摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 绪论 | 第9-18页 |
1.1 葡聚糖蔗糖酶 | 第9-14页 |
1.1.1 葡聚糖蔗糖酶简介 | 第9页 |
1.1.2 葡聚糖蔗糖酶的结构 | 第9-10页 |
1.1.3 葡聚糖蔗糖酶的催化机制 | 第10-11页 |
1.1.4 葡聚糖蔗糖酶的催化反应 | 第11-13页 |
1.1.5 源于罗伊氏乳杆菌的葡聚糖蔗糖酶 | 第13-14页 |
1.2 功能性低聚糖 | 第14-16页 |
1.2.1 功能性低聚糖的来源 | 第14-15页 |
1.2.2 功能性低聚糖的研究进展 | 第15-16页 |
1.2.3 功能性低聚糖的应用 | 第16页 |
1.3 课题的研究背景及意义 | 第16-17页 |
1.4 课题的主要研究内容 | 第17-18页 |
2 实验材料和方法 | 第18-27页 |
2.1 实验材料与仪器 | 第18页 |
2.1.1 菌株来源 | 第18页 |
2.1.2 主要试剂 | 第18页 |
2.1.3 实验仪器 | 第18页 |
2.2 实验方法 | 第18-27页 |
2.2.1 葡聚糖蔗糖酶的提取 | 第18-20页 |
2.2.2 葡聚糖蔗糖酶的分离与纯化 | 第20-21页 |
2.2.3 葡聚糖蔗糖酶的酶学性质研究 | 第21-22页 |
2.2.4 葡聚糖蔗糖酶的受体反应 | 第22-23页 |
2.2.5 产物低聚糖的结构鉴定 | 第23-24页 |
2.2.6 葡聚糖蔗糖酶受体反应的动力学模型构建 | 第24-25页 |
2.2.7 产物低聚糖的肠道益生功能评价 | 第25-27页 |
3 结果与讨论 | 第27-49页 |
3.1 葡聚糖蔗糖酶的纯化 | 第27-30页 |
3.1.1 粗酶液的提取 | 第27页 |
3.1.2 DEAE-FF离子交换层析 | 第27-28页 |
3.1.3 Sepharose CL-6B凝胶层析 | 第28页 |
3.1.4 Superdex 200凝胶色谱测定相对分子质量 | 第28-29页 |
3.1.5 SDS-PAGE电泳鉴定及纯化结果 | 第29-30页 |
3.2 葡聚糖蔗糖酶的酶学性质 | 第30-34页 |
3.2.1 温度对酶活及其稳定性的影响 | 第30-31页 |
3.2.2 pH对酶活及其稳定性的影响 | 第31-32页 |
3.2.3 金属离子对酶活的影响 | 第32-33页 |
3.2.4 葡聚糖蔗糖酶的底物特异性 | 第33-34页 |
3.2.5 酶反应动力学常数的研究 | 第34页 |
3.3 葡聚糖蔗糖酶受体反应的产物分析 | 第34-39页 |
3.3.1 薄层层析分析 | 第34-35页 |
3.3.2 高效液相分析 | 第35-36页 |
3.3.3 液质联用分析 | 第36-37页 |
3.3.4 酶法合成低聚糖的条件优化 | 第37-39页 |
3.4 产物低聚糖的结构鉴定 | 第39-44页 |
3.4.1 低聚糖的分离纯化 | 第39页 |
3.4.2 低聚糖的核磁共振分析 | 第39-43页 |
3.4.3 低聚糖的结构总结 | 第43-44页 |
3.5 葡聚糖蔗糖酶受体反应的动力学模型 | 第44-45页 |
3.6 产物低聚糖的功能性评价 | 第45-49页 |
3.6.1 低聚糖对肠道细菌OD_(600)和pH的影响 | 第45-47页 |
3.6.2 低聚糖对生成SCFA的影响 | 第47-49页 |
主要结论与展望 | 第49-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
附录A | 第59-61页 |
附录B:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第61页 |