| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-20页 |
| ·诺如病毒的生物学特点 | 第10-11页 |
| ·诺如病毒的富集 | 第11-14页 |
| ·诺如病毒RNA的提取 | 第14-15页 |
| ·粪便样品中诺如病毒的检测研究现状 | 第15-17页 |
| ·食品基质中诺如病毒的检测研究现状 | 第17-19页 |
| ·本课题的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第2章 PGM-MB法洗脱液的选择和病毒RNA提取方法的建立 | 第20-27页 |
| ·引言 | 第20页 |
| ·材料 | 第20-22页 |
| ·供试病毒、PGM-MB、食品样品 | 第20页 |
| ·试剂 | 第20-21页 |
| ·引物和探针 | 第21页 |
| ·试剂盒 | 第21页 |
| ·仪器及耗材 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-24页 |
| ·诺如病毒原液及稀释悬浮液的制备 | 第22页 |
| ·CBS缓冲液中诺如病毒的人工接种与PGM-MB富集 | 第22页 |
| ·食品基质中诺如病毒的人工接种、洗脱与富集 | 第22-23页 |
| ·诺如病毒RNA的提取 | 第23页 |
| ·反转录 | 第23-24页 |
| ·实时荧光PCR扩增 | 第24页 |
| ·结果 | 第24-26页 |
| ·诺如病毒RNA提取方法的建立 | 第24-25页 |
| ·小番茄缓冲液的选择 | 第25页 |
| ·色拉缓冲液的选择 | 第25-26页 |
| ·讨论 | 第26-27页 |
| 第3章 PGM-MB法适用性及其吸附诺如病毒完整性的研究 | 第27-32页 |
| ·引言 | 第27页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-30页 |
| ·诺如病毒原液及稀释悬浮液的制备 | 第28页 |
| ·诺如病毒的人工接种 | 第28-29页 |
| ·核糖核酸酶I_f处理 | 第29页 |
| ·热释放法提取病毒RNA | 第29页 |
| ·TIANamp试剂盒提取纯化病毒RNA | 第29页 |
| ·反转录 | 第29页 |
| ·实时荧光PCR扩增 | 第29-30页 |
| ·结果 | 第30-31页 |
| ·PGM-MB与诺如病毒各株系的吸附情况 | 第30页 |
| ·PGM-MB吸附的诺如病毒粒子完整性研究 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| 第4章 PGM-MB和PEG8000 90min/过夜富集检测蓝莓、小番茄和色拉中诺如病毒的比较研究 | 第32-43页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-35页 |
| ·结果 | 第35-41页 |
| ·RTU的确定 | 第35-36页 |
| ·标注曲线的绘制 | 第36页 |
| ·基质为蓝莓时三种富集方法回收率的比较 | 第36-37页 |
| ·基质为小番茄时三种富集方法回收率的比较 | 第37-38页 |
| ·基质为色拉时三种富集方法回收率的比较 | 第38-39页 |
| ·三种富集方法回收率和浓缩倍数的比较 | 第39-40页 |
| ·PGM-MB富集小番茄和水样中诺如病毒及其回收率的比较 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第5章 PGM-MB和PEG8000过夜富集检测青葱和葡萄中的诺如病毒 | 第43-51页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-46页 |
| ·结果 | 第46-49页 |
| ·RTU的确定和标准曲线绘制 | 第46页 |
| ·以青葱为基质时回收率的比较 | 第46-47页 |
| ·以葡萄为基质时回收率的比较 | 第47-48页 |
| ·以青葱为基质的检测下限比较 | 第48页 |
| ·以葡萄为基质的检测下限比较 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第6章 PGM-MB法富集检测牡蛎中诺如病毒的研究 | 第51-58页 |
| ·引言 | 第51页 |
| ·材料 | 第51-52页 |
| ·方法 | 第52-54页 |
| ·结果 | 第54-56页 |
| ·中性洗脱-浓缩法 | 第54-55页 |
| ·碱洗脱-浓缩法 | 第55页 |
| ·三种洗脱液洗脱 | 第55-56页 |
| ·甘氨酸洗脱-乙酸乙酯/氯仿抽提 | 第56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 第7章 结论和展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
