| 缩略词 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-17页 |
| 1.1 β-葡萄糖苷酶概述 | 第11-13页 |
| 1.1.1 β-葡萄糖苷酶的定义 | 第11页 |
| 1.1.2 β-葡萄糖苷酶的分类 | 第11页 |
| 1.1.3 β-葡萄糖苷酶的催化机制 | 第11-12页 |
| 1.1.4 β-葡萄糖苷酶的结构 | 第12页 |
| 1.1.5 β-葡萄糖苷酶的理化性质 | 第12页 |
| 1.1.6 β-葡萄糖苷酶的分子生物学性质 | 第12-13页 |
| 1.1.7 β-葡萄糖苷酶的应用 | 第13页 |
| 1.2 黑曲霉表达系统 | 第13-15页 |
| 1.2.1 丝状真菌和其它表达系统的比较 | 第13页 |
| 1.2.2 黑曲霉表达系统的优点 | 第13-14页 |
| 1.2.3 黑曲霉表达系统的缺点 | 第14页 |
| 1.2.4 提高黑曲霉外源基因高效表达的方法 | 第14-15页 |
| 1.3 本论文的目的及意义 | 第15-16页 |
| 1.4 研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 黑曲霉 3.213 产酶曲线的测定 | 第17-24页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第17-19页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.2 实验仪器与设备 | 第18-19页 |
| 2.2 试验方法 | 第19-21页 |
| 2.2.1 培养方法 | 第19页 |
| 2.2.2 葡萄糖标准曲线测定 | 第19-20页 |
| 2.2.3 β-葡萄糖苷酶活力测定 | 第20页 |
| 2.2.4 蛋白质标准曲线测定 | 第20-21页 |
| 2.2.5 蛋白质含量的测定 | 第21页 |
| 2.2.6 黑曲霉 3.213 产酶曲线的测定 | 第21页 |
| 2.3 结果与分析 | 第21-24页 |
| 2.3.1 葡萄糖标准曲线 | 第21-22页 |
| 2.3.2 蛋白质标准曲线 | 第22页 |
| 2.3.3 产酶曲线 | 第22-24页 |
| 第三章 黑曲霉 3.213bgl基因的克隆与序列分析 | 第24-37页 |
| 3.1 前言 | 第24页 |
| 3.2 试验设计 | 第24-28页 |
| 3.2.1 黑曲霉 3.213 的菌丝体制备 | 第24-25页 |
| 3.2.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第25页 |
| 3.2.3 黑曲霉 3.213 的DNA提取 | 第25-26页 |
| 3.2.4 引物设计 | 第26-27页 |
| 3.2.5 PCR扩增 | 第27-28页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第28-36页 |
| 3.3.1 基因组DNA的提取 | 第28页 |
| 3.3.2 目的基因扩增 | 第28-29页 |
| 3.3.3 序列分析 | 第29-31页 |
| 3.3.4 多重序列比对结果图 | 第31-36页 |
| 3.4 本章小结 | 第36-37页 |
| 第四章 目的基因敲除与表达载体的构建 | 第37-47页 |
| 4.1 材料与方法 | 第37页 |
| 4.1.1 菌种 | 第37页 |
| 4.1.2 试剂和仪器 | 第37页 |
| 4.2 试验方法 | 第37-42页 |
| 4.2.1 PCR回收 | 第37-38页 |
| 4.2.2 运用三段式PCR方法将目的基因消除 | 第38页 |
| 4.2.3 同源重组基因敲除 | 第38页 |
| 4.2.4 对目的基因的PCR引物设计与序列扩增 | 第38-39页 |
| 4.2.5 表达载体的构建 | 第39页 |
| 4.2.6 PCR引物设计 | 第39-40页 |
| 4.2.7 PCR反应体系 | 第40-42页 |
| 4.2.8 转化大肠杆菌感受态细胞DH5α | 第42页 |
| 4.2.9 小量提取质粒 | 第42页 |
| 4.3 结果与分析 | 第42-45页 |
| 4.3.1 三段式PCR检测结果 | 第42-43页 |
| 4.3.2 PCR检测结果 | 第43-44页 |
| 4.3.3 同源重组电泳结果 | 第44-45页 |
| 4.4 本章小结 | 第45-47页 |
| 第五章 构建高效表达异源β-葡萄糖苷酶的黑曲霉菌株 | 第47-51页 |
| 5.1 前言 | 第47页 |
| 5.2 材料与方法 | 第47-48页 |
| 5.2.1 试剂和仪器 | 第47页 |
| 5.2.2 培养基 | 第47-48页 |
| 5.2.3 试验方法 | 第48页 |
| 5.3 结果与分析 | 第48-50页 |
| 5.3.1 转化子基因组PCR鉴定结果 | 第48-49页 |
| 5.3.2 转化后的黑曲霉 3.213 的产酶标准曲线 | 第49-50页 |
| 5.4 本章小结 | 第50-51页 |
| 第六章 结果与讨论 | 第51-53页 |
| 6.1 结果 | 第51-52页 |
| 6.2 讨论与展望 | 第52页 |
| 6.3 创新 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
