| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 縮写词与符号 | 第10-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-29页 |
| 1 革兰氏阴性细菌分泌系统介绍 | 第14-19页 |
| ·研究现状 | 第14-15页 |
| ·sec分泌系统简介 | 第15-19页 |
| 2 Sec依赖的分泌蛋白及其特征 | 第19-23页 |
| ·前体蛋白的信号肽特征 | 第19-21页 |
| ·Sec依赖的信号肽和Tat依赖的信号肽的区别 | 第21-22页 |
| ·β-内酰胺酶 | 第22-23页 |
| 3 磷脂的简介 | 第23-26页 |
| ·磷脂酰胆碱(PC)的简介 | 第24页 |
| ·原核生物中磷脂酰胆碱(PC)的生物合成 | 第24-25页 |
| ·细菌磷脂酰胆碱的研究意义 | 第25-26页 |
| 4 假单胞菌杆菌介绍 | 第26-27页 |
| ·丁香假单胞杆菌 | 第26-27页 |
| ·铜绿假单胞杆菌 | 第27页 |
| ·荧光假单胞杆菌 | 第27页 |
| 5 研究内容、目的及意义 | 第27-29页 |
| ·研究内容与目的 | 第27-28页 |
| ·本实验的研究意义 | 第28-29页 |
| 第二部分 实验研究 | 第29-69页 |
| 1 实验仪器、试剂与材料 | 第29-36页 |
| ·主要仪器与设备 | 第29-30页 |
| ·实验菌株,载体和引物 | 第30-31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·所用培养基及配制 | 第31-32页 |
| ·常用溶液及其配制 | 第32-36页 |
| 2 实验方法 | 第36-49页 |
| ·丁香假单胞杆菌1336、1336pcs及土壤假单胞杆菌593、593 pcs~-对氨苄青霉素的抗性检测 | 第36-37页 |
| ·β-内酰胺酶基因的克隆,蛋白表达,纯化及多克隆抗体的制备 | 第37-45页 |
| ·1336、1336pcs-及593、593pcs-周质和胞质β-内酰胺酶的提取及酶活测定 | 第45-46页 |
| ·Western blotting检测 | 第46-47页 |
| ·包涵体蛋白AmpC、Psyr2741、Psyr3855的复性及酶活测定 | 第47-48页 |
| ·反转录PCR检测 | 第48-49页 |
| 3. 实验结果及分析 | 第49-69页 |
| ·测定1336、1336pcs~-和593、593pcs~-的Amp抗性 | 第49-51页 |
| ·β-内酰胺酶基因的克隆,蛋白表达,纯化及多克隆抗体的制备 | 第51-63页 |
| ·Western blotting检测1336和593及其相应的突变体中胞质和周质中AmpC、psyr2741和psyr3855的量 | 第63-65页 |
| ·反转录PCR(RT-PCR)检测1336和593及其相应的突变体中AmpC、psyr2741和psyr3855的表达 | 第65-67页 |
| ·AmpC、Psyr2741和Psyr3855蛋白的复性及活性检测 | 第67-69页 |
| 第三部分 总结与展望 | 第69-72页 |
| 1. 总结与讨论 | 第69-70页 |
| 2. 展望 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 附录 | 第80页 |
