| 摘要 | 第3-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 符号说明 | 第16-18页 |
| 第一篇 综述 | 第18-41页 |
| 第一章 禽肠道外致病性大肠杆菌病的致病机理研究进展 | 第18-41页 |
| 1 APEC的致病机理 | 第18-22页 |
| 1.1 大肠杆菌型败血症 | 第20-21页 |
| 1.2 局部性大肠杆菌病 | 第21-22页 |
| 2 肠道外致病性大肠杆菌的毒力因子 | 第22-30页 |
| 2.1 黏附素 | 第26-27页 |
| 2.2 毒素 | 第27-28页 |
| 2.3 铁摄取系统 | 第28页 |
| 2.4 保护素 | 第28-29页 |
| 2.5 侵袭素 | 第29-30页 |
| 2.6 生物膜 | 第30页 |
| 3 毒力基因的基因组定位 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-41页 |
| 第二篇 试验研究 | 第41-144页 |
| 第一章 致雏肉鸡“黑腺胃病”致病性大肠杆菌的分离鉴定 | 第41-77页 |
| 1 材料 | 第43-46页 |
| 1.1 病料 | 第43页 |
| 1.2 菌株 | 第43页 |
| 1.3 培养基 | 第43页 |
| 1.4 试剂 | 第43-44页 |
| 1.4.1 微量生化发酵管 | 第43页 |
| 1.4.2 药敏纸片 | 第43页 |
| 1.4.3 大肠杆菌0抗原诊断血清 | 第43-44页 |
| 1.4.4 主要试剂 | 第44页 |
| 1.5 主要仪器 | 第44页 |
| 1.6 实验动物 | 第44页 |
| 1.7 引物合成 | 第44-46页 |
| 2 方法 | 第46-52页 |
| 2.1 病毒分离 | 第46-47页 |
| 2.2 细菌的分离培养 | 第47页 |
| 2.3 细菌的纯化及保存 | 第47页 |
| 2.4 细菌的鉴定 | 第47页 |
| 2.5 O血清型鉴定 | 第47-48页 |
| 2.6 1 日龄SPF鸡和Cobb肉鸡致死性试验 | 第48页 |
| 2.7 组织病理学变化 | 第48页 |
| 2.8 毒力基因检测 | 第48-50页 |
| 2.9 种系发生分型 | 第50-51页 |
| 2.10 药敏试验 | 第51-52页 |
| 2.11 重金属检测 | 第52页 |
| 3 结果 | 第52-70页 |
| 3.1 病毒分离结果 | 第52页 |
| 3.2 细菌的分离和生化试验鉴定 | 第52页 |
| 3.3 0 血清型鉴定 | 第52-57页 |
| 3.4 1 日龄SPF鸡和Cobb肉鸡致死性试验 | 第57-59页 |
| 3.5 临床病死鸡及人工感染鸡病理变化 | 第59-63页 |
| 3.6 大肠杆菌分离株毒力基因的检测情况 | 第63-65页 |
| 3.8 种系发生分型 | 第65-66页 |
| 3.9 药敏试验结果 | 第66-69页 |
| 3.10 重金属检测 | 第69-70页 |
| 4 讨论 | 第70-74页 |
| 参考文献 | 第74-77页 |
| 第二章 同一个体腺胃分离株和心血分离株毒力基因及致病性比较 | 第77-95页 |
| 1 材料 | 第78-79页 |
| 1.1 菌株 | 第78页 |
| 1.2 培养基 | 第78页 |
| 1.3 试剂 | 第78页 |
| 1.4 实验动物 | 第78-79页 |
| 1.5 引物合成 | 第79页 |
| 2 方法 | 第79-83页 |
| 2.1 细菌的鉴定 | 第79页 |
| 2.2 生长曲线的测定 | 第79页 |
| 2.3 半数致死量(LD50)测定 | 第79页 |
| 2.4 体内定居与持续试验 | 第79-80页 |
| 2.5 毒力基因检测 | 第80页 |
| 2.6 种系发生分型 | 第80页 |
| 2.7 多位点序列分型(MLST) | 第80-82页 |
| 2.8 脉冲场凝胶电泳分析 | 第82-83页 |
| 3 结果 | 第83-89页 |
| 3.1 细菌的鉴定 | 第83页 |
