摘要 | 第8-10页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1 引言 | 第11-16页 |
1.1 果实有机酸的种类及成分 | 第11-12页 |
1.2 果实有机酸的来源及变化 | 第12页 |
1.3 有机酸代谢的关键酶基因 | 第12-15页 |
1.4 果实有机酸分子生物学研究概况 | 第15页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第15-16页 |
2 欧李及郁李果实有机酸含量的变化 | 第16-21页 |
2.1 试验材料 | 第16页 |
2.1.1 植物材料 | 第16页 |
2.1.2 主要试剂 | 第16页 |
2.1.3 仪器与设备 | 第16页 |
2.2 试验方法 | 第16-17页 |
2.2.1 欧李及郁李果实中可滴定酸(总酸)含量的测定 | 第16页 |
2.2.2 欧李及郁李果实中苹果酸和柠檬酸含量的测定 | 第16-17页 |
2.3 结果与分析 | 第17-20页 |
2.3.1 欧李及郁李果实发育过程中可滴定酸(总酸)含量的变化 | 第17页 |
2.3.2 欧李及郁李果实发育过程中苹果酸含量的变化 | 第17-18页 |
2.3.3 欧李及郁李果实发育过程中柠檬酸含量的变化 | 第18-19页 |
2.3.4 可滴定酸(总酸)、苹果酸和柠檬酸的相关性分析 | 第19-20页 |
2.4 讨论 | 第20-21页 |
3 欧李及郁李果实中苹果酸代谢相关酶活性的变化 | 第21-27页 |
3.1 试验材料 | 第21页 |
3.1.1 植物材料 | 第21页 |
3.1.2 主要试剂 | 第21页 |
3.1.3 仪器与设备 | 第21页 |
3.2 试验方法 | 第21-23页 |
3.2.1 酶液的制备 | 第21页 |
3.2.2 酶活性的测定方法 | 第21-23页 |
3.3 结果与分析 | 第23-26页 |
3.3.1 欧李及郁李果实发育过程中磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)活性的动态变化 | 第23页 |
3.3.2 欧李及郁李果实发育过程中苹果酸脱氢酶(NAD-MDH)活性的动态变化 | 第23-24页 |
3.3.3 欧李及郁李果实发育过程中苹果酸酶(NADP-ME)活性的动态变化 | 第24-25页 |
3.3.4 苹果酸与其代谢酶活性的相关性分析 | 第25-26页 |
3.4 讨论 | 第26-27页 |
4 郁李苹果酸代谢关键酶基因片段的克隆 | 第27-35页 |
4.1 试验材料 | 第27页 |
4.1.1 植物材料 | 第27页 |
4.1.2 主要生化试剂 | 第27页 |
4.1.3 主要试剂的配制 | 第27页 |
4.1.4 仪器与设备 | 第27页 |
4.2 试验方法 | 第27-30页 |
4.2.1 总RNA的提取及检测 | 第27-28页 |
4.2.2 RT-PCR扩增目的基因主要片段 | 第28-30页 |
4.3 结果与分析 | 第30-34页 |
4.3.1 郁李果实总RNA的提取 | 第30-31页 |
4.3.2 郁李苹果酸代谢关键酶基因片段的克隆与分析 | 第31-34页 |
4.4 讨论 | 第34-35页 |
5 欧李及郁李苹果酸代谢关键酶基因的表达分析 | 第35-43页 |
5.1 试验材料 | 第35页 |
5.1.1 植物材料 | 第35页 |
5.1.2 主要生化试剂 | 第35页 |
5.1.3 仪器设备 | 第35页 |
5.2 试验方法 | 第35-37页 |
5.2.1 总RNA提取及检测 | 第35页 |
5.2.2 引物的设计与合成 | 第35-36页 |
5.2.3 cDNA第一链的合成 | 第36-37页 |
5.2.4 Real-time qPCR | 第37页 |
5.3 结果与分析 | 第37-41页 |
5.3.1 NAD-MDH定量PCR分析 | 第37-38页 |
5.3.2 NADP-ME定量PCR分析 | 第38-39页 |
5.3.3 PEPC定量PCR分析 | 第39页 |
5.3.4 VHA定量PCR分析 | 第39-40页 |
5.3.5 苹果酸含量、苹果酸代谢酶活性与相关基因表达量的相关性分析 | 第40-41页 |
5.4 讨论 | 第41-43页 |
6 全文讨论与结论 | 第43-45页 |
6.1 全文讨论 | 第43-44页 |
6.2 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
Abstract | 第50-51页 |
附录 | 第52-56页 |
附图 | 第56-58页 |
致谢 | 第58页 |