中文摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一部分 综述:研究背景 | 第10-34页 |
1 大豆花叶病及其病毒(Soybean Mosaic Virus,SMV) | 第10-16页 |
1.1 概况 | 第10页 |
1.2 SMV的不同株系 | 第10-12页 |
1.3 SMV的性质 | 第12-13页 |
1.4 SMV的宿主范围 | 第13页 |
1.5 SMV的传播方式 | 第13-15页 |
1.6 大豆感染SMV后的发病症状 | 第15-16页 |
1.7 温度对SMV感染症状的影响 | 第16页 |
2 植物的抗病基因(R基因) | 第16-24页 |
2.1 R基因的类型及主要结构域功能 | 第18-21页 |
2.2 R基因的抗病作用机制 | 第21-22页 |
2.3 R基因的多样性 | 第22-24页 |
3 大豆对SMV的抗感性以及抗病基因位点 | 第24-32页 |
3.1 Rsv1位点相关研究 | 第25-27页 |
3.2 “Rsv2”位点? | 第27页 |
3.3 Rsv3位点相关研究 | 第27-30页 |
3.4 Rsv4位点相关研究 | 第30-32页 |
4 目前的问题和研究目的 | 第32-34页 |
第二部分 多个品种大豆Rsv3位点中抗SMV候选基因的扩增与分析 | 第34-51页 |
1 引言 | 第34页 |
2 材料与试剂 | 第34-38页 |
2.1 大豆种质的选用 | 第34-35页 |
2.2 实验试剂和仪器 | 第35-38页 |
2.2.1 主要试剂 | 第35-36页 |
2.2.2 主要溶液的配制方法 | 第36-37页 |
2.2.3 实验仪器 | 第37-38页 |
3 实验方法 | 第38-44页 |
3.1 大豆基因组DNA提取 | 第38-39页 |
3.2 设计PCR扩增引物 | 第39-41页 |
3.2.1 保守引物 | 第39-40页 |
3.2.2 特异性引物 | 第40-41页 |
3.3 聚合酶链式反应(PCR) | 第41-43页 |
3.3.1 混合测序使用的PCR体系 | 第41-42页 |
3.3.2 特异性引物分别扩增每个基因使用的PCR体系 | 第42-43页 |
3.4 电泳检测 | 第43页 |
3.5 胶回收 | 第43-44页 |
3.6 测序数据处理 | 第44页 |
4 结果与分析 | 第44-50页 |
4.1 系统进化树的构建 | 第45-47页 |
4.2 序列相似性分析 | 第47页 |
4.3 基因间的重组分析 | 第47-49页 |
4.3.1 抗性品种的14g38540中发生的一次重组事件 | 第47-48页 |
4.3.2 感性品种的14g38560中发生的一次重组事件 | 第48-49页 |
4.4 尚未获得序列的14g38590 | 第49-50页 |
5 讨论 | 第50-51页 |
第三部分 早熟18大豆BAC基因组文库构建与Rsv3候选基因筛选 | 第51-60页 |
1 引言 | 第51页 |
2 材料与试剂 | 第51-52页 |
2.1 大豆种质的选择 | 第51页 |
2.2 实验试剂 | 第51-52页 |
2.3 实验仪器 | 第52页 |
3 实验方法 | 第52-56页 |
3.1 BAC文库构建 | 第52-53页 |
3.1.1 高分子量基因组DNA的提取 | 第52页 |
3.1.2 基因组DNA的部分酶切及大片段DNA的获得 | 第52-53页 |
3.1.3 大片段DNA与载体的连接转化 | 第53页 |
3.1.4 文库质量检测 | 第53页 |
3.1.5 挑取单克隆并保存菌种 | 第53页 |
3.2 在BAC库中筛选Rsv3候选基因 | 第53-55页 |
3.2.1 样品分组 | 第53-54页 |
3.2.2 利用Rsv3候选基因的引物进行筛选 | 第54页 |
3.2.3 利用SSR分子标记进行筛选 | 第54-55页 |
3.3 测序 | 第55-56页 |
4 实验结果 | 第56-58页 |
5 后续实验计划与讨论 | 第58-60页 |
全文总结 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-70页 |
致谢 | 第70-72页 |
研究生期间发表论文 | 第72-74页 |
附录 | 第74-81页 |