摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
符号表 | 第8-12页 |
第1章 文献综述 | 第12-20页 |
1.1 鸭病毒性肝炎的研究进展 | 第12-15页 |
1.1.1 鸭肝炎病毒生物学特征 | 第12-13页 |
1.1.2 鸭病毒性肝炎流行病学 | 第13-14页 |
1.1.3 鸭病毒性肝炎临床症状和病理变化 | 第14页 |
1.1.4 鸭病毒性肝炎临床诊断 | 第14页 |
1.1.5 鸭病毒性肝炎防治措施 | 第14-15页 |
1.2 TP5的研究进展 | 第15-16页 |
1.2.1 TP5的发现 | 第15页 |
1.2.2 TP5的生物学功能 | 第15-16页 |
1.2.3 TP5的应用前景 | 第16页 |
1.3 BP5的研究进展 | 第16-17页 |
1.3.1 BP5的发现 | 第16页 |
1.3.2 BP5的生物学功能 | 第16-17页 |
1.3.3 BP5的应用前景 | 第17页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第17-20页 |
第2章 DHV-1 VP1基因的克隆及表达 | 第20-28页 |
2.1 材料 | 第20-21页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第20页 |
2.1.2 主要试剂 | 第20-21页 |
2.2 方法 | 第21-25页 |
2.2.1 引物设计及合成 | 第21页 |
2.2.2 DHV-1VP1基因的PCR扩增 | 第21-23页 |
2.2.3 pET32a-VP1克隆质粒的构建 | 第23页 |
2.2.4 克隆质粒的纯化 | 第23页 |
2.2.5 重组质粒的鉴定 | 第23-24页 |
2.2.6 重组表达质粒pET32a-VP1的诱导表达与纯化 | 第24-25页 |
2.3 结果 | 第25-26页 |
2.3.1 DHV-1VP1基因的PCR扩增 | 第25页 |
2.3.2 pET32a-VP1克隆质粒的构建 | 第25-26页 |
2.4 讨论 | 第26-27页 |
2.5 小结 | 第27-28页 |
第3章 DHV-1 VP1蛋白特异性结合肽的筛选 | 第28-38页 |
3.1 材料 | 第28-29页 |
3.1.1 实验动物 | 第28页 |
3.1.2 主要试剂 | 第28-29页 |
3.2 方法 | 第29-31页 |
3.2.1 噬菌体12肽库的亲和筛选 | 第29-30页 |
3.2.2 噬菌体阳性克隆的ELISA鉴定 | 第30页 |
3.2.3 噬菌体阳性克隆的竞争抑制试验 | 第30-31页 |
3.2.4 阳性噬菌体克隆DNA序列测定 | 第31页 |
3.2.5 DHV-1 VP1蛋白结合肽P4-12 和P6-12 对鸭胚成纤维细胞增殖的影响 | 第31页 |
3.2.6 DHV-1 VP1蛋白结合肽P4-12 和P6-12 对DHV-1 在鸭胚成纤维细胞增殖的影响 | 第31页 |
3.3 结果 | 第31-35页 |
3.3.1 噬菌体12肽库的亲和筛选结果 | 第31-32页 |
3.3.2 噬菌体阳性克隆的ELISA鉴定结果 | 第32-33页 |
3.3.3 噬菌体阳性克隆特异性竞争抑制试验 | 第33-34页 |
3.3.4 噬菌体阳性克隆DNA序列测定 | 第34页 |
3.3.5 DHV-1 VP1蛋白结合肽P4-12 和P6-12 对鸭胚成纤维细胞增殖的影响 | 第34页 |
3.3.6 DHV-1 VP1蛋白结合肽P4-12 和P6-12 对DHV-1 在鸭胚成纤维细胞增殖的影响 | 第34-35页 |
3.4 讨论 | 第35-36页 |
3.5 小结 | 第36-38页 |
第4章 TBP5对DHV-1 VP1蛋白亚单位疫苗的免疫增强作用 | 第38-48页 |
4.1 材料 | 第38-39页 |
4.1.1 实验动物、毒株 | 第38页 |
4.1.2 主要试剂 | 第38-39页 |
4.2 方法 | 第39-41页 |
4.2.1 动物分组与免疫 | 第39页 |
4.2.2 间接ELISA法测定血清IgG抗体水平 | 第39-40页 |
4.2.3 鸭血清细胞因子(IFN-γ和IL-4)水平的测定 | 第40页 |
4.2.4 淋巴细胞增殖测定 | 第40页 |
4.2.5 病毒中和滴度测定 | 第40页 |
4.2.6 动物免疫保护试验 | 第40-41页 |
4.3 结果 | 第41-46页 |
4.3.1 血清Ig G抗体水平 | 第41-42页 |
4.3.2 鸭血清细胞因子IFN-γ和IL-4 水平 | 第42-43页 |
4.3.3 淋巴细胞增殖 | 第43页 |
4.3.4 病毒中和试验 | 第43-44页 |
4.3.5 动物攻毒免疫保护实验 | 第44-46页 |
4.4 讨论 | 第46-47页 |
4.4.1 免疫鸭各项指标监测分析 | 第46页 |
4.4.2 动物攻毒免疫保护试验 | 第46-47页 |
4.5 小结 | 第47-48页 |
第5章 结论 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
致谢 | 第54-56页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第56页 |