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AcMNPV中LEF-10过量表达与聚集对病毒晚期基因表达的影响

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 文献综述第11-21页
   ·杆状病毒概述第11-15页
     ·杆状病毒的起源及分类第11-12页
     ·杆状病毒的形态特征及感染周期第12-14页
     ·苜蓿银纹夜蛾多核型多角体病毒第14-15页
   ·杆状病毒晚期表达因子第15-18页
     ·晚期表达因子第15-16页
     ·其它lef基因介绍第16-18页
   ·蛋白表达系统第18-19页
   ·实验目的、意义及立项依据第19-21页
第二章 Lef-10聚集的分布及影响第21-31页
   ·材料与试剂第21-22页
     ·菌株与质粒第21页
     ·生化试剂第21页
     ·主要溶液配方第21-22页
     ·主要仪器第22页
     ·引物设计与合成第22页
   ·实验方法第22-26页
     ·野生型pTriEx- plef-10_lef10GFP-pp10_mCherry质粒构建第22-24页
     ·截短型pTriEx- plef-10_lef10165-GFP-pp10_mC herry质粒构建第24-25页
     ·包装重组杆状病毒第25页
     ·极限稀释法测定病毒滴度第25-26页
     ·重组型杆状病毒感染Sf9细胞第26页
     ·荧光显微镜观察LEF-10在Sf9细胞中的状态第26页
     ·流式细胞实验第26页
   ·结果与分析第26-31页
     ·重组质粒pTriEx- plef-10_lef10GFP-pp10_mCherry的克隆第26-27页
     ·截短型pTriEx- plef-10_lef10165-GFP-pp10_mC herry质粒的克隆第27-28页
     ·LEF-10聚集导致其功能下调第28-29页
     ·LEF-10羧基端截短对p10表达的影响第29-31页
第三章 hsp70启动子启动LEF-10过量表达第31-41页
   ·材料与试剂第31-32页
     ·菌株与质粒第31页
     ·生化试剂第31页
     ·主要溶液配方第31页
     ·主要仪器第31页
     ·引物设计与合成第31-32页
   ·实验方法第32-36页
     ·野生型及截短型LEF-10过量表达质粒构建第32-33页
     ·热启动LEF-10过量表达质粒构建第33-35页
     ·包装重组杆状病毒第35页
     ·热启动Hsp70过表达lef-10第35-36页
     ·倒置荧光显微镜观察荧光表达第36页
     ·流式细胞实验第36页
   ·结果与分析第36-41页
     ·野生型及截短型LEF-10过量表达质粒的克隆第36-37页
     ·热启动LEF-10过量表达质粒的克隆第37-38页
     ·热启动LEF-10过量表达荧光结果第38-40页
     ·lef-10过量表达流式细胞结果第40-41页
第四章 LEF-10聚集对晚期基因表达水平影响第41-46页
   ·材料与试剂第41-42页
     ·重组病毒第41页
     ·生化试剂第41页
     ·主要溶液配方第41页
     ·主要仪器第41页
     ·引物设计与合成第41-42页
   ·实验方法第42-43页
     ·极限稀释法测定病毒滴度第42页
     ·重组型杆状病毒感染Sf9细胞第42页
     ·流式细胞实验第42页
     ·Sf9细胞RNA提取第42-43页
     ·DNA酶处理及反转录第43页
     ·半定量PCR检测病毒晚期基因表达第43页
   ·结果与分析第43-46页
     ·LEF-10羧基末端截短影响LEF-10过量表达第43-44页
     ·Sf9细胞RNA提取结果第44-45页
     ·LEF-10羧基末端截短对晚期基因表达的影响第45-46页
第五章 讨论第46-49页
第六章 结论第49-50页
参考文献第50-56页
缩略词第56-57页
致谢第57-58页
作者简介第58页

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