摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
第一章 绪论 | 第11-20页 |
1.1 研究背景 | 第11-18页 |
1.1.1 乳腺癌与化疗耐药 | 第11页 |
1.1.2 肿瘤耐药的机制 | 第11-13页 |
1.1.3 自噬在肿瘤治疗中的双重作用 | 第13-15页 |
1.1.4 中介体复合物与肿瘤 | 第15-18页 |
1.2 研究意义 | 第18页 |
1.3 研究内容 | 第18-20页 |
第二章 ADM耐药细胞Med19高表达并具有高自噬水平 | 第20-37页 |
2.1 实验材料 | 第20-23页 |
2.1.1 实验乳腺癌细胞及组织 | 第20页 |
2.1.2 实验试剂 | 第20-21页 |
2.1.3 实验仪器及耗材 | 第21页 |
2.1.4 试剂配制 | 第21-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-29页 |
2.2.1 细胞培养 | 第23-25页 |
2.2.2 耐药细胞的诱导 | 第25页 |
2.2.3 CCK8实验 | 第25页 |
2.2.4 qRT-PCR检测 | 第25-27页 |
2.2.5 Western Blot检测 | 第27-29页 |
2.2.6 细胞免疫荧光实验 | 第29页 |
2.2.7 统计分析 | 第29页 |
2.3 结果与讨论 | 第29-35页 |
2.3.1 MCF-7/ADM细胞具有药物耐药性 | 第29-30页 |
2.3.2 MCF-7/ADM细胞MDR1高表达 | 第30-31页 |
2.3.3 Med19在ADM耐药细胞中呈高表达 | 第31-32页 |
2.3.4 ADM耐药细胞与亲本细胞自噬水平差异 | 第32页 |
2.3.5 NACT病人组织中Med19及自噬水平显著增高 | 第32-33页 |
2.3.6 ADM激活MCF-7/ADM和MCF-7 细胞的自噬水平 | 第33-34页 |
2.3.7 抑制自噬增加药物敏感性 | 第34-35页 |
2.4 本章小结 | 第35-37页 |
第三章 Med19通过自噬影响化疗敏感性 | 第37-48页 |
3.1 实验材料 | 第37-38页 |
3.1.1 实验细胞株 | 第37页 |
3.1.2 实验试剂 | 第37-38页 |
3.1.3 实验仪器及耗材 | 第38页 |
3.1.4 试剂配制 | 第38页 |
3.2 实验方法 | 第38-40页 |
3.2.1 细胞培养 | 第38页 |
3.2.2 Med19低表达稳定株的构建及培养 | 第38-39页 |
3.2.3 qRT-PCR检测 | 第39页 |
3.2.4 Western blot检测 | 第39页 |
3.2.5 CCK8实验 | 第39页 |
3.2.6 克隆形成实验 | 第39-40页 |
3.2.7 细胞免疫荧光实验 | 第40页 |
3.2.8 统计分析 | 第40页 |
3.3 结果与讨论 | 第40-47页 |
3.3.1 Med19低表达稳定株的构建 | 第40-41页 |
3.3.2 Med19敲减抑制自噬相关基因mRNA表达 | 第41-42页 |
3.3.3 Med19敲减影响自噬相关基因蛋白表达 | 第42页 |
3.3.4 Med19敲减对MCF-7 细胞药物处理前后自噬的影响 | 第42-43页 |
3.3.5 Med19敲减对MCF-7/ADM细胞药物处理前后自噬的影响 | 第43-44页 |
3.3.6 Med19敲减增加MCF-7 对细胞多种化疗药物的敏感性 | 第44-45页 |
3.3.7 Med19敲减改善耐药的MCF-7/ADM对多种化疗药物的敏感性 | 第45-46页 |
3.3.8 自噬参与Med19对化疗敏感性的影响 | 第46-47页 |
3.4 本章小结 | 第47-48页 |
第四章 Med19介导自噬影响化疗耐药的机制探究 | 第48-58页 |
4.1 实验材料 | 第48-49页 |
4.1.1 实验细胞株 | 第48页 |
4.1.2 实验试剂 | 第48-49页 |
4.1.3 实验仪器及耗材 | 第49页 |
4.1.4 试剂配制 | 第49页 |
4.2 实验方法 | 第49-51页 |
4.2.1 细胞培养 | 第49页 |
4.2.2 HMGB1敲减细胞株构建 | 第49-50页 |
4.2.3 HMGB1过表达细胞株构建 | 第50页 |
4.2.4 qRT-PCR检测 | 第50-51页 |
4.2.5 Western blot检测 | 第51页 |
4.2.6 CCK8实验 | 第51页 |
4.2.7 统计分析 | 第51页 |
4.3 结果与讨论 | 第51-57页 |
4.3.1 Med19敲减抑制HMGB1的表达 | 第51-52页 |
4.3.2 HMGB1敲减对细胞自噬的影响 | 第52-54页 |
4.3.3 HMGB1过表达对细胞自噬的影响 | 第54-55页 |
4.3.4 HMGB1敲减对乳腺癌细胞药物敏感性的影响 | 第55-56页 |
4.3.5 HMGB1过表达对乳腺癌细胞药物敏感性的影响 | 第56-57页 |
4.4 本章小结 | 第57-58页 |
第五章 主要结论与展望 | 第58-59页 |
5.1 主要结论 | 第58页 |
5.2 展望 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第68页 |