摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
·杆状病毒概述 | 第11-15页 |
·杆状病毒的起源及分类 | 第11-12页 |
·杆状病毒的形态特征及感染周期 | 第12-14页 |
·苜蓿银纹夜蛾多核型多角体病毒 | 第14-15页 |
·杆状病毒晚期表达因子 | 第15-18页 |
·晚期表达因子 | 第15-16页 |
·其它lef基因介绍 | 第16-18页 |
·蛋白表达系统 | 第18-19页 |
·实验目的、意义及立项依据 | 第19-21页 |
第二章 Lef-10聚集的分布及影响 | 第21-31页 |
·材料与试剂 | 第21-22页 |
·菌株与质粒 | 第21页 |
·生化试剂 | 第21页 |
·主要溶液配方 | 第21-22页 |
·主要仪器 | 第22页 |
·引物设计与合成 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-26页 |
·野生型pTriEx- plef-10_lef10GFP-pp10_mCherry质粒构建 | 第22-24页 |
·截短型pTriEx- plef-10_lef10165-GFP-pp10_mC herry质粒构建 | 第24-25页 |
·包装重组杆状病毒 | 第25页 |
·极限稀释法测定病毒滴度 | 第25-26页 |
·重组型杆状病毒感染Sf9细胞 | 第26页 |
·荧光显微镜观察LEF-10在Sf9细胞中的状态 | 第26页 |
·流式细胞实验 | 第26页 |
·结果与分析 | 第26-31页 |
·重组质粒pTriEx- plef-10_lef10GFP-pp10_mCherry的克隆 | 第26-27页 |
·截短型pTriEx- plef-10_lef10165-GFP-pp10_mC herry质粒的克隆 | 第27-28页 |
·LEF-10聚集导致其功能下调 | 第28-29页 |
·LEF-10羧基端截短对p10表达的影响 | 第29-31页 |
第三章 hsp70启动子启动LEF-10过量表达 | 第31-41页 |
·材料与试剂 | 第31-32页 |
·菌株与质粒 | 第31页 |
·生化试剂 | 第31页 |
·主要溶液配方 | 第31页 |
·主要仪器 | 第31页 |
·引物设计与合成 | 第31-32页 |
·实验方法 | 第32-36页 |
·野生型及截短型LEF-10过量表达质粒构建 | 第32-33页 |
·热启动LEF-10过量表达质粒构建 | 第33-35页 |
·包装重组杆状病毒 | 第35页 |
·热启动Hsp70过表达lef-10 | 第35-36页 |
·倒置荧光显微镜观察荧光表达 | 第36页 |
·流式细胞实验 | 第36页 |
·结果与分析 | 第36-41页 |
·野生型及截短型LEF-10过量表达质粒的克隆 | 第36-37页 |
·热启动LEF-10过量表达质粒的克隆 | 第37-38页 |
·热启动LEF-10过量表达荧光结果 | 第38-40页 |
·lef-10过量表达流式细胞结果 | 第40-41页 |
第四章 LEF-10聚集对晚期基因表达水平影响 | 第41-46页 |
·材料与试剂 | 第41-42页 |
·重组病毒 | 第41页 |
·生化试剂 | 第41页 |
·主要溶液配方 | 第41页 |
·主要仪器 | 第41页 |
·引物设计与合成 | 第41-42页 |
·实验方法 | 第42-43页 |
·极限稀释法测定病毒滴度 | 第42页 |
·重组型杆状病毒感染Sf9细胞 | 第42页 |
·流式细胞实验 | 第42页 |
·Sf9细胞RNA提取 | 第42-43页 |
·DNA酶处理及反转录 | 第43页 |
·半定量PCR检测病毒晚期基因表达 | 第43页 |
·结果与分析 | 第43-46页 |
·LEF-10羧基末端截短影响LEF-10过量表达 | 第43-44页 |
·Sf9细胞RNA提取结果 | 第44-45页 |
·LEF-10羧基末端截短对晚期基因表达的影响 | 第45-46页 |
第五章 讨论 | 第46-49页 |
第六章 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
缩略词 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
作者简介 | 第58页 |