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田鼠巴贝斯虫两个硫氧还蛋白基因的克隆及鉴定

摘要第1-3页
Abstract第3-9页
第一章 综述第9-16页
   ·原虫Trx结构第9-10页
   ·Trx的生物活性与功能第10-14页
   ·Trx抑制剂第14-15页
   ·小结第15-16页
第二章 田鼠巴贝斯虫硫氧还蛋白基因的克隆第16-39页
   ·引言第16页
   ·实验材料第16-17页
     ·材料第16页
     ·实验仪器第16-17页
   ·实验方法第17-27页
     ·收集昆明小白鼠红细胞中的田鼠巴贝斯虫虫体第17页
     ·田鼠巴贝斯虫总RNA的提取和转录组测序第17-18页
     ·田鼠巴贝斯虫总RNA反转录为cDNA第18页
     ·硫氧还蛋白保守片段的扩增第18-21页
     ·Trx-2、Trx-3 的 3’端快速扩增第21-23页
     ·Trx-2、Trx-3 的 5’端快速扩增第23-26页
     ·全长基因的扩增第26-27页
   ·实验结果第27-37页
     ·总RNA的提取第27-28页
     ·保守片段的扩增第28-29页
     ·3’端快速扩增第29-31页
     ·5’端快速扩增第31-33页
     ·全长基因的扩增第33-37页
   ·讨论第37-39页
第三章 硫氧还蛋白基因的原核表达第39-53页
   ·引言第39页
   ·实验材料第39-40页
     ·材料第39页
     ·实验仪器第39-40页
   ·实验方法第40-47页
     ·重组质粒的构建第40-43页
     ·重组蛋白表达形式分析第43-45页
     ·蛋白纯化及定量第45-47页
   ·实验结果第47-51页
     ·重组质粒的构建第47-48页
     ·重组蛋白表达形式分析第48-49页
     ·蛋白纯化及定量第49-51页
   ·讨论第51-53页
第四章 硫氧还蛋白重组蛋白活性分析第53-57页
   ·引言第53页
   ·实验材料第53页
   ·实验方法第53-54页
   ·实验结果第54-55页
   ·讨论第55-57页
第五章 Trx-2 和Trx-3 在虫体中天然蛋白的Western鉴定及IFAT实验第57-66页
   ·引言第57页
   ·实验材料第57-58页
     ·材料第57页
     ·实验仪器第57-58页
   ·实验方法第58-60页
     ·多抗血清的制备第58页
     ·Western blot鉴定第58-59页
     ·间接免疫荧光实验(IFAT)检测第59-60页
   ·实验结果第60-64页
     ·Trx-2 和Trx-3 多抗血清的Western blot鉴定第60-62页
     ·His单抗的Western blot鉴定第62页
     ·间接免疫荧光实验(IFAT)检测第62-64页
   ·讨论第64-66页
第六章 全文总结第66-67页
参考文献第67-73页
附录第73-81页
作者简介第81-82页
致谢第82-83页

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