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大豆Rsv3复合位点在多个抗/感品种间的分子鉴定与比较研究

中文摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一部分 综述:研究背景第10-34页
    1 大豆花叶病及其病毒(Soybean Mosaic Virus,SMV)第10-16页
        1.1 概况第10页
        1.2 SMV的不同株系第10-12页
        1.3 SMV的性质第12-13页
        1.4 SMV的宿主范围第13页
        1.5 SMV的传播方式第13-15页
        1.6 大豆感染SMV后的发病症状第15-16页
        1.7 温度对SMV感染症状的影响第16页
    2 植物的抗病基因(R基因)第16-24页
        2.1 R基因的类型及主要结构域功能第18-21页
        2.2 R基因的抗病作用机制第21-22页
        2.3 R基因的多样性第22-24页
    3 大豆对SMV的抗感性以及抗病基因位点第24-32页
        3.1 Rsv1位点相关研究第25-27页
        3.2 “Rsv2”位点?第27页
        3.3 Rsv3位点相关研究第27-30页
        3.4 Rsv4位点相关研究第30-32页
    4 目前的问题和研究目的第32-34页
第二部分 多个品种大豆Rsv3位点中抗SMV候选基因的扩增与分析第34-51页
    1 引言第34页
    2 材料与试剂第34-38页
        2.1 大豆种质的选用第34-35页
        2.2 实验试剂和仪器第35-38页
            2.2.1 主要试剂第35-36页
            2.2.2 主要溶液的配制方法第36-37页
            2.2.3 实验仪器第37-38页
    3 实验方法第38-44页
        3.1 大豆基因组DNA提取第38-39页
        3.2 设计PCR扩增引物第39-41页
            3.2.1 保守引物第39-40页
            3.2.2 特异性引物第40-41页
        3.3 聚合酶链式反应(PCR)第41-43页
            3.3.1 混合测序使用的PCR体系第41-42页
            3.3.2 特异性引物分别扩增每个基因使用的PCR体系第42-43页
        3.4 电泳检测第43页
        3.5 胶回收第43-44页
        3.6 测序数据处理第44页
    4 结果与分析第44-50页
        4.1 系统进化树的构建第45-47页
        4.2 序列相似性分析第47页
        4.3 基因间的重组分析第47-49页
            4.3.1 抗性品种的14g38540中发生的一次重组事件第47-48页
            4.3.2 感性品种的14g38560中发生的一次重组事件第48-49页
        4.4 尚未获得序列的14g38590第49-50页
    5 讨论第50-51页
第三部分 早熟18大豆BAC基因组文库构建与Rsv3候选基因筛选第51-60页
    1 引言第51页
    2 材料与试剂第51-52页
        2.1 大豆种质的选择第51页
        2.2 实验试剂第51-52页
        2.3 实验仪器第52页
    3 实验方法第52-56页
        3.1 BAC文库构建第52-53页
            3.1.1 高分子量基因组DNA的提取第52页
            3.1.2 基因组DNA的部分酶切及大片段DNA的获得第52-53页
            3.1.3 大片段DNA与载体的连接转化第53页
            3.1.4 文库质量检测第53页
            3.1.5 挑取单克隆并保存菌种第53页
        3.2 在BAC库中筛选Rsv3候选基因第53-55页
            3.2.1 样品分组第53-54页
            3.2.2 利用Rsv3候选基因的引物进行筛选第54页
            3.2.3 利用SSR分子标记进行筛选第54-55页
        3.3 测序第55-56页
    4 实验结果第56-58页
    5 后续实验计划与讨论第58-60页
全文总结第60-62页
参考文献第62-70页
致谢第70-72页
研究生期间发表论文第72-74页
附录第74-81页

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