致谢 | 第7-10页 |
摘要 | 第10-12页 |
第1章 文献综述 | 第12-19页 |
1.1 球孢白僵菌研究现状 | 第12-13页 |
1.2 真菌中脯氨酸脱氢酶的研究现状 | 第13-16页 |
1.2.1 脯氨酸的生物学功能 | 第13-14页 |
1.2.2 脯氨酸的吸收和转运 | 第14-15页 |
1.2.3 脯氨酸代谢和功能 | 第15-16页 |
1.3 丝状真菌中MBF的研究现状 | 第16-18页 |
1.4 研究目的和意义 | 第18-19页 |
第2章 鉴定四个脯氨酸脱氢酶在球孢白僵菌中的功能 | 第19-38页 |
2.1 材料 | 第19-20页 |
2.1.1 菌株及培养条件 | 第19-20页 |
2.1.2 试剂及试剂盒 | 第20页 |
2.2 方法 | 第20-27页 |
2.2.1 真菌核酸提取 | 第20-21页 |
2.2.2 球孢白僵菌脯氨酸脱氢酶基因克隆、序列分析及其胞内定位 | 第21-23页 |
2.2.3 PDH家族单基因敲除/回补菌株的构建与鉴定 | 第23页 |
2.2.4 表型分析 | 第23-27页 |
2.2.5 真菌毒力测定 | 第27页 |
2.3 实验结果 | 第27-35页 |
2.3.1 球孢白僵菌与其他真菌中PDH同源蛋白的比较 | 第27页 |
2.3.2 球孢白僵菌BbPDH1~4p细胞定位及其缺失菌株构建 | 第27-29页 |
2.3.3 碳氮源及温度胁迫对生长的影响 | 第29-32页 |
2.3.4 基因敲除对菌株分生孢子和芽生孢子产生的影响 | 第32-33页 |
2.3.5 基因敲除对孢子活力的影响 | 第33-34页 |
2.3.6 毒力测定 | 第34-35页 |
2.4 结果讨论 | 第35-38页 |
第3章 BbMBF1参与调控抗氧化路径的功能研究 | 第38-53页 |
3.1 材料 | 第38-39页 |
3.1.1 菌株和培养条件 | 第38页 |
3.1.2 试剂和试剂盒 | 第38-39页 |
3.2 实验方法 | 第39-44页 |
3.2.1 氧化胁迫下菌株生长速率测定 | 第39页 |
3.2.2 qRT-PCR分析BbMBF1在胁迫下的表达情况 | 第39页 |
3.2.3 BbMBF1调节的基因表达RNA-seq分析 | 第39-40页 |
3.2.4 潜在的转录因子结合位点的生物信息学分析 | 第40页 |
3.2.5 与BbMBF1p互作的转录因子的获得 | 第40-43页 |
3.2.6 表型验证 | 第43-44页 |
3.3 实验结果 | 第44-50页 |
3.3.1 BbMBF1在真菌对甲萘醌胁迫的响应中发挥作用 | 第44-45页 |
3.3.2 通过RNA测序进行整体表达分析 | 第45-46页 |
3.3.3 一个假定的转录因子结合元件的鉴定 | 第46-47页 |
3.3.4 质谱分析与BbMBF1p互作的潜在转录因子 | 第47-49页 |
3.3.5 BbAP-1参与球孢白僵菌对氧化胁迫的响应 | 第49-50页 |
3.4 结果讨论 | 第50-53页 |
结语 | 第53-54页 |
附图表 | 第54-62页 |
参考文献 | 第62-70页 |
Summary | 第70-71页 |
附录:攻读硕士学位期间的主要成果 | 第72页 |