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好氧堆肥对畜禽粪便中抗生素抗性基因的削减条件探索及影响机理研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
第一章 绪论第14-27页
    1.1 研究目的与意义第14页
    1.2 国内外研究进展第14-25页
        1.2.1 抗生素抗性基因的危害和传播机制第14-16页
        1.2.2 畜禽养殖中的抗生素和ARGs第16-17页
        1.2.3 重金属对ARGs的协同选择作用第17-19页
        1.2.4 ARGs在环境中的传播途径第19-20页
        1.2.5 环境中ARGs的削减技术第20-23页
        1.2.6 环境中ARGs的研究方法第23-25页
    1.3 主要研究内容与技术路线第25-27页
        1.3.1 研究内容第25-26页
        1.3.2 技术路线第26-27页
第二章 规模化养殖场中的抗生素抗性基因调查研究第27-43页
    2.1 材料与方法第28-30页
        2.1.1 样品采集第28-29页
        2.1.2 理化性质测定第29页
        2.1.3 DNA提取及高通量定量PCR第29页
        2.1.4 数据统计及分析第29-30页
    2.2 结果分析第30-38页
        2.2.1 不同畜禽粪便中的ARGs第30-31页
        2.2.2 不同畜禽粪便堆肥产物中的ARGs第31-35页
        2.2.3 不同畜禽粪便及其堆肥产物中的MGEs第35页
        2.2.4 ARGs的共现(co-occurrence)分析第35-37页
        2.2.5 ARGs总丰度预测方程的建立第37-38页
        2.2.6 ARGs与基因移动元件和环境因子之间的关系第38页
    2.3 讨论第38-42页
    2.4 结论第42-43页
第三章 畜禽粪便中残留的土霉素对好氧堆肥过程中抗生素抗性基因变化的影响第43-61页
    3.1 材料与方法第44-48页
        3.1.1 试验建立第44页
        3.1.2 样品采集第44页
        3.1.3 总可培养细菌和土霉素抗性细菌计数第44-45页
        3.1.4 土霉素抗性细菌和磺胺二甲嘧啶抗性细菌的分离和鉴定第45页
        3.1.5 DNA提取和普通PCR定性检测第45页
        3.1.6 qPCR定量检测第45-47页
        3.1.7 16S rRNA基因测序第47-48页
        3.1.8 数据统计与分析第48页
    3.2 结果与分析第48-57页
        3.2.1 土霉素抗性细菌在堆肥过程中的变化第48-49页
        3.2.2 堆肥过程中ARGs相对丰度的变化第49-52页
        3.2.3 堆肥前后ARGs绝对丰度的变化第52-53页
        3.2.4 堆肥过程中细菌群落的变化第53-57页
    3.3 讨论第57-60页
    3.4 结论第60-61页
第四章 畜禽粪便中残留的重金属Cu和Zn对好氧堆肥过程中抗生素抗性基因变化的影响第61-80页
    4.1 材料与方法第62-65页
        4.1.1 试验材料与装置第62页
        4.1.2 试验处理设置第62-63页
        4.1.3 样品采集第63页
        4.1.4 DTPA态重金属浓度测定第63页
        4.1.5 DNA提取和定量PCR第63页
        4.1.6 16S rRNA基因测序第63-65页
        4.1.7 数据统计与分析第65页
    4.2 结果与分析第65-77页
        4.2.1 重金属对堆肥过程中ARGs的影响第65-67页
        4.2.2 重金属对堆肥过程中MRGs的影响第67-68页
        4.2.3 重金属对堆肥过程中MGEs的影响第68-69页
        4.2.4 ARGs、MRGs和MGEs的共现分析第69-70页
        4.2.5 重金属对堆肥过程中细菌群落的影响第70-74页
        4.2.6 ARGs、MRGs和MGEs的宿主菌分析第74-75页
        4.2.7 堆肥过程中重金属DTPA-Cu和DTPA-Zn的变化第75页
        4.2.8 ARGs与重金属、MRGs、MGE以及细菌群落的关系第75-77页
    4.3 讨论第77-79页
    4.4 结论第79-80页
第五章 3种重金属钝化剂对高Cu猪粪堆肥过程中抗生素抗性基因的影响第80-97页
    5.1 材料与方法第81-82页
        5.1.1 试验材料与装置第81页
        5.1.2 试验处理设置第81页
        5.1.3 样品采集第81页
        5.1.4 DTPA-Cu浓度测定第81页
        5.1.5 DNA提取和定量PCR第81页
        5.1.6 16S rRNA测序第81页
        5.1.7 数据处理与分析第81-82页
    5.2 结果与分析第82-94页
        5.2.1 不同钝化剂对堆肥过程中ARGs的影响第82-84页
        5.2.2 不同钝化剂对堆肥过程中MRGs的影响第84-85页
        5.2.3 不同钝化剂对堆肥过程中MGEs的影响第85-86页
        5.2.4 ARGs、MRGs和MGEs的共现分析第86页
        5.2.5 不同钝化剂对堆肥过程中细菌群落的影响第86-90页
        5.2.6 堆肥产物中ARGs、MRGs和MGEs的宿主菌分析第90-91页
        5.2.7 不同钝化剂对堆肥过程DTPA-Cu浓度的影响第91-92页
        5.2.8 ARGs与重金属、MRGs、MGEs以及细菌群落的关系第92-94页
    5.3 讨论第94-96页
    5.4 结论第96-97页
第六章 温度对好氧堆肥削减抗生素抗性基因的影响研究第97-112页
    6.1 材料与方法第98-99页
        6.1.1 试验材料与装置第98-99页
        6.1.2 样品采集第99页
        6.1.3 DNA提取和普通PCR和定量PCR第99页
        6.1.4 16S rRNA基因测序第99页
        6.1.5 人类致病菌比对和分析第99页
        6.1.6 数据统计与分析第99页
    6.2 结果分析第99-109页
        6.2.1 不同温度好氧堆肥对ARGs的影响第99-101页
        6.2.2 不同温度好氧堆肥对整合子的影响第101-102页
        6.2.3 不同温度好氧堆肥对微生物群落的影响第102-107页
        6.2.4 不同温度好氧堆肥对人类致病菌的影响第107页
        6.2.5 ARGs、整合子和微生物群落之间的关系第107-109页
    6.3 讨论第109-111页
    6.4 结论第111-112页
第七章 结论与展望第112-114页
    7.1 主要结论第112-113页
    7.2 研究展望第113-114页
参考文献第114-130页
致谢第130-131页
作者简介第131-133页
附录第133-153页

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