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癌相关基因ARHGAP26和NEIL1的A-I RNA编辑和相关调控机制的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
文献综述第11-18页
第一章 脑胶质细胞瘤中ARHGAP26 编辑验证第18-36页
 1 实验主要材料及仪器第19-22页
   ·细胞和组织来源第19页
   ·主要试剂第19-20页
   ·主要试剂的配制第20-21页
   ·主要仪器第21-22页
   ·引物设计第22页
 2 实验方法第22-29页
   ·组织DNA 提取步骤第22-23页
   ·RNA 提取步骤第23页
   ·RNA 质量纯度鉴定第23-24页
   ·去除RNA 中的基因组 DNA第24页
   ·反转录步骤第24-25页
   ·PCR 扩增含编辑位点的DNA 片段第25-26页
   ·A-IRNA 编辑的检测第26页
   ·实时定量PCR第26-27页
   ·Western 免疫印迹分析第27-29页
 3 结果第29-34页
   ·ARHGAP26 的 3’UTR 区在脑瘤细胞中发生A-IRNA 编辑现象第29-31页
   ·脑肿瘤组织中ARHGAP26 的3’UTR 编辑水平降低第31-32页
   ·脑肿瘤组织中相关蛋白的表达第32-34页
 4 小结与讨论第34-36页
第二章 脑瘤中ARHGAP26 基因的A-IRNA 编辑调控第36-56页
 1 实验主要材料及仪器第36-40页
   ·细胞和组织来源第36-37页
   ·主要试剂第37页
   ·主要试剂的配制第37-38页
   ·主要仪器第38-39页
   ·引物设计第39-40页
 2 实验方法第40-48页
   ·细胞培养第40-41页
   ·细胞 RNA 提取步骤第41页
   ·RNA 质量纯度鉴定第41-42页
   ·去除 RNA 中的基因组DNA第42页
   ·反转录步骤第42-43页
   ·PCR 扩增基因ARHGAP26 目的片段第43-44页
   ·A-IRNA 编辑检测第44页
   ·过表达质粒的细胞转染第44-45页
   ·siRNA 的细胞转染第45页
   ·实时定量PCR第45-46页
   ·WesternBlot 免疫印迹第46-48页
 3 结果第48-54页
   ·U87 细胞过表达ADAR1第48-51页
   ·U87 细胞敲低ADAR1 的表达第51-54页
 4 小结与讨论第54-56页
第三章 DNA 修复酶基因 NEIL1A-IRNA 编辑下调及其潜在功能影响第56-70页
 1 实验主要材料及仪器第56-59页
   ·细胞和组织来源第56页
   ·主要试剂第56-57页
   ·主要试剂的配制第57页
   ·主要仪器第57-58页
   ·引物设计第58-59页
 2 实验方法第59-63页
   ·细胞培养第59页
   ·细胞 DNA 提取步骤第59页
   ·细胞 RNA 提取步骤第59-60页
   ·RNA 质量纯度鉴定第60页
   ·去除 RNA 中的基因组DNA第60-61页
   ·反转录步骤第61-62页
   ·PCR 扩增基因NEIL1 目的片段第62-63页
   ·A-IRNA 编辑检测第63页
   ·生物信息学工具第63页
 3 结果第63-68页
   ·NEIL1 基因上的chr15-+-75646086 位点在白血病中编辑效率显著下降第63-65页
   ·NEIL1 基因的chr15-+-75646087 位点在乳腺癌细胞系中编辑效率下降第65-66页
   ·NEIL1 基因上发生的A-IRNA 编辑功能的初步分析第66-68页
 4 小结与讨论第68-70页
第四章 总结第70-71页
   ·结论第70页
   ·创新点第70-71页
参考文献第71-78页
致谢第78-79页
发表学术论文及参与科研情况第79-80页

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