| 摘要 | 第1-7页 |
| abstract | 第7-12页 |
| 第一章 啶虫脒及其在环境中的代谢转化 | 第12-18页 |
| 1 啶虫脒的主要物理化学性质及其用途 | 第12-13页 |
| 2 啶虫脒的作用机制 | 第13页 |
| 3 啶虫脒的性能特点 | 第13-14页 |
| 4 啶虫脒的残留 | 第14页 |
| 5 啶虫脒在环境中的代谢转化 | 第14-16页 |
| ·啶虫脒的光解 | 第14-15页 |
| ·啶虫脒的水解 | 第15-16页 |
| ·啶虫脒在土壤中的降解 | 第16页 |
| 6 啶虫脒微生物降解研究存在的问题及发展的方向 | 第16-18页 |
| 第二章 啶虫脒降解菌株的分离、鉴定及其生理特性研究 | 第18-39页 |
| 第一节 啶虫脒降解菌株的分离与鉴定 | 第18-32页 |
| 1 材料与方法 | 第18-26页 |
| ·菌株、培养基、试剂与仪器 | 第18-19页 |
| ·啶虫脒检测方法的测定 | 第19-20页 |
| ·啶虫脒降解菌株的分离与筛选 | 第20页 |
| ·降解菌株的革兰氏染色 | 第20-21页 |
| ·降解菌株的抗性筛选 | 第21-22页 |
| ·啶虫脒降解菌株的培养特征及生理生化鉴定 | 第22页 |
| ·啶虫脒降解菌株 16S r RNA基因序列的分析 | 第22-25页 |
| ·啶虫脒降解菌株 16S rRNA基因的PCR扩增 | 第25页 |
| ·啶虫脒降解菌株系统发育树构建 | 第25-26页 |
| 2 结果与分析 | 第26-31页 |
| ·啶虫脒检测方法的测定 | 第26-27页 |
| ·啶虫脒降解菌株的分离与筛选 | 第27-28页 |
| ·啶虫脒降解菌株的初步鉴定 | 第28-29页 |
| ·革兰氏染色结果 | 第29页 |
| ·啶虫脒降解菌株的抗性筛选 | 第29-30页 |
| ·啶虫脒降解菌株的 16s rRNA基因序列的分析 | 第30-31页 |
| 3 小结 | 第31-32页 |
| 第二节 啶虫脒降解特性研究 | 第32-39页 |
| 1 材料与方法 | 第32-35页 |
| ·培养基与菌株 | 第32页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第32-33页 |
| ·生长曲线及降解测定 | 第33页 |
| ·温度对菌株DY-17降解率的影响 | 第33页 |
| ·初始pH值对菌株DY-17降解率的影响 | 第33页 |
| ·培养液初始农药浓度对菌株DY-17降解率的影响 | 第33-34页 |
| ·金属离子对菌株DY-17降解率的影响 | 第34-35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-38页 |
| ·菌株DY-17的生长和降解曲线 | 第35-36页 |
| ·温度对菌株DY-17降解率的影响 | 第36页 |
| ·初始pH对菌株DY-17降解率的影响 | 第36-37页 |
| ·培养液初始农药浓度对菌株DY-17降解率的影响 | 第37-38页 |
| ·金属离子对菌株DY-17降解率的影响 | 第38页 |
| 3 小结 | 第38-39页 |
| 第三章 啶虫脒腈水合酶的克隆与表达 | 第39-67页 |
| 第一节 啶虫脒腈水合酶基因的克隆与表达 | 第40-58页 |
| 1 材料与方法 | 第40-49页 |
| ·菌株及质粒 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40页 |
| ·培养基 | 第40-41页 |
| ·超级感受态的制备 | 第41-43页 |
| ·细菌总DNA的提取 | 第43页 |
| ·质粒DNA的少量提取 | 第43页 |
| ·基因组总DNA的Sau3AI部分酶切与片段回收 | 第43-44页 |
| ·酶连 | 第44-45页 |
| ·酶连产物的转化 | 第45页 |
| ·阳性克隆子的筛选 | 第45页 |
| ·序列测定 | 第45页 |
| ·基因序列的比较与分析 | 第45页 |
| ·啶虫脒腈水合酶结构基因的PCR扩增 | 第45-46页 |
| ·啶虫脒腈水合酶表达载体的构建 | 第46-47页 |
| ·啶虫脒腈水合酶的SDS-PAGE分析 | 第47-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-57页 |
| ·Sau3AI部分酶切 | 第49页 |
| ·菌株DY-17总DNA文库的构建 | 第49-50页 |
| ·阳性克隆子的筛选 | 第50-51页 |
| ·基因序列的测定及分析 | 第51-53页 |
| ·结构基因的表达 | 第53-57页 |
| 3 讨论 | 第57-58页 |
| 第二节 激活蛋白的克隆与腈水合酶及其激活蛋白共表达 | 第58-67页 |
| 1 材料与方法 | 第58-62页 |
| ·菌株及质粒 | 第58页 |
| ·试剂 | 第58-59页 |
| ·培养基 | 第59页 |
| ·啶虫脒腈水合酶的激活蛋白结构基因的PCR扩增 | 第59-60页 |
| ·啶虫脒腈水合酶的激活蛋白表达载体的构建 | 第60页 |
| ·表达 | 第60-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-66页 |
| ·啶虫脒腈水合酶激活蛋白结构基因的扩增及分析 | 第62页 |
| ·表达载体的构建 | 第62-63页 |
| ·啶虫脒腈水合酶激活蛋白结构基因在大肠杆菌中表达的SDS-PAGE分析 | 第63-64页 |
| ·啶虫脒腈水合酶结构基因及其激活蛋白结构共表达的SDS-PAGE分析 | 第64-65页 |
| ·啶虫脒腈水合酶及其激活蛋白共表达质粒的功能验证 | 第65-66页 |
| 3 讨论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 附录 | 第72-77页 |
| 攻读硕士学位期间出版或发表的论著、论文 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
