| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-20页 |
| ·海南粗榧开发利用现状 | 第9-11页 |
| ·海南粗榧生物生态学特征 | 第9页 |
| ·海南粗榧种质资源现状 | 第9-10页 |
| ·海南粗榧抗癌次生代谢物的开发利用 | 第10-11页 |
| ·次生代谢物三尖杉酯碱类的研究进展 | 第11-12页 |
| ·次生代谢物紫杉醇的研究进展 | 第12-16页 |
| ·紫杉醇研究进展概述 | 第12-14页 |
| ·紫杉醇生物合成相关酶基因研究进展 | 第14页 |
| ·植物悬浮细胞生产紫杉醇研究现状 | 第14-16页 |
| ·转录组测序在植物次生代谢物生物合成中的研究 | 第16-18页 |
| ·转录组与转录组测序 | 第16页 |
| ·三种高通量测序平台 | 第16-17页 |
| ·转录组测序研究方式的优势 | 第17页 |
| ·转录组测序在次生代谢产物生物合成研究中的应用 | 第17-18页 |
| ·研究的目的与意义 | 第18-19页 |
| ·技术路线 | 第19-20页 |
| 2. 海南粗榧转录组测序 | 第20-32页 |
| ·材料与方法 | 第20-25页 |
| ·材料处理 | 第20页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第20页 |
| ·海南粗榧RNA的提取及质量检测 | 第20-22页 |
| ·转录组的测序与分析 | 第22-25页 |
| ·结果与分析 | 第25-32页 |
| ·总RNA的提取与质量鉴定 | 第25-26页 |
| ·转录组测序分析内容及流程 | 第26-27页 |
| ·原始测序数据质控结果与分析 | 第27页 |
| ·转录组测序拼接结果分析 | 第27-29页 |
| ·GO分类结果分析 | 第29-30页 |
| ·基因差异表达分析 | 第30-32页 |
| 3 海南粗榧紫杉醇合成相关酶基因的克隆及分析 | 第32-63页 |
| ·材料与方法 | 第32-42页 |
| ·材料与材料处理 | 第32页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第32-34页 |
| ·生物信息学分析工具 | 第34-35页 |
| ·RACE实验方法 | 第35-40页 |
| ·Real-Time PCR实验方法 | 第40-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-63页 |
| ·基因克隆与同源序列比对 | 第42-49页 |
| ·所克隆基因的生物信息学分析 | 第49-60页 |
| ·实时定量表达分析结果与分析 | 第60-63页 |
| 4 海南粗榧悬浮细胞系的初步建立及其紫杉醇的合成 | 第63-71页 |
| ·实验材料与方法 | 第63-65页 |
| ·实验材料 | 第63页 |
| ·主要实验仪器与试剂 | 第63-64页 |
| ·海南粗榧悬浮细胞系初步建立的实验方法 | 第64页 |
| ·海南粗榧悬浮细胞中紫杉醇含量的测定方法 | 第64-65页 |
| ·结果与分析 | 第65-71页 |
| ·海南粗榧悬浮细胞系的生长周期形态观察 | 第65-67页 |
| ·高效液相色谱法测定海南粗榧悬浮细胞中紫杉醇含量结果分析 | 第67-71页 |
| 5 讨论 | 第71-76页 |
| ·利用转录组测序的基因发掘 | 第71-72页 |
| ·利用基因注释和对比发掘基因 | 第71页 |
| ·根据基因表达差异发掘基因 | 第71-72页 |
| ·海南粗榧中紫杉醇合成相关基因的特征与表达调控 | 第72-74页 |
| ·紫杉醇合成相关酶基因生物信息学结果及其推测 | 第72-73页 |
| ·逆境胁迫与紫杉醇的生物合成关系的讨论 | 第73-74页 |
| ·悬浮细胞系中紫杉醇的生物合成 | 第74-76页 |
| ·细胞生长周期中紫杉醇含量的变化 | 第74页 |
| ·人工诱导提高紫杉醇含量 | 第74-76页 |
| 6 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-82页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |