 2.2.5 逆转录病毒干扰效果测定 | 第31-32页 |
| 2.2.5.1 荧光定量检测Sj Vasa3基因表达水平 | 第31页 |
| 2.2.5.2 激光共聚焦显微镜观察日本血吸虫成虫生殖系统形态学变化 | 第31-32页 |
| 3 实验结果 | 第32-42页 |
| 3.1 Sj Vasa3的命名 | 第32-33页 |
| 3.2 原位杂交实验结果 | 第33-39页 |
| 3.2.1 体外转录合成DIG-RNA探针 | 第33-34页 |
| 3.2.2 日本血吸虫 24、36、42天成虫原位杂交结果 | 第34-39页 |
| 3.3 RNA干扰 | 第39-42页 |
| 3.3.1 筛选RNAi干扰靶点结果 | 第39页 |
| 3.3.2 成功构建含PLNHX_Hs U6_Vasa | 第39-40页 |
| 3.3.3 日本血吸虫RNA干扰后Sj Vasa3基因水平变化 | 第40-41页 |
| 3.3.4 日本血吸虫RNA干扰后对虫体及产卵影响 | 第41页 |
| 3.3.5 日本血吸虫RNA干扰后共聚焦观察形态学的变化。 | 第41-42页 |
| 4.讨论 | 第42-46页 |
| 4.1 原位杂交结果分析 | 第42-44页 |
| 4.2 RNA干扰方法选择 | 第44-45页 |
| 4.3 RNA干扰结果讨论 | 第45-46页 |
| 5.结论 | 第46页 |
| 参考文献 | 第46-54页 |
| 个人简历 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 综述 | 第56-69页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
