| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-23页 |
| 1.1 聚羟基脂肪酸酯（PHA）的概述 | 第9-11页 |
| 1.1.1 聚羟基脂肪酸酯的组成和分类 | 第9-10页 |
| 1.1.2 聚羟基脂肪酸酯的性质和应用前景 | 第10-11页 |
| 1.2 聚羟基脂肪酸酯的生物合成 | 第11-13页 |
| 1.2.1 由乙酰辅酶A合成PHA的途径 | 第12页 |
| 1.2.2 由脂肪酸β-氧化途径合成PHA的途径 | 第12-13页 |
| 1.2.3 由脂肪酸从头合成途径合成PHA的途径 | 第13页 |
| 1.3 代谢工程在聚羟基脂肪酸酯生物合成中的应用 | 第13-19页 |
| 1.3.1 氧化还原辅因子代谢工程 | 第13-15页 |
| 1.3.2 利用非相关碳源合成聚羟基脂肪酸酯 | 第15-19页 |
| 1.4 选题背景和研究内容 | 第19-23页 |
| 1.4.1 PHB的国内外研究状况 | 第20页 |
| 1.4.2 PHB的应用前景 | 第20-21页 |
| 1.4.3 本课题主要研究内容 | 第21-23页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第23-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-27页 |
| 2.1.1 实验菌种和质粒 | 第23-24页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第24页 |
| 2.1.3 实验药品 | 第24-25页 |
| 2.1.4 培养基 | 第25页 |
| 2.1.5 溶液 | 第25-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-38页 |
| 2.2.1 引物设计和基因测序 | 第27页 |
| 2.2.2 PCR反应 | 第27-29页 |
| 2.2.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第29页 |
| 2.2.4 DNA片段切胶回收 | 第29-30页 |
| 2.2.5 PCR产物的纯化 | 第30页 |
| 2.2.6 DNA的酶切、去磷酸化和连接 | 第30-31页 |
| 2.2.7 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第31-32页 |
| 2.2.8 大肠杆菌质粒的提取方法（碱裂解法） | 第32页 |
| 2.2.9 大肠杆菌基因组的提取 | 第32-33页 |
| 2.2.10 菌株的培养及发酵 | 第33页 |
| 2.2.11 葡萄糖的测定 | 第33页 |
| 2.2.12 木聚糖的酸水解 | 第33页 |
| 2.2.13 DNS法测定还原糖 | 第33-34页 |
| 2.2.14 RT-PCR | 第34-35页 |
| 2.2.15 大肠杆菌基因的敲除 | 第35-36页 |
| 2.2.16 PHB的检测方法 | 第36-37页 |
| 2.2.17 胞内代谢物的提取 | 第37-38页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第38-70页 |
| 3.1 E. coli JM109呼吸链改造 | 第39-51页 |
| 3.1.1 cydB基因敲除 | 第39-41页 |
| 3.1.2 appB基因敲除 | 第41-43页 |
| 3.1.3 ndh基因敲除 | 第43-45页 |
| 3.1.4 组合基因的敲除 | 第45-46页 |
| 3.1.5 工程菌株发酵结果 | 第46-49页 |
| 3.1.6 胞内代谢物的检测 | 第49-51页 |
| 3.2 葡萄糖与木糖共利用合成PHB | 第51-61页 |
| 3.2.1 异源基因xylA、xylB和araE的引入 | 第51-58页 |
| 3.2.2 基因工程菌株的发酵表征 | 第58-61页 |
| 3.3 利用木聚糖合成PHB | 第61-70页 |
| 3.3.1 工程菌株利用木聚糖合成PHB的发酵表征 | 第62-64页 |
| 3.3.2 talA基因的过表达及工程菌株的发酵表征 | 第64-66页 |
| 3.3.3 工程菌株的发酵表征 | 第66-70页 |
| 第四章 结论与展望 | 第70-73页 |
| 4.1 实验结论 | 第70-71页 |
| 4.2 展望 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-78页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
