摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-24页 |
·猪瘟 | 第12-19页 |
·猪瘟的概述 | 第12-17页 |
·猪瘟的防控措施 | 第17-19页 |
·乳腺生物反应器 | 第19-20页 |
·乳腺生物反应器的概念 | 第19页 |
·乳腺生物反应器的研究进展 | 第19-20页 |
·基因编辑技术 | 第20-24页 |
·锌指核酸酶 | 第20-21页 |
·转录激活因子样效应物核酸酶 | 第21-22页 |
·RNA介导的工程核酸酶 | 第22-24页 |
第二章 利用TALEN介导猪瘟病毒结构蛋白E0基因在乳腺上皮细胞中表达 | 第24-36页 |
·实验材料 | 第24-25页 |
·载体及菌株 | 第24-25页 |
·实验试剂 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-30页 |
·乳腺上皮细胞的分离培养 | 第25-26页 |
·细胞的转染与单克隆阳性细胞的筛选 | 第26页 |
·单克隆细胞中猪瘟E0(CSFV E0)基因整合位点的检测 | 第26-27页 |
·猪瘟病毒E0(CSFV E0)基因表达的PCR检测 | 第27-28页 |
·猪瘟病毒E0(CSFV E0)基因表达的定量PCR检测 | 第28-29页 |
·猪瘟病毒E0(CSFV E0)蛋白分泌表达检测 | 第29-30页 |
·实验结果 | 第30-34页 |
·山羊乳腺上皮细胞的分离纯化 | 第30-31页 |
·外源基因整合位点的检测 | 第31-32页 |
·PCR检测猪瘟病毒EO基因 | 第32-33页 |
·猪瘟病毒E0基因表达水平的检测 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-35页 |
·小结 | 第35-36页 |
第三章 转猪瘟病毒E0基因打靶奶山羊的制备 | 第36-45页 |
·实验材料 | 第36页 |
·载体及细胞 | 第36页 |
·实验试剂 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-40页 |
·组织块法培养山羊胎儿成纤维细胞及其冻存 | 第36-37页 |
·胎儿成纤维细胞的转染及克隆的筛选 | 第37-38页 |
·猪瘟E0基因在胎儿成纤维细胞中的整合检测 | 第38页 |
·转基因克隆胚的移植 | 第38-39页 |
·受体山羊的妊娠检测 | 第39页 |
·转基因小羊PCR鉴定 | 第39-40页 |
·实验结果 | 第40-43页 |
·山羊胎儿成纤维细胞的组织块培养及克隆的形成 | 第40页 |
·猪瘟病毒E0基因在胎儿成纤维细胞中的PCR鉴定 | 第40-42页 |
·转基因克隆胚胎的移植及检测 | 第42-43页 |
·转基因小羊PCR鉴定 | 第43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
·小结 | 第44-45页 |
全文结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-57页 |
附录 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简介 | 第59页 |