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基于MDCK细胞高密度培养的甲型流感病毒疫苗生产工艺开发与优化

摘要第1-7页
Abstract第7-17页
第1章 前言第17-41页
   ·动物细胞大规模培养技术及其研究进展第17-21页
     ·动物细胞大规模培养技术概述第17页
     ·动物细胞大规模培养技术与现代生物医药产品生产第17-19页
     ·动物细胞大规模培养的核心技术第19-21页
   ·动物细胞大规模培养技术在病毒疫苗生产中的应用第21-23页
     ·病毒疫苗及其生产方式第21-22页
     ·动物细胞大规模培养技术应用于病毒疫苗工业化生产的主要进展第22-23页
   ·流感疫苗及其研发现状第23-27页
     ·流行性感冒及其危害第23-24页
     ·流感疫苗及其市场现状第24-26页
     ·流感疫苗的生产方式第26-27页
   ·基于动物细胞大规模培养技术的流感疫苗生产工艺第27-40页
     ·动物细胞大规模培养技术在流感疫苗生产中的应用第27页
     ·基于动物细胞培养的流感疫苗生产工艺的分类第27-29页
     ·流感病毒在动物细胞中的增殖过程第29-32页
     ·基于动物细胞技术的流感疫苗生产关键环节第32-35页
     ·影响单位细胞病毒产率的关键因素第35-40页
   ·本文的研究目的、内容及意义第40-41页
第2章 材料与方法第41-46页
   ·实验材料第41页
     ·细胞株第41页
     ·流感病毒株第41页
     ·培养基第41页
     ·微载体第41页
     ·培养器皿第41页
   ·细胞培养系统和培养方法第41-42页
     ·种子细胞培养第41页
     ·细胞传代第41-42页
     ·搅拌瓶及反应器的批式培养和相关样品处理第42页
     ·搅拌瓶及反应器中流感病毒感染过程第42页
     ·反应器操作与控制第42页
   ·检测分析方法第42-44页
     ·细胞计数第42-43页
     ·营养物及代谢副产物浓度测定第43页
     ·细胞周期测定第43页
     ·细胞凋亡测定第43页
     ·流感病毒血凝滴度测定第43页
     ·流感病毒半组织感染滴度测定第43页
     ·流感病毒血凝抗原蛋白浓度测定第43-44页
     ·流感病毒RNA相对含量测定第44页
     ·蛋白总含量测定第44页
     ·流感病毒蛋白及MDCK细胞内相关蛋白的相对含量测定第44页
   ·计算方法第44-46页
     ·计算细胞比生长速率第44-45页
     ·细胞比死亡速率第45页
     ·计算代谢速率第45页
     ·单位细胞的病毒产率第45-46页
第3章 基于MDCK细胞培养的流感病毒生产工艺初探第46-57页
   ·前言第46页
   ·实验方案第46页
   ·结果与讨论第46-55页
     ·MDCK细胞的生长及其影响因素第46-50页
     ·流感病毒的感染复制及其影响因素第50-54页
     ·基于MDCK细胞生物反应器培养的流感病毒疫苗生产工艺初步开发第54-55页
   ·本章小结第55-57页
第4章 营养代谢对MDCK细胞扩增流感病毒的影响第57-80页
   ·前言第57页
   ·实验设计第57-58页
     ·换液操作第57页
     ·改变维持培养基第57页
     ·产毒期细胞的营养物消耗和副产物生成第57页
     ·添加特殊化学物第57-58页
   ·结果与讨论第58-79页
     ·换液操作对流感病毒增殖的影响第58-59页
     ·维持培养基对流感病毒增殖的影响第59-61页
     ·细胞在流感病毒扩增过程中的营养物代谢及其需求分析第61-64页
     ·维持培养基中基础营养组分及浓度对流感病毒增殖的影响第64-70页
     ·化学添加物及其浓度对流感病毒增殖的影响第70-72页
     ·丁酸钠促进流感病毒增殖的作用机制第72-78页
     ·维持培养基组成的进一步调整和优化第78-79页
   ·本章小结第79-80页
第5章 环境控制参数对MDCK细胞扩增流感病毒的影响第80-99页
   ·前言第80页
   ·实验设计第80页
   ·结果与讨论第80-98页
     ·环境条件对流感病毒增殖的影响第80-84页
     ·pH_(pi)影响流感病毒增殖的作用机制第84-89页
     ·温度影响流感病毒增殖的作用机制第89-98页
   ·本章小结第98-99页
第6章 基于MDCK细胞培养的流感病毒生产工艺的确立第99-104页
   ·前言第99页
   ·实验设计第99页
   ·结果与讨论第99-103页
     ·优化前的工艺条件第99页
     ·优化后的工艺条件第99-100页
     ·MDCK细胞的生长和密度维持第100-101页
     ·工艺优化前后的流感病毒增殖第101-103页
   ·本章小结第103-104页
第7章 全文总结与展望第104-107页
   ·全文总结第104-105页
   ·本文创新点第105-106页
   ·展望第106-107页
参考文献第107-123页
致谢第123-124页
研究成果第124-125页

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