| 3.2 生长曲线的测定 | 第83-84页 |
| 3.3 4d/9-1 O142腺胃、4d/9-1 O142心血分离株半数致死量测定结果 | 第84-85页 |
| 3.4 体内定居与持续试验 | 第85-86页 |
| 3.5 大肠杆菌分离株毒力基因的检测情况 | 第86-88页 |
| 3.6 种系发生分型 | 第88页 |
| 3.7 多位点序列分型(MLST) | 第88页 |
| 3.8 脉冲场凝胶电泳分析 | 第88-89页 |
| 4 讨论 | 第89-92页 |
| 参考文献 | 第92-95页 |
| 第三章 APEC O142腺胃分离株和心血分离株在鸡体内外的表达差异基因的筛选 | 第95-130页 |
| 1 材料 | 第97-99页 |
| 1.1 菌株 | 第97页 |
| 1.2 主要仪器与设备 | 第97-98页 |
| 1.3 主要药品及试剂 | 第98-99页 |
| 1.4 主要生物信息学软件以及数据库 | 第99页 |
| 2 方法 | 第99-105页 |
| 2.1 细菌的复苏和培养 | 第99页 |
| 2.2 大肠杆菌生化试验及溶血特性的鉴定 | 第99页 |
| 2.3 大肠杆菌O血清型的鉴定 | 第99页 |
| 2.4 SPF鸡血液中细菌的富集 | 第99-100页 |
| 2.5 细菌的体外培养 | 第100页 |
| 2.6 细菌RNA的提取 | 第100页 |
| 2.7 RNA质量检查 | 第100页 |
| 2.8 RNA纯化 | 第100-101页 |
| 2.9 反转录、标记和杂交 | 第101-103页 |
| 2.10 数据分析 | 第103-104页 |
| 2.11 qRT-PCR对芯片结果的验证 | 第104-105页 |
| 3 结果 | 第105-125页 |
| 3.1 APEC的确认 | 第105页 |
| 3.2 细菌RNA的提取 | 第105-107页 |
| 3.3 APEC 4d/9-1腺胃分离株和心血分离株在鸡体内外基因表达水平的比较 | 第107-123页 |
| 3.4 差异表达基因Gene ontology(GO)分析 | 第123-124页 |
| 3.5 qRT-PCR验证结果 | 第124-125页 |
| 4 讨论 | 第125-127页 |
| 参考文献 | 第127-130页 |
| 第四章 禽致病性大肠杆菌E491P株ompF、metF基因缺失株的构建及其生物学特性研究 | 第130-144页 |
| 1 材料 | 第131-133页 |
| 1.1 菌株和质粒 | 第131页 |
| 1.2 主要试剂 | 第131-132页 |
| 1.3 主要仪器 | 第132页 |
| 1.4 分子生物学及数据分析软件 | 第132页 |
| 1.5 试验鸡及试验鸡胚 | 第132页 |
| 1.6 引物设计 | 第132-133页 |
| 2 方法 | 第133-135页 |
| 2.1 缺失株的构建 | 第133-134页 |
| 2.2 生长曲线测定 | 第134页 |
| 2.3 血清杀菌学试验 | 第134页 |
| 2.4 1日龄鸡半数致死量(LD50)的测定 | 第134-135页 |
| 2.5 35日龄SPF鸡感染体内动态分布试验 | 第135页 |
| 2.6 组织病理学变化观察 | 第135页 |
| 3 结果 | 第135-141页 |
| 3.1 缺失株E491PΔompF和E491PΔmetF的构建及鉴定 | 第135-136页 |
| 3.2 E491P及缺失株E491PΔompF、E491PΔmetF的生长曲线 | 第136-137页 |
| 3.3 SPF鸡血清杀菌试验结果 | 第137页 |
| 3.4 LD_(50)测定结果 | 第137页 |
| 3.5 35日龄SPF鸡体内动态分布试验结果 | 第137-139页 |
| 3.7 组织病理学变化 | 第139-141页 |
| 4 讨论 | 第141-142页 |
| 参考文献 | 第142-144页 |
| 全文总结 | 第144-145页 |
| 致谢 | 第145-146页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第146-147页 |
