| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第13-33页 |
| 1.1 海洋天然产物研究现状 | 第13-14页 |
| 1.2 Chaetominine的研究现状 | 第14-16页 |
| 1.3 抗肿瘤调控机制的分子基础 | 第16-27页 |
| 1.3.1 诱导细胞凋亡的分子机制 | 第16-19页 |
| 1.3.2 调控细胞周期的分子基础 | 第19-24页 |
| 1.3.3 逆转多药耐药的调控机制 | 第24-27页 |
| 1.4 细胞与分子生物学在肿瘤治疗中的应用 | 第27-28页 |
| 1.5 抗肿瘤药理学研究方法 | 第28-31页 |
| 1.5.1 细胞及分子水平的研究方法 | 第28-29页 |
| 1.5.2 蛋白质水平的研究方法 | 第29-31页 |
| 1.5.3 基因水平的研究方法 | 第31页 |
| 1.6 研究目标、意义和研究内容 | 第31-33页 |
| 1.6.1 研究目标和意义 | 第31-32页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第32-33页 |
| 第2章 CHA的敏感肿瘤细胞系筛选 | 第33-42页 |
| 2.1 前言 | 第33页 |
| 2.2 材料与方法 | 第33-37页 |
| 2.2.1 细胞株与供试品 | 第33-34页 |
| 2.2.2 试剂与仪器 | 第34-35页 |
| 2.2.3 细胞培养 | 第35-36页 |
| 2.2.4 MTT法检测CHA的细胞毒性 | 第36-37页 |
| 2.2.5 数据分析 | 第37页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第37-40页 |
| 2.3.1 CHA的敏感肿瘤细胞系筛选 | 第37-39页 |
| 2.3.2 CHA对正常HPBMC细胞的毒性 | 第39-40页 |
| 2.4 本章小结 | 第40-42页 |
| 第3章 CHA诱导白血病细胞K562凋亡的作用及机理 | 第42-63页 |
| 3.1 前言 | 第42页 |
| 3.2 材料与方法 | 第42-51页 |
| 3.2.1 细胞株与供试品 | 第42-43页 |
| 3.2.2 试剂与仪器 | 第43-44页 |
| 3.2.3 Hoechst 33258荧光染色观察CHA引起的K562细胞核形态变化 | 第44-45页 |
| 3.2.4 Annexin V FITC/PI检测CHA引起的K562细胞凋亡率 | 第45页 |
| 3.2.5 核酸电泳检测CHA引起的K562细胞DNA片段化 | 第45-46页 |
| 3.2.6 流式检测CHA引起的K562细胞线粒体膜电位变化 | 第46-47页 |
| 3.2.7 CHA引起的K562细胞凋亡蛋白酶的活性变化 | 第47-49页 |
| 3.2.8 Western blot法检测CHA对K562细胞凋亡相关蛋白的影响 | 第49-51页 |
| 3.2.9 数据分析 | 第51页 |
| 3.3 结果 | 第51-61页 |
| 3.3.1 CHA对K562细胞形态变化的影响 | 第51-52页 |
| 3.3.2 CHA对K562细胞凋亡率的影响 | 第52-53页 |
| 3.3.3 CHA诱导K562细胞DNA片段化 | 第53-54页 |
| 3.3.4 CHA对K562细胞线粒体膜电位的影响 | 第54-56页 |
| 3.3.5 CHA对K562细胞凋亡蛋白酶caspase活性的影响 | 第56-57页 |
| 3.3.6 CHA对K562细胞凋亡相关蛋白表达的影响 | 第57-61页 |
| 3.4 讨论 | 第61-62页 |
| 3.5 本章小结 | 第62-63页 |
| 第4章 CHA对K562细胞周期进程的影响及调控 | 第63-78页 |
| 4.1 前言 | 第63页 |
| 4.2 材料与方法 | 第63-69页 |
