| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 符号及缩略语 | 第11-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-28页 |
| 第一章 猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究进展 | 第12-28页 |
| ·猪瘟病毒 | 第12-18页 |
| ·猪瘟概述 | 第12页 |
| ·猪瘟病毒的生物学特征 | 第12-13页 |
| ·猪瘟病毒的分子生物学特征 | 第13-15页 |
| ·猪瘟病毒引起的临床症状和病理变化 | 第15页 |
| ·猪瘟病毒的遗传分型 | 第15-16页 |
| ·猪瘟兔化弱毒疫苗 | 第16页 |
| ·我国猪瘟流行现状 | 第16页 |
| ·猪瘟病毒检测方法的发展 | 第16-18页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒 | 第18-24页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征概况 | 第18-19页 |
| ·PRRSV病原学 | 第19-20页 |
| ·PRRSV分子生物学特征 | 第20-22页 |
| ·国内PRRSV和PRRS的流行情况和现状 | 第22页 |
| ·PRRS疫苗 | 第22-23页 |
| ·PRRSV检测方法的发展 | 第23-24页 |
| ·荧光定量PCR | 第24-26页 |
| ·SYBR Green I检测 | 第24-25页 |
| ·TaqMan探针 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第26-28页 |
| 第二部分 研究内容 | 第28-66页 |
| 第二章 CSFV强弱毒TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR鉴别方法的建立 | 第28-46页 |
| 摘要 | 第28页 |
| ·实验样品 | 第28-29页 |
| ·病毒与细胞 | 第28-29页 |
| ·质粒与细菌 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29页 |
| ·试验方法 | 第29-39页 |
| ·引物、探针设计与合成 | 第29-32页 |
| ·细胞培养 | 第32-33页 |
| ·扩增细胞毒 | 第33-35页 |
| ·病毒基因组提取(RNA/DNA) | 第35-36页 |
| ·RT-PCR/PCR/琼脂糖凝胶电泳 | 第36页 |
| ·胶回收 | 第36-37页 |
| ·连接/转化/摇菌/小提质粒 | 第37-38页 |
| ·MGB荧光定量RT-PCR检测方法反应体系和条件的优化 | 第38页 |
| ·MGB荧光定量RT-PCR检测方法敏感性试验 | 第38-39页 |
| ·CSFV强弱毒标准曲线的建立 | 第39页 |
| ·MGB荧光定量RT-PCR检测方法特异性试验 | 第39页 |
| ·MGB荧光定量RT-PCR检测方法重复性试验 | 第39页 |
| ·结果 | 第39-44页 |
| ·MGB荧光定量RT-PCR检测方法反应体系和条件的优化结果 | 第39-40页 |
| ·MGB荧光定量RT-PCR检测方法敏感性试验结果 | 第40-41页 |
| ·CSFV强弱毒标准曲线的建立 | 第41-42页 |
| ·MGB荧光定量RT-PCR检测方法特异性试验结果 | 第42-43页 |
| ·MGB荧光定量RT-PCR检测方法重复性试验结果 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 第三章 PRRSV快速检测的TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立 | 第46-58页 |
| 摘要 | 第46页 |
| ·实验材料 | 第46-47页 |
| ·样品 | 第46-47页 |
| ·主要试剂 | 第47页 |
| ·主要仪器设备 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-52页 |
| ·PRRSV引物和探针合成 | 第47-49页 |
| ·病毒基因组提取(RNA/DNA) | 第49页 |
| ·RT-PCR/PCR/琼脂糖凝胶电泳/胶回收 | 第49-50页 |
| ·连接/转化/摇菌/小提质粒 | 第50-51页 |
| ·PRRSV TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法反应体系和条件的优化 | 第51页 |
| ·PRRSV TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法敏感性试验 | 第51页 |
| ·PRRSV TaqMan荧光定量RT-PCR标准曲线的建立 | 第51页 |
| ·PRRSV TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法特异性试验 | 第51页 |
| ·PRRSV TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法重复性试验 | 第51-52页 |
| ·结果 | 第52-55页 |
| ·PRRSV TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法反应体系和条件的优化结果 | 第52页 |
| ·PRRSV TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法敏感性试验结果 | 第52-53页 |
| ·PRRSV TaqMan荧光定量RT-PCR标准曲线的建立 | 第53-54页 |
| ·PRRSV TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法特异性试验结果 | 第54-55页 |
| ·PRRSV TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法重复性试验结果 | 第55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| 第四章 荧光定量RT-PCR方法进行临床样品检测的应用 | 第58-66页 |
| 摘要 | 第58页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·临床样品 | 第58页 |
| ·主要试剂 | 第58页 |
| ·主要仪器设备 | 第58页 |
| ·方法 | 第58-60页 |
| ·样品处理 | 第58-59页 |
| ·RNA提取 | 第59页 |
| ·CSFV强弱毒MGB荧光定量RT-PCR鉴别方法应用于临床样品检测 | 第59页 |
| ·PRRSV TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法应用于临床样品检测 | 第59页 |
| ·RT-PCR/PCR/琼脂糖凝胶电泳 | 第59-60页 |
| ·结果 | 第60-64页 |
| ·CSFV强弱毒MGB荧光定量RT-PCR鉴别方法检测结果 | 第60-61页 |
| ·PRRSV TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法检测结果 | 第61-62页 |
| ·普通RT-PCR(CSFV/PRRSV)琼脂糖凝胶电泳结果 | 第62-63页 |
| ·TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法与普通RT-PCR方法的符合率 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-66页 |
| 全文总结 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
