| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第7-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-17页 |
| 1 NLRC5的研究进展 | 第11-13页 |
| 1.1 NLR蛋白家族 | 第11页 |
| 1.2 NLRC5的分子结构 | 第11-12页 |
| 1.3 NLRC5的表达 | 第12页 |
| 1.4 NLRC5的功能 | 第12-13页 |
| 1.5 NLRC5在鸡上的研究 | 第13页 |
| 2 真核生物基因的表达调控 | 第13-14页 |
| 3 启动子研究 | 第14-16页 |
| 3.1 启动子的结构特点 | 第14-15页 |
| 3.2 启动子结构的研究方法 | 第15页 |
| 3.3 启动子功能的研究方法 | 第15-16页 |
| 4 本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 第二章 NLRC5在细胞中的表达和启动子核心区域的确定 | 第17-26页 |
| 1 实验材料 | 第17页 |
| 1.1 实验动物和细胞系 | 第17页 |
| 1.2 主要试剂 | 第17页 |
| 1.3 主要仪器 | 第17页 |
| 2 实验方法 | 第17-22页 |
| 2.1 RT-qPCR检测NLRC5在不同细胞中的表达 | 第17-18页 |
| 2.2 NLRC5启动子区系列缺失载体的构建 | 第18-21页 |
| 2.3 细胞培养和瞬时转染 | 第21-22页 |
| 2.4 双荧光素酶活性检测 | 第22页 |
| 2.5 数据分析 | 第22页 |
| 3 实验结果 | 第22-24页 |
| 3.1 不同细胞中NLRC5 mRNA的表达 | 第22-23页 |
| 3.2 鸡NLRC5启动子区系列缺失载体的酶切鉴定 | 第23页 |
| 3.3 系列缺失载体双荧光素酶活性检测结果 | 第23-24页 |
| 4 讨论 | 第24-26页 |
| 第三章 鸡NLRC5启动子核心区域转录因子鉴定 | 第26-41页 |
| 1 实验材料 | 第26页 |
| 1.1 细胞系 | 第26页 |
| 1.2 主要试剂 | 第26页 |
| 1.3 主要仪器 | 第26页 |
| 2 实验方法 | 第26-30页 |
| 2.1 转录因子预测 | 第26页 |
| 2.2 启动子结合转录因子实验 | 第26-28页 |
| 2.3 转录因子结合位点定点突变载体构建及活性检测 | 第28页 |
| 2.4 凝胶迁移实验(EMSA) | 第28-30页 |
| 2.5 生物信息学分析和数据处理 | 第30页 |
| 3 实验结果 | 第30-39页 |
| 3.1 NLRC5启动子区转录因子预测 | 第30-35页 |
| 3.2 NLRC5启动子核心区域结合的转录因子初步验证 | 第35页 |
| 3.3 NLRC5核心启动子区转录因子STAT1结合位点验证 | 第35-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 鸡NLRC5启动子区甲基化和SNP检测 | 第41-57页 |
| 1 实验材料 | 第41页 |
| 1.1 实验动物及细胞 | 第41页 |
| 1.2 主要试剂 | 第41页 |
| 1.3 主要仪器 | 第41页 |
| 2 实验方法 | 第41-44页 |
| 2.1 基因组DNA提取 | 第41页 |
| 2.2 亚硫酸氢盐测序法(BSP)检测NLRC5启动子甲基化 | 第41-42页 |
| 2.3 NLRC5核心启动子区SNP对其活性的影响 | 第42-44页 |
| 2.4 数据分析 | 第44页 |
| 3 实验结果 | 第44-54页 |
| 3.1 NLRC5启动子区CpG岛预测及甲基化检测 | 第44-46页 |
| 3.2 NLRC5启动子区SNP分析 | 第46-47页 |
| 3.3 NLRC5核心启动子区SNP对转录活性的影响 | 第47-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| 4.1 NLRC5启动子区甲基化对表达的影响 | 第54页 |
| 4.2 NLRC5启动子区SNP对活性的影响 | 第54-57页 |
| 全文结论 | 第57页 |
| 主要创新点 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读学位期间发表学术论文目录 | 第66-67页 |