| 4.2.1 细胞株与供试品 | 第63-64页 |
| 4.2.2 试剂与仪器 | 第64-65页 |
| 4.2.3 流式检测CHA对K562细胞周期的影响 | 第65-66页 |
| 4.2.4 RT-PCR检测CHA对cyclin/CDK基因转录的影响 | 第66-68页 |
| 4.2.5 Western-blot检测CHA对细胞周期调控蛋白表达的影响 | 第68-69页 |
| 4.2.6 数据分析 | 第69页 |
| 4.3 结果 | 第69-75页 |
| 4.3.1 CHA对K562细胞周期进程的影响 | 第69-70页 |
| 4.3.2 CHA对K562细胞中cyclin/CDK的mRNA水平影响 | 第70-71页 |
| 4.3.3 CHA对K562细胞中cyclin A/CDK2蛋白表达的影响 | 第71-72页 |
| 4.3.4 CHA对K562细胞中ATM/p-ATM蛋白表达的影响 | 第72-73页 |
| 4.3.5 CHA对K562细胞中ATR/p-ATR蛋白表达的影响 | 第73-74页 |
| 4.3.6 CHA对K562细胞中Chk1/Chk2/Cdc25A蛋白表达的影响 | 第74-75页 |
| 4.4 讨论 | 第75-76页 |
| 4.5 本章小结 | 第76-78页 |
| 第5章 CHA对人白血病耐阿霉素细胞K562/Adr的作用及机制 | 第78-100页 |
| 5.1 前言 | 第78-79页 |
| 5.2 材料与方法 | 第79-86页 |
| 5.2.1 细胞株与供试品 | 第79页 |
| 5.2.2 试剂与仪器 | 第79-81页 |
| 5.2.3 MTT法检测CHA与ADR对细胞的毒性 | 第81页 |
| 5.2.4 Hoechst 33258荧光染色观察CHA引起的K562/Adr细胞核的变化 | 第81-82页 |
| 5.2.5 Annexin V FITC/PI检测CHA与ADR诱导K562/Adr细胞凋亡的作用 | 第82页 |
| 5.2.6 CHA对K562/Adr细胞中ROS水平的影响 | 第82页 |
| 5.2.7 流式荧光检测CHA对K562/Adr胞内ADR积累的影响 | 第82页 |
| 5.2.8 荧光定量PCR检测CHA对MRP1和MDR1基因转录水平的影响 | 第82-84页 |
| 5.2.9 Western-blot检测CHA对相关蛋白的调控作用 | 第84-86页 |
| 5.2.10 数据分析 | 第86页 |
| 5.3 结果 | 第86-97页 |
| 5.3.1 CHA增强ADR对K562/Adr细胞的毒性 | 第86-87页 |
| 5.3.2 CHA对K562/Adr细胞核形态变化的影响 | 第87页 |
| 5.3.3 CHA增强ADR诱导K562/Adr细胞凋亡的作用 | 第87-88页 |
| 5.3.4 CHA提高K562/Adr细胞内ROS水平 | 第88-89页 |
| 5.3.5 CHA对K562/Adr细胞中Bax/Bcl-2的影响 | 第89-90页 |
| 5.3.6 CHA增加K562/Adr胞内ADR的积累 | 第90-91页 |
| 5.3.7 CHA对转运蛋白基因转录的影响 | 第91-92页 |
| 5.3.8 CHA对MRP1蛋白表达的影响 | 第92-93页 |
| 5.3.9 CHA对PI3K/Akt途径的影响 | 第93-95页 |
| 5.3.10 CHA对Nrf2/Keap1的影响 | 第95-96页 |
| 5.3.11 CHA通过抑制p-Akt调控MRP1和Nrf2的表达 | 第96-97页 |
| 5.4 讨论 | 第97-99页 |
| 5.5 本章小结 | 第99-100页 |
| 第6章 结论与展望 | 第100-102页 |
| 6.1 主要结论 | 第100-101页 |
| 6.2 主要创新点 | 第101页 |
| 6.3 展望 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 攻读博士期间的成果 | 第113页 |
