| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-14页 |
| 1 引言 | 第7页 |
| ·叶片衰老的研究进展 | 第7-8页 |
| ·叶片衰老的特点 | 第7-8页 |
| ·叶片衰老的生理生化指标 | 第8页 |
| ·叶片衰老机制假说 | 第8-9页 |
| ·影响叶片衰老的因素 | 第9-11页 |
| ·内部因素调节叶片衰老 | 第9-10页 |
| ·外部因素调节叶片衰老 | 第10-11页 |
| ·叶片衰老相关基因的研究 | 第11-13页 |
| ·叶绿素分解相关基因 | 第12页 |
| ·激素代谢相关基因 | 第12页 |
| ·蛋白降解相关基因 | 第12页 |
| ·核酸降解相关基因 | 第12-13页 |
| ·氮代谢相关基因 | 第13页 |
| ·脂类代谢和抗氧化相关基因 | 第13页 |
| ·抗衰老的意义 | 第13-14页 |
| 第二章 干涉载体的构建及转化 | 第14-23页 |
| 1 研究背景 | 第14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-19页 |
| ·实验材料 | 第14-15页 |
| ·菌株和载体 | 第14-15页 |
| ·地高辛标记缓冲液 | 第15页 |
| ·载体构建 | 第15-19页 |
| ·中间载体的连接 | 第16页 |
| ·终载体的连接 | 第16页 |
| ·根癌农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第16-17页 |
| ·T0代转基因植株的阳性检测 | 第17页 |
| ·基因组 DNA 的抽提 | 第17页 |
| ·T0代转基因植株的 Southern 分析 | 第17-19页 |
| ·RNA 的抽提、反转录和 Real-time PCR 表达量检测 | 第19页 |
| 3 结果与分析 | 第19-22页 |
| ·干涉载体的构建和转化流程图 | 第19-20页 |
| ·T0代转化苗的阳性检测 | 第20-21页 |
| ·T0代转化苗拷贝数检测 | 第21-22页 |
| ·Real-time PCR 表达量检测 | 第22页 |
| 4 小结 | 第22-23页 |
| 第三章 酵母双杂交载体和衰老文库的构建 | 第23-32页 |
| 1 酵母双杂交载体和衰老文库的构建原理 | 第23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-28页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·载体和菌株 | 第23页 |
| ·酵母杂交的培养基 | 第23-24页 |
| ·方法 | 第24-28页 |
| ·酵母双杂交载体构建方法 | 第24-25页 |
| ·衰老文库构建方法 | 第25-27页 |
| ·cDNA 的合成 | 第25-26页 |
| ·重组交换及文库生成 | 第26-27页 |
| ·LiAc 酵母高效转化法 | 第27页 |
| ·自激活检测方法 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-31页 |
| ·酵母双杂交载体流程图 | 第28页 |
| ·总 RNA 和 cDNA 的质量检测 | 第28-29页 |
| ·AD-cDNA 文库库效率的鉴定 | 第29页 |
| ·自激活检测结果 | 第29-31页 |
| 4 小结 | 第31-32页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第32-34页 |
| 参考文献 | 第34-41页 |
| 附录 | 第41-47页 |
| 部分实验的详细操作程序 | 第41-47页 |
| Protocol 1：大肠杆菌和农杆菌感受态的制备 | 第41页 |
| Protocol 2：质粒抽提 | 第41-42页 |
| Protocol 3：小样法抽提植物总 DNA | 第42页 |
| Protocol 4：大样抽提法抽提植物总 DNA | 第42-43页 |
| Protocol 5：培养基配方 | 第43-47页 |
| 致谢 | 第47页 |
