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立体选择性氧化还原酶催化性能分析及其耦联催化去消旋手性醇的研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 绪论第10-20页
    1.1 手性和手性化合物第10页
    1.2 生物催化去消旋和不对称还原第10-13页
        1.2.1 生物催化去消旋途径第11-12页
        1.2.2 生物催化不对称还原途径第12-13页
    1.3 生物法去消旋和不对称还原中的几个共性关键问题第13-15页
        1.3.1 具有工业应用潜力的生物催化剂第13-14页
        1.3.2 催化剂类型第14页
        1.3.3 辅酶循环第14-15页
    1.4 生物催化合成光学纯环烃类手性醇第15-18页
        1.4.1 光学醇苯基乙二醇的生物催化不对称合成第15-17页
        1.4.2 度洛西汀中间体的生物催化不对称合成第17-18页
    1.5 论文的研究意义和内容第18-20页
第二章 实验材料与方法第20-28页
    2.1 实验材料第20-22页
        2.1.1 菌株第20页
        2.1.2 培养基和缓冲液第20-21页
        2.1.3 主要试剂第21-22页
        2.1.4 实验仪器第22页
    2.2 实验方法第22-28页
        2.2.1 氧化还原酶基因表达第22-23页
        2.2.2 重组氧化还原酶不对称催化性能的系统分析第23-24页
        2.2.3 以(R,S)-PED为模式底物构建去消旋体系第24-26页
        2.2.4 (R,S)-DHTP去消旋获得(S)-DHTP的体系构建第26-28页
第三章 结果与讨论第28-53页
    3.1 立体选择性氧化还原酶工具箱的构建第28-31页
        3.1.1 重组蛋白的诱导表达第28-30页
        3.1.2 重组蛋白纯化第30-31页
    3.2 重组氧化还原酶不对称催化性能的系统分析第31-36页
        3.2.1 重组酶的底物特异性第31-35页
        3.2.2 重组酶的动力学性质研究第35页
        3.2.3 重组酶的立体选择性第35-36页
    3.3 以(R,S)-PED为模式底物构建去消旋体系第36-44页
        3.3.1 立体选择性氧化还原酶耦联催化(R,S)-PED的去消旋体系第36页
        3.3.2 不对称还原 2-HAP合成(R)-PED的重组酶筛选第36-37页
        3.3.3 氧化(S)-PED生产HAP的重组酶筛选第37-38页
        3.3.4 反应pH对纯酶反应的影响第38-39页
        3.3.5 反应温度对纯酶反应的影响第39-40页
        3.3.6 金属离子对纯酶反应的影响第40页
        3.3.7 纯酶添加比例对去消旋反应的影响第40-41页
        3.3.8 辅酶添加比例对去消旋反应的影响第41-42页
        3.3.9 底物浓度对去消旋反应的影响第42-43页
        3.3.10 反应时间对去消旋反应的影响第43-44页
    3.4 (R,S)-DHTP去消旋获得(S)-DHTP的体系构建第44-53页
        3.4.1 立体选择性氧化还原酶耦联催化(R,S)-DHTP的去消旋体系第44页
        3.4.2 不对称还原DKTP合成(S)-DHTP的重组酶筛选第44-45页
        3.4.3 氧化(R)-DHTP生产DKTP的重组酶筛选第45-46页
        3.4.4 反应pH对纯酶反应的影响第46-47页
        3.4.5 反应温度对纯酶反应的影响第47-49页
        3.4.6 金属离子对纯酶反应的影响第49页
        3.4.7 纯酶添加比例对去消旋反应的影响第49-50页
        3.4.8 辅酶添加比例对去消旋反应的影响第50-51页
        3.4.9 底物浓度对去消旋反应的影响第51-52页
        3.4.10 反应时间对去消旋反应的影响第52-53页
主要结论及展望第53-55页
致谢第55-56页
参考文献第56-61页
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第61页

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