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Shh信号的抑制因子Sufu参与肢芽模式形成及数量的决定

致谢第1-6页
摘要第6-7页
Abstract第7-10页
1 综述第10-16页
   ·肢芽的发育第10-13页
     ·参与肢芽发育的信号第10-12页
     ·表皮-间充质信号反馈环第12-13页
   ·多指畸形第13-14页
   ·Sufu的研究史第14-16页
2 实验内容与实验设计第16-18页
   ·实验目的与意义第16页
   ·实验内容第16-17页
   ·实验流程图第17-18页
3 实验材料与方法第18-32页
   ·实验动物饲养与鉴定第18-19页
     ·实验小鼠来源、制备第18页
     ·基因型鉴定第18-19页
   ·实验材料处理第19-23页
     ·冰冻切片材料处理第19-20页
     ·总RNA的提取和c DNA的制备第20-21页
     ·原位杂交探针制备第21-23页
     ·Western blot样品的蛋白提取第23页
   ·实验方法第23-32页
     ·冰冻切片原位杂交第23-25页
     ·整胚原位杂交第25-28页
     ·X-gal染色方法第28页
     ·骨骼染色第28-29页
     ·Western blotting第29-30页
     ·免疫组化第30-31页
     ·TUNEL免疫荧光第31-32页
4 实验结果及分析第32-46页
   ·小鼠基因型鉴定第32页
   ·Dermo1-Cre以及Sufu基因在肢芽发育中的表达时空特异性第32-33页
   ·Dermo1-Cre在肢芽中敲除Sufu基因的效率第33-35页
   ·近前轴多指表型的确定第35页
   ·ZPA分泌的SHH信号以及下游受体在肢芽前端异位表达第35-36页
   ·Sufu的敲除致使Gli A-Gli R平衡打破第36-39页
   ·Gli3R相互拮抗的dhand基因的宽泛表达第39-40页
   ·AER的FGF信号在肢芽前端延伸第40-41页
   ·Sufu的缺失不影响BMP信号但会导致Gremlin表达上调第41-43页
   ·独立于SHH信号的Hoxds基因家族的变化第43-44页
   ·肢芽前端细胞凋亡的减少促进了近前轴多指的形成第44-45页
   ·Sufu在肢芽AP轴向形成以及趾的数量发育的作用第45-46页
5 总结与讨论第46-48页
   ·实验总结第46页
   ·讨论第46-48页
参考文献第48-52页
作者简介第52页

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