| 致谢 | 第1-5页 |
| 目录 | 第5-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-15页 |
| ·四环素类药物及其作用机制 | 第10页 |
| ·四环素类药物的耐药机制 | 第10-12页 |
| ·主动外排机制 | 第11页 |
| ·核糖体保护机制 | 第11-12页 |
| ·灭活或钝化四环素的酶机制 | 第12页 |
| ·其他耐药机制 | 第12页 |
| ·tetM 基因的传播扩撒机制 | 第12-15页 |
| 实验一：鸭源大肠杆菌杆菌 tetM 基因的分子检测 | 第15-21页 |
| 1 引言 | 第15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-18页 |
| ·材料 | 第15-16页 |
| ·菌株 | 第15页 |
| ·药品 | 第15-16页 |
| ·培养基 | 第16页 |
| ·试剂 | 第16页 |
| ·仪器 | 第16页 |
| ·方法 | 第16-18页 |
| ·菌株的分离与纯化 | 第16页 |
| ·培养基的制备 | 第16页 |
| ·药敏试验菌液的制备 | 第16页 |
| ·药液配制 | 第16-17页 |
| ·MIC 值测定 | 第17页 |
| ·模板 DNA 制备 | 第17页 |
| ·引物设计 | 第17页 |
| ·PCR 扩增 | 第17-18页 |
| ·tetM 基因 PCR 产物的回收和测序分析 | 第18页 |
| 3 结果与讨论 | 第18-20页 |
| ·结果 | 第18-19页 |
| ·药敏试验结果 | 第18页 |
| ·PCR 检测结果 | 第18-19页 |
| ·讨论 | 第19-20页 |
| 4 小结 | 第20-21页 |
| 实验二 携带 tetM 基因的菌株流行病学分析 | 第21-27页 |
| 1 引言 | 第21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-23页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·菌株 | 第21页 |
| ·仪器和设备 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-23页 |
| ·模板制备和 Eric-PCR 引物设计 | 第21-22页 |
| ·多位点序列分析（MLST 序列分型） | 第22页 |
| ·系统发育分型 | 第22-23页 |
| 3 结果与讨论 | 第23-26页 |
| ·结果 | 第23-25页 |
| ·Eric-PCR | 第23-24页 |
| ·多位点序列分析（MLST 序列分型） | 第24页 |
| ·系统发育分型 | 第24-25页 |
| ·讨论 | 第25-26页 |
| 4 小结 | 第26-27页 |
| 实验三 tetM 基因质粒定位和其传播扩散机制 | 第27-44页 |
| 1 引言 | 第27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-36页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·试验菌株 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·试剂及药物 | 第27-28页 |
| ·仪器 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-36页 |
| ·质粒接合实验 | 第28页 |
| ·Southern blot | 第28-31页 |
| ·质粒的提取 | 第28-29页 |
| ·Southern blot 探针标记 | 第29页 |
| ·检测杂交探针的结合效率 | 第29-30页 |
| ·DNA 的转移与固定 | 第30页 |
| ·标价好的探针与 DNA 杂交 | 第30-31页 |
| ·免疫检测 | 第31页 |
| ·重组质粒的构建 | 第31-33页 |
| ·化学法感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| ·酶切连接 | 第32页 |
| ·化学法转化 | 第32-33页 |
| ·重组质粒检测 | 第33页 |
| ·PCR Mapping | 第33-34页 |
| ·质粒不相容群 | 第34-36页 |
| 3 结果与讨论 | 第36-43页 |
| ·结果 | 第36-41页 |
| ·质粒接合实验 | 第36页 |
| ·Southern blot | 第36-37页 |
| ·重组质粒的构建 | 第37-38页 |
| ·PCR Mapping | 第38-40页 |
| ·质粒不相容群 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 4 小结 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| Abstract | 第50-51页 |