| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-26页 |
| ·除草剂概述 | 第11-13页 |
| ·除草剂的分类 | 第12页 |
| ·除草剂的作用机制 | 第12页 |
| ·抗除草转基因作物的提出与发展 | 第12-13页 |
| ·草甘膦生物抗性研究 | 第13-21页 |
| ·草甘膦简介 | 第14-16页 |
| ·草甘膦生物抗性获得途径 | 第16-17页 |
| ·草甘膦代谢基因研究进展 | 第17-21页 |
| ·宏基因组学概述 | 第21-25页 |
| ·宏基因组学研究策略 | 第22-24页 |
| ·宏基因组学发掘新基因方面的应用 | 第24-25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 第二章 材料和方法 | 第26-49页 |
| ·实验材料 | 第26-36页 |
| ·土壤样品来源 | 第26页 |
| ·菌种与质粒 | 第26-27页 |
| ·本研究所用到的引物 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27-29页 |
| ·主要仪器 | 第29-31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·常用溶液 | 第31-36页 |
| ·实验方法 | 第36-49页 |
| ·土壤总DNA的分离 | 第36-37页 |
| ·土壤总DNA的纯化 | 第37-38页 |
| ·宏基因组文库构建 | 第38-39页 |
| ·pEASY-E1表达载体构建方法 | 第39页 |
| ·EZ-Tn5 | 第39-40页 |
| ·插入片段的生物信息学分析 | 第40页 |
| ·SanPrep柱式DNA胶回收试剂盒回收步骤 | 第40-41页 |
| ·SanPrep柱式PCR产物纯化试剂盒纯化步骤 | 第41页 |
| ·SanPrep柱式质粒DNA小量抽提试剂盒纯化步骤 | 第41-42页 |
| ·菌落PCR筛选阳性克隆 | 第42页 |
| ·PCR扩增goA基因 | 第42-43页 |
| ·目的基因的表达与纯化 | 第43-44页 |
| ·BioLogic Duoflow蛋白纯化系统操作流程 | 第44页 |
| ·Bradford蛋白质定量试剂盒操作步骤 | 第44-45页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第45页 |
| ·Western-blot实验方法 | 第45-47页 |
| ·甘氨酸氧化活性测定方法 | 第47-48页 |
| ·甘氨酸氧化酶动力学测定方法 | 第48页 |
| ·甘氨酸氧化酶分子动力学分析 | 第48-49页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第49-69页 |
| ·引言 | 第49页 |
| ·实验结果 | 第49-69页 |
| ·土壤总DNA的提取 | 第49-50页 |
| ·土壤总DNA的纯化 | 第50-51页 |
| ·宏基因组文库的构建 | 第51-52页 |
| ·基因组文库的评价 | 第52页 |
| ·文库的筛选 | 第52-53页 |
| ·阳性克隆质粒pGlp-1插入序列分析 | 第53-54页 |
| ·质粒pGlp-1插入片段的序列分析 | 第54-56页 |
| ·goA序列的扩增与表达载体构建 | 第56-57页 |
| ·GOA异源表达 | 第57-60页 |
| ·GOA底物特异性 | 第60-61页 |
| ·最适温度 | 第61页 |
| ·GOA温度稳定性 | 第61-62页 |
| ·最适pH | 第62-63页 |
| ·GOA pH稳定性 | 第63-64页 |
| ·酶动力学分析 | 第64-65页 |
| ·GOA分子动力学研究 | 第65-69页 |
| 第四章 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 附录 | 第76-77页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |