| 符号说明 | 第1-12页 |
| 中文摘要 | 第12-15页 |
| Abstract | 第15-19页 |
| 1 前言 | 第19-34页 |
| ·动物氧化还原体系 | 第19-20页 |
| ·蜜蜂体内的主要抗氧化体系 | 第20-21页 |
| ·蛋氨酸亚砜还原酶（Msrs）的研究进展 | 第21-23页 |
| ·蛋氨酸亚砜还原酶（Msrs）家族分类 | 第21-22页 |
| ·蛋氨酸亚砜还原酶A （MsrA） | 第22页 |
| ·蛋氨酸亚砜还原酶B （MsrB） | 第22页 |
| ·蛋氨酸亚砜还原酶B（MsrB）的催化还原机制 | 第22-23页 |
| ·蛋氨酸亚砜还原酶B（MsrB）的功能研究 | 第23页 |
| ·转铁蛋白研究进展 | 第23-29页 |
| ·铁元素对蜜蜂的重要性 | 第23-24页 |
| ·转铁蛋白的分类与进化 | 第24-25页 |
| ·转铁蛋白的结构特征 | 第25-27页 |
| ·转铁蛋白的生物学功能 | 第27-29页 |
| ·转铁蛋白的功能概述 | 第27页 |
| ·转铁蛋白的功能 | 第27-28页 |
| ·转铁蛋白抗菌特性 | 第28页 |
| ·昆虫转铁蛋白概述 | 第28-29页 |
| ·铁蛋白研究进展 | 第29-33页 |
| ·铁蛋白的结构特征 | 第29-30页 |
| ·铁蛋白的生物学功能 | 第30-33页 |
| ·铁蛋白的储铁功能 | 第30-31页 |
| ·铁蛋白的抗氧化作用 | 第31-32页 |
| ·铁蛋白的调控 | 第32-33页 |
| ·铁蛋白的免疫作用 | 第33页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第33-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-57页 |
| ·实验材料 | 第34-37页 |
| ·供试蜂种 | 第34页 |
| ·菌株、质粒 | 第34页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第34页 |
| ·PCR引物 | 第34-37页 |
| ·实验方法 | 第37-57页 |
| ·中华蜜蜂的饲养及处理 | 第37页 |
| ·中华蜜蜂总RNA的提取、纯化及鉴定 | 第37-39页 |
| ·利用TRIZOL Kit提取总RNA | 第37-38页 |
| ·总RNA的纯化 | 第38页 |
| ·总RNA的琼脂糖-甲醛变性凝胶电泳鉴定 | 第38-39页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第39页 |
| ·cDNA的纯化 | 第39-40页 |
| ·cDNA5'末端的加尾反应 | 第40页 |
| ·中华蜜蜂AccFTH及Acc FTL基因c DNA全长序列的获取 | 第40-44页 |
| ·Acc FTH及AccFTL基因中间片段的获取 | 第40-42页 |
| ·RACE法获得Acc FTH及AccFTL基因 5'端序列 | 第42-43页 |
| ·RACE法Acc FTH及AccFTL基因 3'端序列 | 第43-44页 |
| ·Acc FTH及AccFTL基因全长cDNA序列的获得 | 第44页 |
| ·目的DNA片段回收、连接及转化 | 第44-46页 |
| ·目的DNA片段回收 | 第44-45页 |
| ·目的DNA片段连接克隆载体 | 第45页 |
| ·大肠杆菌E.coli感受态细胞的制备 | 第45页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第45-46页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的提取及酶切鉴定 | 第46-47页 |
| ·质粒DNA的提取（试剂盒微量法） | 第46页 |
| ·重组质粒DNA酶切鉴定 | 第46-47页 |
| ·DNA测序 | 第47页 |
| ·中华蜜蜂基因组DNA的提取 | 第47页 |
| ·中华蜜蜂AccMsrB全长序列扩增 | 第47-48页 |
| ·中华蜜蜂AccMsrB启动子序列扩增 | 第48-49页 |
| ·RT-PCR分析基因的表达 | 第49-51页 |
| ·引物、反应体系及条件 | 第49-50页 |
