中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略词表 | 第7-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-19页 |
1 干扰素简介 | 第11页 |
2 干扰素的分类和特点 | 第11-17页 |
2.1 Ⅲ型干扰素基因结构 | 第12页 |
2.2 IFN-λs的信号通路 | 第12-14页 |
2.3 IFN-λs的生物学活性 | 第14-17页 |
3 禽类Ⅲ型干扰素研究进展 | 第17页 |
4 本研究的目的及意义 | 第17-19页 |
第二章 鹅Ⅲ型干扰素及其受体的克隆及组织分布研究 | 第19-32页 |
1 实验材料 | 第19-20页 |
1.1 实验动物 | 第19页 |
1.2 主要试剂 | 第19-20页 |
1.3 主要仪器和设备 | 第20页 |
1.4 相关溶液的配制 | 第20页 |
2 实验方法与操作 | 第20-28页 |
2.1 总RNA的抽提及纯度检测 | 第20-21页 |
2.2 第一链cDNA的合成 | 第21页 |
2.3 goIFNL及goIFNLR1保守片段的扩增和鉴定 | 第21-24页 |
2.4 goIFNL及goIFNLR1 cDNA末端快速扩增 | 第24-25页 |
2.5 goIFNL和goIFNLR1 cDNA全长序列的获得 | 第25-26页 |
2.6 goIFNL和goIFNLR1的组织表达谱构建 | 第26-27页 |
2.7 数据统计分析 | 第27-28页 |
3 实验结果 | 第28-31页 |
3.1 goIFNL和goIFNLRl基因的克隆 | 第28页 |
3.2 goIFNL的组织表达谱 | 第28-29页 |
3.3 goIFNLRl的组织表达谱 | 第29-31页 |
4 讨论 | 第31-32页 |
第三章 生物信息学相关分析 | 第32-43页 |
1 实验结果 | 第32-41页 |
1.1 goIFNL和goIFNLR1开放阅读框序列分析 | 第32-36页 |
1.2 goIFNL二级结构预测 | 第36-37页 |
1.3 goIFNL和goIFNLR1开放阅读框的多序列比对分析 | 第37-39页 |
1.4 goIFNL和goIFNLR1氨基酸序列的进化树分析 | 第39-41页 |
2 讨论 | 第41-43页 |
第四章 鹅Ⅲ型干扰素的免疫学特性研究 | 第43-52页 |
1 实验材料 | 第44-45页 |
1.1 实验动物及毒株 | 第44页 |
1.2 主要试剂 | 第44页 |
1.3 主要仪器和设备 | 第44-45页 |
2 实验方法与操作 | 第45-47页 |
2.1 鹅外周血单核细胞的分离 | 第45页 |
2.2 免疫刺激剂和病毒处理外周血单核细胞 | 第45-46页 |
2.3 体内感染实验 | 第46页 |
2.4 免疫应答检测 | 第46-47页 |
3 实验结果 | 第47-50页 |
3.1 免疫刺激剂处理鹅外周血单核细胞 | 第47-48页 |
3.2 病毒刺激鹅外周血单核细胞 | 第48-49页 |
3.3 病毒体内感染动物模型 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
第五章 鹅Ⅲ型干扰素的体外重组表达 | 第52-76页 |
1 实验材料 | 第52-57页 |
1.1 实验试剂耗材 | 第52-53页 |
1.2 主要仪器和设备 | 第53页 |
1.3 菌种、质粒、细胞和实验动物 | 第53页 |
1.4 相关溶液的配制 | 第53-57页 |
2 实验方法 | 第57-67页 |
2.1 goIFNL的原核表达 | 第57-62页 |
2.2 goIFNL多克隆抗体制备 | 第62-63页 |
2.3 goIFNL的真核表达 | 第63-67页 |
3 实验结果 | 第67-74页 |
3.1 PCR扩增goIFNL目的片段 | 第67-68页 |
3.2 表达质粒的构建 | 第68-71页 |
3.3 优化IPTG诱导表达pET-32a-goIFNL重组质粒 | 第71页 |
3.4 蛋白诱导表达及纯化 | 第71-72页 |
3.5 goIFNL的真核表达 | 第72-74页 |
4 讨论 | 第74-76页 |
全文小结 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
作者简介及发表论文情况 | 第83页 |