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球孢白僵菌脯氨酸脱氢酶的生物学功能及多蛋白桥联因子1介导菌体氧化耐受力的初步机制

致谢第7-10页
摘要第10-12页
第1章 文献综述第12-19页
    1.1 球孢白僵菌研究现状第12-13页
    1.2 真菌中脯氨酸脱氢酶的研究现状第13-16页
        1.2.1 脯氨酸的生物学功能第13-14页
        1.2.2 脯氨酸的吸收和转运第14-15页
        1.2.3 脯氨酸代谢和功能第15-16页
    1.3 丝状真菌中MBF的研究现状第16-18页
    1.4 研究目的和意义第18-19页
第2章 鉴定四个脯氨酸脱氢酶在球孢白僵菌中的功能第19-38页
    2.1 材料第19-20页
        2.1.1 菌株及培养条件第19-20页
        2.1.2 试剂及试剂盒第20页
    2.2 方法第20-27页
        2.2.1 真菌核酸提取第20-21页
        2.2.2 球孢白僵菌脯氨酸脱氢酶基因克隆、序列分析及其胞内定位第21-23页
        2.2.3 PDH家族单基因敲除/回补菌株的构建与鉴定第23页
        2.2.4 表型分析第23-27页
        2.2.5 真菌毒力测定第27页
    2.3 实验结果第27-35页
        2.3.1 球孢白僵菌与其他真菌中PDH同源蛋白的比较第27页
        2.3.2 球孢白僵菌BbPDH1~4p细胞定位及其缺失菌株构建第27-29页
        2.3.3 碳氮源及温度胁迫对生长的影响第29-32页
        2.3.4 基因敲除对菌株分生孢子和芽生孢子产生的影响第32-33页
        2.3.5 基因敲除对孢子活力的影响第33-34页
        2.3.6 毒力测定第34-35页
    2.4 结果讨论第35-38页
第3章 BbMBF1参与调控抗氧化路径的功能研究第38-53页
    3.1 材料第38-39页
        3.1.1 菌株和培养条件第38页
        3.1.2 试剂和试剂盒第38-39页
    3.2 实验方法第39-44页
        3.2.1 氧化胁迫下菌株生长速率测定第39页
        3.2.2 qRT-PCR分析BbMBF1在胁迫下的表达情况第39页
        3.2.3 BbMBF1调节的基因表达RNA-seq分析第39-40页
        3.2.4 潜在的转录因子结合位点的生物信息学分析第40页
        3.2.5 与BbMBF1p互作的转录因子的获得第40-43页
        3.2.6 表型验证第43-44页
    3.3 实验结果第44-50页
        3.3.1 BbMBF1在真菌对甲萘醌胁迫的响应中发挥作用第44-45页
        3.3.2 通过RNA测序进行整体表达分析第45-46页
        3.3.3 一个假定的转录因子结合元件的鉴定第46-47页
        3.3.4 质谱分析与BbMBF1p互作的潜在转录因子第47-49页
        3.3.5 BbAP-1参与球孢白僵菌对氧化胁迫的响应第49-50页
    3.4 结果讨论第50-53页
结语第53-54页
附图表第54-62页
参考文献第62-70页
Summary第70-71页
附录:攻读硕士学位期间的主要成果第72页

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