鹿茸干细胞的鉴定以及鹿茸再生关键调控基因的筛选
摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第13-15页 |
第一章 引言 | 第15-28页 |
1.1 鹿茸再生 | 第15-19页 |
1.1.1 鹿茸再生的概述 | 第15-16页 |
1.1.2 鹿茸的组织发生与结构 | 第16-19页 |
1.2 鹿茸再生的调控 | 第19-20页 |
1.2.1 激素调控 | 第19-20页 |
1.2.2 生长因子调控 | 第20页 |
1.2.3 信号通路调控 | 第20页 |
1.3 鹿茸干细胞 | 第20-24页 |
1.3.1 干细胞标记物 | 第21-22页 |
1.3.2 多分化潜能 | 第22-23页 |
1.3.3 干细胞微环境 | 第23-24页 |
1.4 鹿茸再生模型的特点 | 第24-26页 |
1.4.1 再生茸芽VS经典的再生芽基 | 第24-25页 |
1.4.2 鹿茸干细胞VS去分化细胞 | 第25-26页 |
1.4.3 鹿茸再生过程VS肢体愈合过程 | 第26页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第26-28页 |
第二章 鹿茸细胞培养与初步鉴定 | 第28-42页 |
2.1 材料和方法 | 第28-34页 |
2.1.1 实验动物 | 第28-29页 |
2.1.2 实验器材 | 第29页 |
2.1.3 实验试剂 | 第29页 |
2.1.4 组织采集 | 第29-32页 |
2.1.5 细胞培养 | 第32页 |
2.1.6 细胞增殖检测 | 第32页 |
2.1.7 细胞周期检测 | 第32-33页 |
2.1.8 细胞凋亡检测 | 第33页 |
2.1.9 细胞迁移检测 | 第33-34页 |
2.1.10 单克隆形成 | 第34页 |
2.2 结果 | 第34-39页 |
2.2.1 细胞培养结果 | 第34页 |
2.2.2 鹿茸细胞增殖 | 第34-35页 |
2.2.3 鹿茸细胞的周期分布 | 第35-36页 |
2.2.4 鹿茸细胞的凋亡 | 第36-37页 |
2.2.5 鹿茸细胞迁移 | 第37-38页 |
2.2.6 鹿茸细胞形成单克隆 | 第38-39页 |
2.3 讨论 | 第39-40页 |
2.4 本章小结 | 第40-42页 |
第三章 经典干细胞标记因子检测 | 第42-58页 |
3.1 材料和方法 | 第42-47页 |
3.1.1 实验器材 | 第42-43页 |
3.1.2 主要试剂 | 第43页 |
3.1.3 RNA样品准备 | 第43-44页 |
3.1.4 成骨诱导分化(微粒体培养) | 第44页 |
3.1.5 成脂诱导分化 | 第44-45页 |
3.1.6 Western-blot检测 | 第45页 |
3.1.7 微粒体染色 | 第45-46页 |
3.1.8 免疫荧光检测 | 第46页 |
3.1.9 流式细胞仪分析 | 第46-47页 |
3.2 结果 | 第47-56页 |
3.2.1 胚胎干细胞标记因子的检测 | 第47-49页 |
3.2.2 间充质干细胞标记因子的检测 | 第49-53页 |
3.2.3 Nestin在ASCs中的表达 | 第53-54页 |
3.2.4 多分化潜能 | 第54-56页 |
3.3 讨论 | 第56-57页 |
3.4 本章小结 | 第57-58页 |
第四章 转录组筛选鹿茸干细胞差异因子 | 第58-74页 |
4.1 材料和方法 | 第58-62页 |
4.1.1 实验器材 | 第58页 |
4.1.2 主要试剂 | 第58-59页 |
4.1.3 RNA样品准备 | 第59-60页 |
4.1.4 转录组测序 | 第60页 |
4.1.5 测序结果验证 | 第60-61页 |
4.1.6 免疫荧光检测 | 第61-62页 |
4.1.7 流式细胞仪分析 | 第62页 |
4.2 结果 | 第62-73页 |
4.2.1 转录组测序结果 | 第62-70页 |
4.2.2 qPCR验证测序结果 | 第70-71页 |
4.2.3 标准干细胞因子比较 | 第71-73页 |
4.3 讨论 | 第73页 |
4.4 本章小结 | 第73-74页 |
第五章 蛋白组学筛选鹿茸干细胞标记因子 | 第74-93页 |
5.1 材料和方法 | 第74-79页 |
5.1.1 实验器材 | 第74-75页 |
5.1.2 主要试剂 | 第75页 |
5.1.3 蛋白样品准备 | 第75-76页 |
5.1.4 双向电泳 | 第76页 |
5.1.5 扫描与图像分析 | 第76-77页 |
5.1.6 差异蛋白的生物信息学分析 | 第77页 |
5.1.7 Western-blot | 第77页 |
5.1.8 免疫荧光检测 | 第77-78页 |
5.1.9 免疫组化 | 第78页 |
5.1.10 流式细胞仪分析 | 第78-79页 |
5.1.11 HUVEC成管实验 | 第79页 |
5.2 结果与分析 | 第79-91页 |
5.2.1 2D-DIGE电泳结果 | 第79-81页 |
5.2.2 质谱鉴定结果 | 第81-83页 |
5.2.3 差异蛋白生物信息学分析 | 第83-85页 |
5.2.4 差异蛋白验证 | 第85-86页 |
5.2.5 S100A4功能分析 | 第86-91页 |
5.3 讨论 | 第91-92页 |
5.4 本章小结 | 第92-93页 |
第六章 全文结论 | 第93-94页 |
参考文献 | 第94-102页 |
附录 | 第102-108页 |
致谢 | 第108-109页 |
作者简历 | 第109页 |