| ·RT-PCR分析 | 第50页 |
| ·数据处理 | 第50-51页 |
| ·目的基因的原核表达及纯化 | 第51-53页 |
| ·构建原核表达载体 | 第51页 |
| ·诱导重组基因原核表达 | 第51页 |
| ·纯化重组蛋白 | 第51-52页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第52-53页 |
| ·抗体的制备及检测 | 第53-54页 |
| ·抗体的制备 | 第53页 |
| ·ELISA检测抗体效价 | 第53页 |
| ·Western blot分析 | 第53-54页 |
| ·免疫组化分析 | 第54-56页 |
| ·样本处理 | 第54页 |
| ·石蜡切片制备 | 第54-55页 |
| ·免疫组织酶化学分析 | 第55-56页 |
| ·生物信息学分析工具 | 第56-57页 |
| 3 结果与分析 | 第57-89页 |
| ·中华蜜蜂AccMsrB基因的分子特性和在氧化应激中的反应 | 第57-66页 |
| ·中华蜜蜂Acc MsrB基因c DNA序列分析 | 第57-58页 |
| ·中华蜜蜂Acc MsrB蛋白一级结构分析 | 第58-59页 |
| ·Acc MsrB基因组结构分析 | 第59-61页 |
| ·AccMsrB的表达特性分析 | 第61-64页 |
| ·Acc MsrB基因表达的时间和空间特异性 | 第61-62页 |
| ·AccMsrB在各非生物应激中的表达特性 | 第62-63页 |
| ·中华蜜蜂在非生物因素应激中体内的氧化状态 | 第63-64页 |
| ·Acc MsrB重组蛋白诱导表达及抗体检测 | 第64-66页 |
| ·AccMsrB重组蛋白诱导表达 | 第64-65页 |
| ·AccMsrB多克隆抗体的检测 | 第65-66页 |
| ·Acc MsrB蛋白在蜜蜂组织内的定位 | 第66页 |
| ·中华蜜蜂AccTf基因的分子特性及功能分析 | 第66-76页 |
| ·中华蜜蜂Acc Tf基因cDNA全长的获得及序列分析 | 第66-67页 |
| ·中华蜜蜂Acc Tf蛋白一级结构分析 | 第67-70页 |
| ·Acc Tf基因组结构分析 | 第70页 |
| ·AccTf启动子序列的分离及顺式作用元件的预测 | 第70-71页 |
| ·Acc Tf的表达特性分析 | 第71-75页 |
| ·AccTf基因表达的时间和空间特异性 | 第71-72页 |
| ·AccTf在不同非生物应激下的表达特性 | 第72-75页 |
| ·Acc Tf重组蛋白诱导表达及抗体检测 | 第75-76页 |
| ·中华蜜蜂AccFTH及AccFTL基因的分子特性和在氧化应激中的保护效应 | 第76-89页 |
| ·中华蜜蜂Acc FTH及AccFTL基因c DNA全长的获取及分析 | 第76-79页 |
| ·中华蜜蜂Acc FTH及AccFTL蛋白一级结构分析 | 第79-81页 |
| ·Acc FTH及AccFTL基因组结构分析 | 第81-82页 |
| ·Acc FTH及AccFTL基因启动子序列的分离及顺式作用元件的预测 | 第82-85页 |
| ·Acc FTH及AccFTL的表达特性分析 | 第85-89页 |
| ·AccFTH及AccFTL基因表达的时间和空间特异性 | 第85-86页 |
| ·AccFTH及AccFTL在不同非生物应激中的表达特性 | 第86-89页 |
| 4 讨论 | 第89-95页 |
| ·AccMsr B基因在抗逆抗氧化中的重要作用 | 第89-92页 |
| ·AccMsrB基因的序列分析 | 第89-90页 |
| ·AccMsrB基因的时空表达特性分析 | 第90页 |
| ·AccMsrB基因的生物学功能分析 | 第90-92页 |
| ·铁代谢相关蛋白基因在氧化应激和铁代谢中发挥重要作用 | 第92-95页 |
| ·铁代谢相关蛋白基因的序列分析 | 第92-93页 |
| ·铁代谢相关蛋白基因的时空表达特性分析 | 第93页 |
| ·铁代谢相关蛋白基因的生物学功能分析 | 第93-95页 |
| 5 结论 | 第95-96页 |
| 6 参考文献 | 第96-106页 |
| 本论文研究课题来源 | 第106-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第108页 |
