| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 中英文对照表 | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| ·杆状病毒的分类 | 第10-11页 |
| ·杆状病毒的生命周期 | 第11-12页 |
| ·杆状病毒AcMNPV | 第12-13页 |
| ·杆状病毒的应用 | 第13-15页 |
| ·杆状病毒用作生物杀虫剂 | 第13-14页 |
| ·杆状病毒用作外源基因表达载体 | 第14页 |
| ·杆状病毒用作基因治疗 | 第14页 |
| ·杆状病毒用作表面展示系统 | 第14-15页 |
| ·Bac-to-Bac表达系统 | 第15-16页 |
| ·vlf-1基因 | 第16-17页 |
| ·本论文研究目的和意义 | 第17-18页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第18-31页 |
| ·实验材料 | 第18-22页 |
| ·菌株、质粒 | 第18页 |
| ·细胞系 | 第18页 |
| ·培养基 | 第18-19页 |
| ·实验试剂、酶和试剂盒 | 第19-20页 |
| ·实验仪器 | 第20页 |
| ·引物 | 第20-22页 |
| ·实验方法 | 第22-31页 |
| ·PCR反应体系及程序 | 第22页 |
| ·使用AXYGRN DNA纯化回收试剂盒回收DNA片段 | 第22-23页 |
| ·CaCl_2法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第23页 |
| ·转化感受态细胞 | 第23-24页 |
| ·转座 | 第24页 |
| ·从大肠杆菌中抽提质粒 | 第24-25页 |
| ·酶切反应 | 第25-26页 |
| ·酶连反应 | 第26页 |
| ·转染感染Sf9细胞 | 第26-27页 |
| ·测定病毒滴度 | 第27-28页 |
| ·电镜样品制备 | 第28页 |
| ·SDS-PAGE凝胶的配比 | 第28-29页 |
| ·SDS-PAGE样品制备 | 第29-31页 |
| 第三章 实验结果 | 第31-54页 |
| ·同源重组构建vlf-1-ko-AcBacmid | 第31-33页 |
| ·利用Bac-to-Bac表达系统构建重组AcBacmid | 第33-47页 |
| ·vlf-1缺失型AcBacmid vAc~(vlf-1-ko-pH-pG)的构建 | 第34页 |
| ·vlf-1拯救型AcBacmid vAc~(vlf-1-rep-pH-pG)的构建 | 第34-37页 |
| ·VLF-1 S218定点突变 | 第37-40页 |
| ·VLF-1 S233定点突变 | 第40-42页 |
| ·VLF-1 S218,S233定点双突变 | 第42-47页 |
| ·重组病毒AcBacmid在Sf9细胞中的表达 | 第47-49页 |
| ·VLF-1磷酸化位点突变对病毒增殖的影响 | 第49-51页 |
| ·VLF-1磷酸化位点突变对病毒粒子形态的影响 | 第51-52页 |
| ·VLF-1磷酸化位点突变对极晚期基因polh表达的影响 | 第52-54页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 攻读硕士学位期间论文发表情况 | 第61-62页 |
