摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
文献综述 | 第11-18页 |
第一章 脑胶质细胞瘤中ARHGAP26 编辑验证 | 第18-36页 |
1 实验主要材料及仪器 | 第19-22页 |
·细胞和组织来源 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
·主要试剂的配制 | 第20-21页 |
·主要仪器 | 第21-22页 |
·引物设计 | 第22页 |
2 实验方法 | 第22-29页 |
·组织DNA 提取步骤 | 第22-23页 |
·RNA 提取步骤 | 第23页 |
·RNA 质量纯度鉴定 | 第23-24页 |
·去除RNA 中的基因组 DNA | 第24页 |
·反转录步骤 | 第24-25页 |
·PCR 扩增含编辑位点的DNA 片段 | 第25-26页 |
·A-IRNA 编辑的检测 | 第26页 |
·实时定量PCR | 第26-27页 |
·Western 免疫印迹分析 | 第27-29页 |
3 结果 | 第29-34页 |
·ARHGAP26 的 3’UTR 区在脑瘤细胞中发生A-IRNA 编辑现象 | 第29-31页 |
·脑肿瘤组织中ARHGAP26 的3’UTR 编辑水平降低 | 第31-32页 |
·脑肿瘤组织中相关蛋白的表达 | 第32-34页 |
4 小结与讨论 | 第34-36页 |
第二章 脑瘤中ARHGAP26 基因的A-IRNA 编辑调控 | 第36-56页 |
1 实验主要材料及仪器 | 第36-40页 |
·细胞和组织来源 | 第36-37页 |
·主要试剂 | 第37页 |
·主要试剂的配制 | 第37-38页 |
·主要仪器 | 第38-39页 |
·引物设计 | 第39-40页 |
2 实验方法 | 第40-48页 |
·细胞培养 | 第40-41页 |
·细胞 RNA 提取步骤 | 第41页 |
·RNA 质量纯度鉴定 | 第41-42页 |
·去除 RNA 中的基因组DNA | 第42页 |
·反转录步骤 | 第42-43页 |
·PCR 扩增基因ARHGAP26 目的片段 | 第43-44页 |
·A-IRNA 编辑检测 | 第44页 |
·过表达质粒的细胞转染 | 第44-45页 |
·siRNA 的细胞转染 | 第45页 |
·实时定量PCR | 第45-46页 |
·WesternBlot 免疫印迹 | 第46-48页 |
3 结果 | 第48-54页 |
·U87 细胞过表达ADAR1 | 第48-51页 |
·U87 细胞敲低ADAR1 的表达 | 第51-54页 |
4 小结与讨论 | 第54-56页 |
第三章 DNA 修复酶基因 NEIL1A-IRNA 编辑下调及其潜在功能影响 | 第56-70页 |
1 实验主要材料及仪器 | 第56-59页 |
·细胞和组织来源 | 第56页 |
·主要试剂 | 第56-57页 |
·主要试剂的配制 | 第57页 |
·主要仪器 | 第57-58页 |
·引物设计 | 第58-59页 |
2 实验方法 | 第59-63页 |
·细胞培养 | 第59页 |
·细胞 DNA 提取步骤 | 第59页 |
·细胞 RNA 提取步骤 | 第59-60页 |
·RNA 质量纯度鉴定 | 第60页 |
·去除 RNA 中的基因组DNA | 第60-61页 |
·反转录步骤 | 第61-62页 |
·PCR 扩增基因NEIL1 目的片段 | 第62-63页 |
·A-IRNA 编辑检测 | 第63页 |
·生物信息学工具 | 第63页 |
3 结果 | 第63-68页 |
·NEIL1 基因上的chr15-+-75646086 位点在白血病中编辑效率显著下降 | 第63-65页 |
·NEIL1 基因的chr15-+-75646087 位点在乳腺癌细胞系中编辑效率下降 | 第65-66页 |
·NEIL1 基因上发生的A-IRNA 编辑功能的初步分析 | 第66-68页 |
4 小结与讨论 | 第68-70页 |
第四章 总结 | 第70-71页 |
·结论 | 第70页 |
·创新点 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
发表学术论文及参与科研情况 | 第79-80页 |